Оригинальное исследование Адаптивный иммунитет и генетические аспекты прогрессирования туберкулезной инфекции у детей
М. А. Плеханова
Клеточный иммунитет и цитокин интерферон гамма (ИФН-γ) имеют важное значение для формирования устойчивости организма к микобактериям туберкулеза (МБТ), но точный механизм появления иммунитета к туберкулезу (ТБ) неизвестен. В исследовании оценивали иммуный ответ при развитии ТБ и связь полиморфизма rs2069705 (T-1488C) гена IFNG с выраженностью специфических иммунологических реакций у детей. Участниками исследования стали 310 детей до 18 лет, распределенные по 3 группам: группа ТБ — 110 детей с установленным по результатам комплексного обследования ТБ; группа ЛТИ — 156 детей с установленной латентной туберкулезной инфекцией; группа НТ — 44 ребенка, не инфицированные МБТ. Проводили иммунологические и молекулярно-генетические исследования, в частности, оценивали иммунный статус пациентов и распределение частот генотипов по изучаемому полиморфизму, в том числе в контексте эффективности вакцинирования против ТБ. Иммуный статус детей с ЛТИ характеризовался лишь слабо выраженной активацией клеточного иммунитета, а детей с ТБ — появлением у воспалительного процесса черт хронического за счет недостаточной функциональной активности клеток иммунной системы (p < 0,05). При оценке иммуного ответа по уровню синтеза ИФН-γ, индуцированного специфическими митогенами (PPD-L, CFP32B, Rv2660c, ESAT6, 85a и ESAT6-CFP10), установили снижение ответа у больных ТБ, которое было ассоциировано с гетерозиготным генотипом по полиморфизму rs2069705 гена IFNG (p < 0,05). При гомозиготных генотипах ТТ и СС ответ усиливался. Также установили, что низкая эффективность противотуберкулезной вакцинации также связана с гетерозиготным генотипом (50 %), а высокая — с генотипом, гомозиготным по аллелю Т (40 %), что может свидетельствовать о его протективной роли. Полученные результаты указыают на то, что изучаемый полиморфизм (гетерозиготный генотип) можно рассматривать в качестве маркера развития туберкулезной инфекции у детей.
Статья получена: 24.09.2017
Опубликовано online: 13.01.2018
DOI:
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6728
Оригинальное исследование Иммунологическая память, формируемая в ответ на вакцинацию противотуберкулезной рекомбинантной вакциной «ГамТБвак»: клинические исследования вакцины на здоровых добровольцах
Д. А. Клейменов, Е. П. Мазунина, В. Г. Лунин, Е. Ю. Коптев, В. А. Мануйлов, В. А. Гущин, А. П. Ткачук
В настоящее время единственной применяемой в мире вакциной против туберкулеза является БЦЖ — живой аттенуированный штамм Mycobacterium bovis. Она защищает детей от милиарного туберкулеза и туберкулезного менингита, но не уберегает взрослых от легочного туберкулеза и реактивации латентной формы инфекции. Для повышения эффективности вакцины БЦЖ у взрослых и подростков разрабатываются рекомбинантные бустерные вакцины, несущие антигены как M. bovis, так и M. tuberculosis. В статье приводятся первые данные о безопасности и иммуногенности кандидатной рекомбинантной вакцины для профилактики туберкулеза «ГамТБвак». Изучали иммуногенность препарата на 12 добровольцах. Оценку проводили по изменению у испытуемых параметров клеточного и гуморального иммунитета (методами IGRA-тест и мультиплексный иммунологический xMAP анализ соответственно) в течение 20 нед. после введения препарата. На 140-й день с момента первой вакцинации у 10 (83 %) из 12 иммунизированных «ГамТБвак» добровольцев сохранялся положительный клеточный ответ на все антигены, входящие в состав вакцины, по сравнению с уровнем до вакцинации. Оба смысловых антигена CFP10 и ESAT6 индуцировали достоверную выработку IgG антител с 98-го и 140-го дней наблюдения соответственно. Антиген Ag85A вызывал сравнительно низкий гуморальный ответ. В целом, изучаемая рекомбинантная вакцина «ГамТБвак» обладает необходимым уровнем безопасности и активирует клеточное и гуморальное звенья адаптивного иммунитета, формирует клеточную память.
Статья получена: 20.09.2017
Опубликовано online: 13.01.2018
DOI:
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 8817
Обзор Иммунологическая память как основа рациональной вакцинопрофилактики населения. Обоснование создания системы сероэпидемиологического мониторинга в России
В. А. Гущин, В. А. Мануйлов, Е. П. Мазунина, Д. А. Клейменов, Т. А. Семененко, А. Л. Гинцбург, А. П. Ткачук
Иммунологическая память — одна из ключевых функций адаптивного иммунитета, позволяющая организму противостоять инфекциям, предотвращать развитие онкологических и аутоиммунных заболеваний. Важнейшее свойство иммунологической памяти — это способность с помощью предсуществующих антиген-специфичных клонов B- и T-клеток быстро и эффективно реагировать на патоген, с которым у организма был контакт в прошлом. Наличие долгоживущих популяций клеток, надежно распознающих инфекционные агенты, позволяет использовать вакцинацию в качестве главного элемента превентивной медицины. На уровне сообщества людей иммунологическая память отдельных индивидуумов определяет феномен популяционного (коллективного) иммунитета, который чрезвычайно важен для обеспечения биобезопасности в масштабе государства. В обзоре описаны актуальные исследования популяционного иммунитета в контексте вакцинопрофилактики. Рассматриваются принципы организации серологических исследований, опыт серологического мониторинга в различных странах, существующие и перспективные аналитические подходы к изучению иммунологической памяти. Обсуждаются недостатки принятых в России способов оценки популяционного иммунитета и предлагается к реализации система сероэпидемиологического мониторинга.
Статья получена: 24.09.2017
Опубликовано online: 11.12.2017
DOI:
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 10321
Метод Возможность проведения фотон-захватной терапии с использованием 6 МВ фотонного излучения
Е. С. Воробьева, А. А. Липенгольц, А. А. Черепанов, Е. Ю. Григорьева, И. Н. Нечкина, Н. С. Калыгина, А. В. Соковиков, В. Н. Кулаков, И. Н. Шейно
Фотон-захватная терапия (ФЗТ) — метод лучевой терапии, который обеспечивает повышение поглощенной дозы в опухоли без дополнительной лучевой нагрузки на окружающие нормальные ткани. В работе представлены результаты экспериментального исследования возможности увеличения поглощенной дозы при ФЗТ за счет использования 6 МВ фотонного излучения. При помощи водных растворов ферросульфатных дозиметров было проведено прямое измерение величины поглощенной дозы в воде, содержащей йод (дозоповышающий агент) в концентрации от 2,5 до 50 мг/мл. Облучение растворов проводили на линейном медицинском терапевтическом ускорителе СЛ75-5-МТ (Россия) в дозе 5 Гр без учета возможного увеличения поглощенной дозы за счет присутствия атомов йода. Для концентраций йода 2,5–20 мг/мл достоверного увеличения поглощенной дозы зарегистрировано не было. Для концентрации йода 50 мг/мл увеличение поглощенной дозы составило 13 ± 5 % (p < 0,05). Поскольку типичные концентрации дозоповышающих агентов при введении в организм пациентов, как правило, находятся в диапазоне 2,5–15 мг/мл, использование 6 МВ фотонного излучения для достижения терапевтически значимого противоопухолевого эффекта не представляется целесообразным.
Статья получена: 25.08.2017
Опубликовано online: 31.10.2017
DOI: 10.24075/brsmu.2017-04-10
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6496
Клинический случай Идентификация нетипичного бактериального вида Streptococcus intermedius, вызвавшего абсцесс головного мозга, секвенированием по Сэнгеру гена 16S рРНК из ДНК образца гноя
М. А. Гордукова, Ю. В. Дивилина, О. В. Мишукова, Е. В. Галеева, А. П. Продеус, М. Л. Филипенко
Представлено описание клинического случая: наблюдали девочку в возрасте 14 лет 11 мес с абсцессом головного мозга, для которого не удалось установить возбудителя стандартными микробиологическими методами. До и в течение периода госпитализации у ребенка отсутствовала лихорадка, а многие антибиотики вызывали аллергические реакции, в связи с чем диагностика и терапия инфекции были затруднены. Пациентке были выполнены три операции. Четырежды производили посев гноя из абсцесса, но ни разу не наблюдали роста культуры. Дважды проводили ПЦР-анализ, но в обоих случаях результаты исследования были отрицательными. Тогда был амплифицирован и секвенирован по Сэнгеру ген 16S рРНК из образца ДНК, экстрагированной из гноя. С помощью программы BLAST была показана высокая гомология (99 %) определенной последовательности с последовательностью гена 16S рРНК бактерии Streptococcus intermedius (штамм ChDC B589, KF733728.1), для которой ранее была описана роль в развитии абсцессов головного мозга. Терапия ex juvantibus против этого микроорганизма, начатая еще до получения результатов секвенирования, привела к положительной динамике и купированию процесса у ребенка. Таким образом, в отдельных случаях секвенирование может являться практически единственным способом идентификации потенциального возбудителя.
Статья получена: 04.07.2017
Опубликовано online: 31.10.2017
DOI: 10.24075/brsmu.2017-04-09
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 7357
Оригинальное исследование Ассоциация полиморфных вариантов генов ACE и BDKRB2 с параметрами вариабельности сердечного ритма у спортсменов Республики Карелии
С. Н. Коломейчук, Р. В. Алексеев, А. А. Путилов, А. Ю. Мейгал
Целью настоящего исследования было изучение распределения частоты аллелей гена ангиотензинпревращаюшего фермента АСЕ и рецептора β2 брадикинина у спортсменов различной спортивной специализации, а также выявление взаимосвязи генотипа с параметрами вариабельности сердечного ритма. Методом ПЦР в группе атлетов (n = 75, мужчины) исследован полиморфизм генов ACE I/D и BDKRB2 +9/−9. Показано достоверное отличие между группами спортсменов по частоте генотипа −9/−9 гена BDKRB2. Уровень парасимпатической активности преобладает у носителей аллеля I гена ACE. В группе спортсменов с генотипом D/D регистрируются низкие значения временных параметров вариабельности сердечного ритма. Согласно полученным данным, временные параметры ритма сердца спортсменов с генотипом ACE I/I отличаются от значений групп ACE I/D и ACE D/D. У гомозигот по аллелю −9 гена BDKRB2 отмечены самые низкие значения ЧСС, что указывает на усиление парасимпатических влияний в системе регуляции сердечного ритма. Аллель −9 гена BDKRB2 ассоциирован с минимальной продолжительностью последовательных сокращений сердца. Полиморфные локусы ACE I/D и BDKRB2 +9/−9 можно рассматривать как контрольные показатели процесса регуляции параметров сердечной деятельности при проведении первичного отбора спортсменов в Республике Карелии.
Статья получена: 25.08.2017
Опубликовано online: 30.10.2017
DOI: 10.24075/brsmu.2017-04-08
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6821
Оригинальное исследование Определение частоты встречаемости мутаций в гене PAH с применением комбинации технологий ПЦР «в реальном времени» и высокопроизводительного секвенирования у больных фенилкетонурией Московского региона
А. И. Никифорова, Д. Д. Абрамов, В. В. Кадочникова, Г. Ю. Зобкова, К. А. Огурцова, Н. О. Брюханова, Е. А. Шестопалова, Т. О. Кочеткова, Е. С. Шубина, А. Е. Донников, Д. Ю. Трофимов
Определена частота встречаемости мутаций в гене фенилаланингидроксилазы (PAH) у неродственных детей (n = 71) с диагнозом «фенилкетонурия», наблюдавшихся в Морозовской детской городской клинической больнице (г. Москва) в 2015–2016 гг. Для выявления частых вариантов мутаций в гене PAH была применена оригинальная технология определения нуклеотидных замен на основе ПЦР в режиме «реального времени» (real-time PCR), выполнено дополнительное исследование гена методом целевого секвенирования нового поколения (NGS). Эффективность диагностирования методом ПЦР при выявлении носительства патогенного аллеля в выборке составила 83 %. При проведении комбинированной диагностики мутации в двух аллелях были выявлены в 66 случаях из 71. Всего определено 26 патогенных мутаций в гене PAH, наиболее часто представлены мутации p.R408W (47,9 %) и p.R261Q (9,9 %). Распространенные в России IVS10nt546, IVS12+1G>A, p.R158Q, p.Y414C, IVS4+5G>T выявлены с частотами от 4,2 до 2,8 %. Суммарная частота встречаемости половины определенных вариантов мутаций составила менее 10 %. По итогам секвенирования гена PAH обнаружен ряд ранее не описанных для Московского региона мутаций различного функционального типа: p.D222Terfs, p.R111Ter, p.F161S, p.G188D, p.R270K, p.L311P, p.F55L, p.F55Leufs, IVS1+5G>T, IVS8-7A>G. Мутации p.D222Terfs и p.R111Ter (с частотами 2,1 % каждая) являются потенциальными кандидатами на включение в состав скрининговой панели. Полученные данные могут быть использованы для разработки схем генодиагностики фенилкетонурии.
Статья получена: 07.08.2017
Опубликовано online: 30.10.2017
DOI: 10.24075/brsmu.2017-04-07
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 8268
Клинический случай Семейный случай синдрома Коэна: клиническое наблюдение
О. А. Левченко, Р. А. Зинченко, А. В. Лавров
Синдром Коэна — редкое аутосомно-рецессивное заболевание, характеризующееся умственной отсталостью, миопией, гипотонией, ожирением и деформацией костей. Заболевание имеет выраженный меж- и внутрисемейный полиморфизм, что затрудняет его клиническую диагностику. Ген VPS13B, мутации в котором приводят к развитию синдрома, имеет 62 экзона, и полный его анализ в практике не применяется. Нами описан семейный случай синдрома Коэна. Брат и сестра из метисированного абазино-черкесского брака имеют диагноз «умственная отсталость в стадии имбецильности». У обоих пробандов с рождения отмечена задержка психомоторного развития. В школе учиться не смогли, писать, читать, считать не научились. Несмотря на некоторые общие неспецифические признаки, различия в фенотипе не позволили установить диагноз, и был назначен полноэкзомный анализ. Найдена однонуклеотидная замена с.7603C>T, приводящая к образованию преждевременного стоп-кодона R2535* в гене VPS13B. Носителями мутации оказались мать, больные сибсы и один из двух здоровых сибсов. Вторую мутацию найти не удалось. По итогам детального анализа фенотипа и с учетом выявленной мутации установлен синдрома Коэна у обоих пациентов.
Статья получена: 02.08.2017
Опубликовано online: 30.10.2017
DOI: 10.24075/brsmu.2017-04-06
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 9821