Распространение штаммов Mycobacterium tuberculosis с множественной и широкой лекарственной устойчивостью требует разработки новых противотуберкулезных препаратов. Ранее нами были исследованы соединения класса замещенных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов, показавшие способность ингибировать серин-треониновые протеинкиназы в оригинальной тест-системе M. smegmatis aphVIII+. Для определения механизма действия кандидатов в лекарственные препараты необходимо исследование мутаций в геноме микобактерий, приводящих к устойчивости к этим препаратам. Целью работы было найти и охарактеризовать мутации, определяющие устойчивость штаммов M. smegmatis. Проводили полногеномное секвенирование девяти мутантов, устойчивых к трем соединениям класса замещенных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов. В семи из девяти мутантных штаммов обнаружена мутация (Y52H) в гене MSMEG_1601, кодирующем белок с неизвестной функцией и являющемся консервативным для микобактерий, причем в трех штаммах дополнительно обнаружены две мутации в гене MSMEG_1380, кодирующем транскрипционный регулятор. В двух оставшихся мутантных штаммах обнаружены мутации в генах MSMEG_0641 и MSMEG_2087, кодирующих белки- транспортеры. Мутаций в генах, кодирующих СТПК, обнаружено не было. Вероятно, они не являются основными мишенями исследуемых соединений. Дальнейшее изучение функции белка MSMEG_1601 представляет интерес в случае, если этот белок является новой биомишенью, либо частью нового механизма реализации устойчивости к потенциальным противотуберкулезным препаратам.