Оригинальное исследование Перспективы генной терапии гемопоэтическими стволовыми клетками
Я. М. Валиева, К. В. Попов
По тактике доставки терапевтических конструкций генную терапию разделяют на in vivo и ex vivo. При терапии in vivo вектор, содержащий терапевтическую конструкцию, вводят пациенту. При терапии ex vivo клетки извлекают из организма пациента, подвергают генетической модификации и возвращают обратно. В ex vivo терапии наследственных заболеваний модификации чаще всего подвергаются гемопоэтические стволовые клетки. Несмотря на преимущество терапии in vivo, состоящее в возможности масштабирования производства и удобства применения готового препарата, для ряда генетических заболеваний сохраняется актуальность терапии на основе трансплантации генетически модифицированных гемопоэтических стволовых клеток.
Статья получена: 25.12.2024
Опубликовано online: 31.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.074
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 244
Оригинальное исследование Сравнительный анализ результатов ВПЧ-тестирования в образцах цервикального эпителия и биопсийного материала шейки матки
Г. Р. Байрамова, Д. Ю. Трофимов, А. О. Андреев, О. В. Бурменская, А. В. Асатурова, В. Д. Пивень
В настоящее время при проведении скрининга на рак шейки матки в качестве первичного метода диагностики все чаще применяют тестирование на ДНК ВПЧ. Однако генотипы вируса папиломы человека (ВПЧ), регистрируемые при исследовании цервикальных мазков, могут отличаться от результатов тестирования в биоптированных фрагментах шейки матки. Целью исследования было изучить особенности детекции ДНК ВПЧ парных образцов эпителия цервикального канала и биопсийного материала шейки матки. ВПЧ-позитивным пациенткам (n = 99) была выполнена прицельная биопсия шейки матки. Регистрация ДНК ВПЧ произошла 175 раз в биоматериале, полученном из цервикального канала, и 111 раз в гистологических блоках. В группе пациенток с хроническим цервицитом показатель совпадения результатов тестирования на ДНК ВПЧ составил 28,3%, для группы с LSIL — 45%, для группы с HSIL — 67,7%. При низкой вирусной нагрузке ВПЧ соответствие результатов наблюдалось в 27,1% случаев, при умеренной вирусной нагрузке — в 35,4%, при высокой вирусной нагрузке — в 82,3%. Обнаружена относительно сильная корреляционная связь между уровнем вирусной нагрузки и вероятностью совпадения результатов ВПЧ-тестирования: при увеличении уровня вирусной нагрузки ВПЧ на 1 lg наблюдается увеличение процента соответствия результатов тестирования на ДНК ВПЧ между парными образцами на 9,3%.
Статья получена: 13.12.2024
Опубликовано online: 31.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.073
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 215
Оригинальное исследование Рекомбинантный вирус осповакцины, экспрессирующий интерферон типа 1 как платформа для селективной иммунотерапии глиобластомы и меланомы
Е. Р. Набережная, А. В. Соболева, П. О. Воробьёв, В. В. Вадехина, Г. М. Юсубалиева, И. В. Исаева, В. П. Баклаушев, П. М. Чумаков, А. В. Липатова
Иммунотерапия онколитическими вирусами (ОВ) становится полноценным методом неоадъювантной терапии в парадигме доказательной медицины для все большего числа онкологических заболеваний. Особенно актуально применение ОВ для иммунологически «холодных» опухолей, вызывающих минимальный иммунный ответ и обладающих выраженным иммуносупрессивным опухолевым микроокружением. Для стимуляции противоопухолевого ответа применимы рекомбинантные ОВ, несущие последовательности иммуноактивирующих белков. Целью работы было исследовать онкоселективность и противоопухолевую активность рекомбинантного ОВ, созданного на базе штамма LIVP вируса осповакцины, экспрессирующего последовательности интерферона-альфа человека и мыши (hIFNα и mIFNα соответственно). В экспериментах с помощью метода Рида и Менча было показано, что созданные рекомбинантные ОВ проявляют онкоселективность в отношении опухолевых линий соответствующего вида. Для LIVP-hIFNα показана способность эффективно заражать линии аденокарциномы и глиобластомы человека. Для LIVP-mIFNα in vitro продемонстрирована селективность в отношении глиомы Gl261 и меланомы B16. В эксперименте in vivo на мышах линии C57Bl/6 c подкожной меланомой В16 показана способность LIVP-mIFNα после внутривенного введения уменьшать объем подкожного аллографта опухоли и увеличивать инфильтрацию опухоли CD8+- и NK-клетками. Созданный рекомбинантный вирус может быть потенциальной платформой для разработки онколитической виротерапии меланомы и глиобластомы человека.
Статья получена: 26.11.2024
Опубликовано online: 30.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.072
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 232
Оригинальное исследование Повышенная физическая нагрузка в условиях нормоксии вызывает идиопатическую кахексию у Heterocephalus glaber
М. А. Адрианов, М. Ю. Бобров, И. З. Мамедов, В. Н. Манских, А. А. Рачкова, А. М. Шелехова, Ч. М. Эльдаров, О. В. Аверина, М. Ю. Высоких
Обогащение среды обитания живущих в неволе грызунов Heterocephalus glaber (голых землекопов), позволившее им реализовать врожденный поведенческий паттерн рытья плотного грунта, неизвестным образом привело к появлению в колонии необычных животных с признаками кахексии, отличавшихся от остальных животных сниженным индексом массы тела на фоне уменьшения доли подкожного жира. Сами животные демонстрировали при этом агрессивное пищевое поведение, но не набирали веса даже после прекращения рытья при отсоединении камеры с грунтом. Целью работы было выяснить патогенетический механизм наблюдаемого явления. Для этого из колонии изъяли животных с признаками кахексии (одна самка и два самца возрастом 4–5 лет), а также животных, не имеющих данных признаков (две самки и один самец возрастом 4–5 лет) в качестве контрольных. При гистологическом анализе тканей были выявлены гипертрофия сердца и гиперлипофусциноз печени. На гипетрофию сердца также указывали результаты биоинформатического анализа секвенирования микроРНК сердца животных, который показал повышенный уровень микроРНК, ответственных за повышение активности деления клеток, и снижение активности апоптоза в сердце. Эти данные свидетельствуют о том, что животные, находясь в среде обитания с повышенным для них содержанием кислорода (21% против 8% в естественной среде обитания под землей), при выполнении физических нагрузок испытали сильный окислительный стресс, что привело к нарушению работы регуляторных систем организма, подъему метаболизма в покое, перегрузке работы сердечно-сосудистой системы и повреждению органов и тканей. Таким образом, голые землекопы могут вести нормальную для них физическую активность только в условиях низкого содержания кислорода.
Статья получена: 11.12.2024
Опубликовано online: 30.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.071
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 219
Обзор Подходы к терапии синдрома Криглера–Найяра 1-го типа у детей
М. С. Готье, А. В. Дегтярева, Д. Н. Дегтярев, Л. В. Ушакова, Е. А. Филиппова, М. Б. Албегова, А. С. Бавыкин, А. М. Савилова, С. И. Жданова
Обзор посвящен изучению этиологии, патогенеза, клинической картины и, прежде всего, современных методов лечения синдрома Криглера–Найяра (СКН) 1-го типа. Рассмотрены актуальные данные об эффективности и безопасности существующих терапевтических стратегий. Эффективная терапия данного заболевания основана на ранней диагностике и незамедлительном начале лечения, что критически важно для предотвращения инвалидизирующих неврологических осложнений, связанных с билирубиновой энцефалопатией у пациентов с СКН 1-го типа. Ключевым методом лечения является продолжительная фототерапия, а радикальной мерой — трансплантация печени. Последние достижения в области генной терапии и использования мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток открывают новые возможности для разработки альтернативных, менее инвазивных методов лечения, направленных на улучшение качества жизни пациентов с этим заболеванием и снижение их зависимости от длительной фототерапии и послеоперационных рисков, связанных с трансплантацией печени.
Статья получена: 06.12.2024
Опубликовано online: 30.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.070
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 203
Оригинальное исследование Оценка эффекта гипотермии после моделированной ишемической гипоксической энцефалопатии по метаболому крови
Ч. М. Эльдаров, Н. Л. Стародубцева, Ю. А. Шевцова, К. В. Горюнов, О. В. Ионов, Д. Н. Силачев
Гипоксически-ишемическая энцефалопатия (ГИЭ) — тяжелая неонатальная патология, вызывающая различные неврологические нарушения, одна из основных причин смертности доношенных детей. Ключевым методом лечения умеренной и тяжелой ГИЭ является терапевтическая гипотермия (ТГ) — снижение температуры тела новорожденных, которая существенно уменьшает риск летального исхода и способствует улучшению долгосрочных исходов у детей с ГИЭ. Однако для применения этого метода критически важна своевременная диагностика и определение тяжести заболевания, кроме того он имеет ряд ограничений и требований. Актуальны изучение механизма действия ТГ, поиск основных метаболических путей и потенциальных мишеней для терапии ГИЭ. Целью работы было с помощью методов ВЭЖХ-МС исследовать метаболом сухих пятен крови как менее инвазивной для пациента пробы для поиска маркеров и метаболических путей, наиболее активных при ТГ и, вероятно, опосредующих ее положительные эффекты. В результате были обнаружены изменения в классе фосфоглицеролипидов, что может свидетельствовать о важной роли метаболизма эндоканнабиноидов в защите организма от ГИЭ. Кроме того, были изменены пути метаболизма убихинона, ряда жирных кислот, а также желчных кислот. Таргетные количественные исследования данных метаболитов позволят оптимизировать диагностику ГИЭ и ее терапию на основе выявленных потенциальных мишеней.
Статья получена: 03.12.2024
Опубликовано online: 29.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.069
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 209
Оригинальное исследование Генофонд Урало-Поволжья: генетическая история населения Мордовии по данным филогеографии гаплогруппы N3a1-Y23475 Y-хромосомы
А. Т. Агджоян, Д. С. Адамов, А. Ю. Потанина, М. М. Воронина, И. О. Горин, А. Г. Штрунов-Шлыков, С. М. Кошель, Е. В. Балановская, Г. Ю. Пономарёв
Показано, что Y-гаплогруппа N3a1-B211 распространена в популяциях финноязычных народов Урало-Поволжья. Целью исследования было изучение геногеографии и филогеографии самого западного варианта этой гаплогруппы: ветви N3a1-Y23475. При детальном генотипировании 395 носителей гаплогруппы N3a1-B211 из 29 популяций Восточной Европы, Урало-Поволжья и Сибири выявлено 78 носителей ее западной ветви, которая достигает максимальных частот в популяциях Мордовии (8% — у мокши, 9% — у эрзи, 25% — у теньгушевских эрзи-шокши). Низкие частоты N3a1-Y23475 в тюркоязычных и славянских популяциях могут указывать на роль финноязычного субстрата в их генофондах. По данным филогенетического анализа ветвь N3a1-Y23475 возникла 2,3–2,7 тыс. лет назад, но активное накопление ее современного разнообразия происходило преимущественно в популяциях Мордовии в течение последнего тысячелетия. Проведено генотипирование ДНК 74 носителей гаплогруппы N3a1-Y23475 по панели 37 Y-STR. Созданная филогенетическая сеть Y-STR гаплотипов указывает на два периода демографического роста у предков коренного населения Мордовии: около 1000 лет назад в популяциях праэрзи и прашокши, около 500 лет назад — в популяциях мокши и шокши. Выявленное наличие гаплогруппы N3a1-Y23475 у северных и южных алтайцев требует продолжения исследования. Положение северных алтайцев-кумандинцев на филогенетической сети предположительно отражает миграцию мордовского населения на Алтай в XIX–XX вв. Генетическая датировка для южных алтайцев-теленгитов может указывать на связь с прародиной гаплогруппы N3a1 в Южной Сибири до расселения ее древних носителей в Урало-Поволжье около 1,7 тыс. лет назад.
Статья получена: 10.12.2024
Опубликовано online: 29.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.066
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 253
Оригинальное исследование Модифицированные микропробирки — перспективная основа для иммобилизации антител иммунозахвата на примере SARS-CoV-2
Е. О. Рубальский, Р. А. Абдрахманова, Г. Р. Баева, Т. С. Рубальская, М. В. Лазько, С. В. Поройский, Д. В. Щебляков, И. В. Фаворская, В. А. Гущин
Иммунозахват антителами на твердой фазе является важным инструментом в иммунологических исследованиях, но традиционные полистироловые планшеты подвержены деформации при термоциклировании и перекрестной контаминации образцов, что снижает точность и воспроизводимость при включении в исследование молекулярно-генетических методов. Разработка альтернативных решений, таких как модифицированные полипропиленовые пробирки с полистироловым покрытием, позволяет устранить эти ограничения. Целью исследования было создать и оценить эффективность нового подхода к иммунозахвату SARS-CoV-2 с использованием модифицированных пробирок. Для анализа использовали моноклональные антитела P2C5 и R107, а также инактивированные штаммы ГК2020/1 (Ухань) и hCoV-19/Russia/MOW-PMVL-51/2021 (Омикрон). Иммобилизацию антител, сорбцию вирусных частиц и выделение РНК проводили с применением модифицированных пробирок, стандартных планшетов и пробирок без покрытия. Основные результаты показали, что модифицированные пробирки с полистироловым покрытием обеспечивали лучший иммунозахват по сравнению с планшетами (p < 0,0001), особенно при использовании антител P2C5, эффективных против различных генетических линий SARS-CoV-2, включая Омикрон. Антитела R107 продемонстрировали ограниченную специфичность, не превышающую уровень контрольной группы с бычьим сывороточным альбумином. Анализ перекрестной контаминации выявил ее наличие в 14 из 288 образцов в планшетах, тогда как в модифицированных пробирках контаминации образцов не было. Таким образом, использованные для высокоточных молекулярных исследований модифицированные пробирки имеют преимущества, так как обеспечивают снижение риска перекрестной контаминации и улучшение эффективности иммунозахвата.
Статья получена: 29.11.2024
Опубликовано online: 28.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.068
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 224