Оригинальное исследование Дифференцировка иПСК в предшественники эпителия роговицы в трехмерных условиях in vitro
Е. Б. Жигмитова, А. В. Косых, Н. Г. Гурская
Заболевания, связанные с дефицитом лимбальных стволовых клеток (хронические эрозии, рубцевание роговицы), требуют новых подходов регенеративной медицины. Цель исследования ― разработать протокол получения клеток-предшественников эпителия лимба и роговицы из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (иПСК). Использовали метод дифференцировки иПСК в направлении органоида глаза для получения трехмерных гетерогенных структур за три недели. Полученные органоиды содержат клетки-предшественники эпителия роговицы, экспрессирующие кератин 3 и коллаген 7, что подтверждает возможность генерации функционального эпителия in vitro. Протокол позволяет создавать изогенные пациент-специфичные линии для терапии лимбальной недостаточности и дистрофического буллезного эпидермолиза, в том числе после предварительного редактирования генома иПСК.
Статья получена: 25.11.2025
Опубликовано online: 27.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.070
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 20
Оригинальное исследование Противовирусная активность мРНК, кодирующих внутриклеточные scFv-фрагменты антител к консервативным эпитопам вируса гриппа
М. А. Плотникова, В. А. Олейник, С. А. Клотченко
Один из перспективных подходов к эффективной борьбе с гриппом — терапия с использованием моноклональных антител. Целью работы было провести оценку противовирусного действия внутриклеточных scFv-фрагментов антител, которые были трансфицированы в клетку в виде экзогенной мРНК, транслировались и были способны к высокоаффинному связыванию с вирусными антигенами непосредственно внутри клетки. В качестве вирусных мишеней были выбраны два белка вируса гриппа — гемагглютинин (антитело FI6) и нуклеопротеин (антитело 2/3). Каждый из scFv-фрагментов, кодируемых мРНК, был получен в двух формах: с сигнальным пептидом (SP) для секреции во внеклеточное пространство (scFv-SP) и без него (scFv-WO) — для внутриклеточного функционирования в цитозоле. Показана различная локализация этих белков в клетке: scFv-SP обнаруживались в областях, характерных для эндоплазматического ретикулума и комплекса Гольджи, в то время как scFv-WO были диффузно распределены по цитоплазме. Продемонстрировано, что мРНК, кодирующие scFv-FI6-SP и scFv-2/3-SP, а также мРНК, кодирующая scFv-2/3-WO, проявляли противовирусное действие в отношении вируса гриппа А на клеточной модели. Наибольшим противовирусным эффектом обладала мРНК scFv-FI6-SP: она приводила к снижению вирусной нагрузки относительно контроля примерно в 10 раз. В отношении вируса гриппа В обе мРНК, кодирующие scFv-2/3 (как с SP, так и без него), приводили к снижению вирусной нагрузки в среднем на 50% относительно контроля. Таким образом, показано, что внутриклеточные антитела обладают высоким противовирусным потенциалом и открывают возможности для воздействия на новые, перспективные вирусные мишени, которые ранее были недоступны для лекарственной терапии.
Статья получена: 27.11.2025
Опубликовано online: 26.12.2025
DOI:
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 44
Оригинальное исследование Этиологическая структура энтеровирусной инфекции у детей в Московском регионе
В. А. Полякова, Е. Е. Давыдова, А. Р. Лупарев, А. Д. Мацвай, Н. И. Гнусарева, М. А. Гордукова, Е. В. Галеева, А. А. Толоконцева, Г. А. Шипулин
Разнообразие и смена эпидемически значимых энтеровирусов (EV) приводит к постоянному изменению характера клинической картины и уровня заболеваемости. Цель работы ― изучить случаи энтеровирусной инфекции (ЭВИ) у госпитализированных детей в период восстановление эпидемического процесса после пандемии COVID-19. Был собран клинический материал от 156 пациентов с ЭВИ различных возрастных групп.  Проведено генотипирование вирусов методом секвенирования по Сэнгеру 5’UTR-VP2 и VP1 фрагментов генома. Выявлено 16 типов энтеровирусов, для одного удалось установить только вид (EV-C). Доминирующим типом EV оказался Коксаки CV-А6 ― доля составила 80,6 % (95% ДИ: 66,7‒95,5) в 2021 г. и 36,1 % (95% ДИ: 27,5‒44,6) в 2022 г. Чаще всего CV-А6 вызывал кожные поражения (экзантемы и энтеровирусный везикулярный стоматит с экзантемой) и респираторные инфекции.  В 2022 г. наблюдался рост доли CV-A10  ―  27,0%  (95% ДИ: 19,2‒34,9) в 2022 г. против 6,4%  (95% ДИ: 0‒15,1) в 2021 г., наиболее частым проявлением CV-A10 была герпетическая ангина. Самые тяжелые случаи ЭВИ наблюдались при ЕСНО6 ― у четверых из 11 пациентов диагностирован менингит, у остальных проявлялись неврологические симптомы (менингизм, интенсивная головная боль, рвота) на фоне лихорадки. Отмечено большое количество случаев ЭВИ, сопровождающихся присутствием в биоматериале других инфекционных агентов, что может быть связано с ослаблением иммунитета при развитии ЭВИ, чаще всего выявляли вирус герпеса 6-го типа. Нуклеотидные последовательности охарактеризованных энтеровирусов размещены в базе NCBI для возможности последующего эпидемиологического анализа циркуляции энтеровирусов на территории РФ.
Статья получена: 24.11.1998
Опубликовано online: 25.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.082
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 57
Оригинальное исследование Однонуклеотидный вариант rs293795 OGG1 как генетический фактор риска диабетической нефропатии
Е. В. Семикина, Ю. Э. Азарова, С. А. Паничев, О. И. Басарева, Н. В. Джанчатова, Е. Ю. Алферова, А. В. Полоников
Диабетическая нефропатия (ДНФ) — грозное осложнение сахарного диабета 2-го типа (СД2), приводящее к ранней инвалидности и смертности от терминальной почечной недостаточности. В экспериментальных и клинических исследованиях показана ведущая роль индуцированных окислительным стрессом повреждений макромолекул, в том числе ДНК,  в развитии и прогрессировании ДНФ на фоне гипергликемии. Воcстановление этих повреждений служит сигналом для прекращения продолжающегося окислительного стресса. Ключевым ферментом репарации ДНК является 8-оксогуанин-ДНК-гликозилаза, кодируемая геном OGG1. Целью работы было провести анализ ассоциаций пяти полиморфных вариантов rs2072668, rs1052133, rs293795, rs2304277, rs6443265 гена OGG1 с риском развития ДНФ у пациентов с СД2. В исследование включен 1461 пациент с СД2, у 577 из которых диагностирована ДНФ. Генотипирование ДНК выполнено методом полимеразно-цепной реакции в реальном времени с использованием аллель-специфичных флуоресцентно-меченых зондов. Установлены ассоциации генотипа rs293795-G/G (OR = 1,97, 95% CI = 1,23-3,16; p = 0,007) и гаплотипа rs2072668C-rs1052133C- rs293795G-rs2304277G-rs6443265C (OR = 1,30, 95% CI = 1,06-1,60; p = 0,012) гена OGG1 с предрасположенностью к ДНФ на фоне СД2. Кроме того, установлено шесть диплотипов OGG1, ассоциированных с повышенным риском ДНФ и один диплотип, ассоциированный с пониженным риском ДНФ у пациентов с СД2. Таким образом, в проведенном исследовании представлены данные об ассоциации полиморфизма гена OGG1 с ДНФ, что  создает научный потенциал для дальнейших работ по изучению вклада нарушений системы репарации окислительных повреждений ДНК в развитие микрососудистых осложнений СД2.
Статья получена: 01.12.2025
Опубликовано online: 24.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.084
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 58
Мнение Фолликулярные T-клетки периферической крови: нарастающая сложность и первоочередные вопросы
И. Л. Григорова
Фолликулярные T-хелперы (Tfh) и фолликулярные регуляторные T-клетки (Tfr) играют ключевую роль в индукции и контроле B-клеточных ответов, включая формирование высокоаффинного гуморального иммунитета, переключение классов антител и предотвращение аутореактивности. Успешный ответ Tfh ассоциирован с эффективной выработкой нейтрализующих антител после вакцинации и эффективной элиминацией различных патогенов. В то же время дизрегуляция фолликулярных T-клеток часто связана с аутоиммунными заболеваниями и аллергическими реакциями. Нарушение их нормального функционирования связано также с формированием эктопических лимфоидных структур (ЭЛС), способствует развитию некоторых сосудистых патологий и имеет прогностическое значение при ряде онкологических заболеваний. В связи с этим анализ субпопуляций фолликулярных T-клеток в периферической крови человека все чаще используют при изучении механизмов различных заболеваний. В данной статье обсуждаются современные данные о разных типах фолликулярных T-клеток, их функциях и методах анализа субпопуляций фолликулярных T-клеток, циркулирующих в крови человека. Согласно мнению автора, центральными нерешенными вопросами остаются точное фенотипическое определение циркулирующих субпопуляций Tfr-клеток, выяснение иерархии их развития от клеток-предшественников до зрелых регуляторных форм и установление их анатомических ниш дифференцировки. Накопление необходимых сведений и их преобразование в надежные сигнатуры для клеток периферической крови необходимо для развития подходов прогнозирования исхода заболевания у отдельных пациентов и разработки персонализированных терапевтических подходов.
Статья получена: 10.12.2025
Опубликовано online: 23.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.076
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 112
Метод Детекция Salmonella enterica петлевой изотермальной амплификацией ДНК с использованием флуоресцентно-меченного петлевого праймера
Д. В. Шамовская, М. А. Гордукова, М. А. Смертина, Е. В. Галеева, И. П. Оскорбин, Е. А. Храпов, У. А. Боярских, М. Л. Филипенко
Сальмонеллез остается одной из ведущих причин бактериальных кишечных инфекций человека и животных. Молекулярная диагностика радикально трансформировала диагностический ландшафт сальмонеллезной инфекции, однако остается времени- и ресурсозатратной. Изотермическая амплификация ДНК, например, LAMP, выполняемая при постоянной температуре, является основой разработки быстрых диагностических тестов, которые могут быть адаптированы к формату point-of-care (PoC) и выполнены в условиях ограниченных ресурсов и вдали от централизованных лабораторий. Целью исследования было разработать и валидировать новый метод детекции Salmonella enterica в образцах кала человека методом LAMP, в котором мониторинг результатов амплификации достигается с помощью петлевого флуоресцентно-меченного праймера, несущего также внутренний гаситель флуоресценции. Предложенный метод имеет предел обнаружения (LoD 95%) 250 копий на реакцию, чувствительность  86,84% (95% ДИ: 71,91–95,59%) и специфичность — 96,49% (95% ДИ: 87,89–99,57%) относительно qPCR, а также показал большую устойчивость к ингибиторам амплификации ДНК в образцах фекалий. Введение разных флуоресцентных меток в петлевые праймеры для FLP-LAMP с разными мишенями потенциально обеспечивает возможность мультиплексирования и одновременного выявления нескольких патогенов, что увеличивает диагностические возможности изотермальной амплификации.
Статья получена: 23.11.2025
Опубликовано online: 22.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.066
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 111
Оригинальное исследование Определение мишеней для персонализированной мультитаргетной неинвазивной стимуляции лобно-теменной сети контроля
А. Г. Пойдашева, Д. О. Синицын, И. С. Бакулин, А. Х. Забирова, Д. Ю. Лагода, Н. А. Супонева, М. А. Пирадов
Персонализация выбора мишени для рТМС — актуальная задача, решение которой может значительно увеличить эффективность метода. Один из подходов к персонализации — стимуляция ключевых хабов индивидуальных сетей покоя. Цель исследования — разработка методологии персонализации рТМС на основе выделения индивидуальных хабов фронто-париетальной контрольной сети (FPCN) с оценкой вариабельности их локализации. Для определения хабов FPCN были построены индивидуальные карты с использованием в качестве seed групповой маски сети FPCN. С помощью алгоритма прожектора с радиусом сферы 5 мм были выбраны мишени в пределах дорсолатеральной префронтальной коры (ДЛПФК) и задней теменной коры (ЗТК). Анализировали вариабельность пространственной локализации мишеней и корректность применения рутинного «правила 5 см» для локализации ДЛПФК. У 24 здоровых добровольцев (9 мужчин, средний возраст 29±7 лет) продемонстрирована высокая межиндивидуальная вариабельность мишеней. Ни в одной из областей не существует универсального положения стимулирующей катушки, позволившего бы эффективно стимулировать мишени у всех добровольцев. Пространственный разброс точек выше в ДЛПФК (объемы многогранников, содержащих множества точек равны 2095 мм3 в ДЛПФК и 739 мм3 в ЗТК). Все индивидуальные мишени в ДЛПФК лежат в пределах маски FPCN, а для ЗТК ряд мишеней находится вне этой маски. Среднее расстояние между зоной кисти первичной моторной коры (М1) и ДЛПКК составило 64±13 мм. У 75% участников это расстояние превышало 5 см, что подтверждает некорректность применения рутинного «правила 5 см» позиционирования катушки для большинства испытуемых. Разработан алгоритм выбора персонализированных мишеней для рТМС по данным фМРТ покоя в ДЛПФК и ЗТК, которые являются ключевыми хабами FPCN.
Статья получена: 14.11.2025
Опубликовано online: 20.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.081
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 185
Оригинальное исследование Оценка уровня катехоламинов и серотонина в крови при тревожно-депрессивных расстройствах
Н. В. Соловьева, Н. А. Чупрова, К. В. Кочергина, А. А. Митрофанов, С. В. Чаусова, И. В. Кичук
В психиатрической практике существует необходимость разработки простых, патогенетически обоснованных и надежных биомаркеров для прогноза аффективного статуса пациентов в текущий момент и в ближайшей перспективе. Целью работы было провести анализ ассоциации аффективного статуса пациентов с непсихотическими расстройствами с уровнями катехоламинов и серотонина в периферической крови. Для оценки аффективного статуса использовали Госпитальную шкалу тревоги и депрессии (HADS). Концентрацию катехоламинов (адреналина, норадреналина и дофамина) в плазме и серотонина в сыворотке крови оценивали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). В исследование вошли 114 человек с непсихотическими расстройствами, средний возраст составил 34,57 (SD = 10,36) лет, доля женщин — 64%. Мы не выявили достоверных прогностических эффектов уровней нейромедиаторов в периферической крови в отношении текущего аффективного статуса. Единственным маркером на уровне тенденции оказалось соотношение «серотонин / норадреналин», повышение значения которого снижает риск статуса клинической депрессии по HADS-D с учетом пола и возраста пациентов (p = 0,059). У пациентов с диагнозом рекуррентное депрессивное расстройство или депрессивный эпизод отмечено небольшое снижение уровня серотонина (p = 0,068) по сравнению с пациентами с диагнозами вне категории аффективных расстройств. В этой же группе обнаружена отрицательная корреляция между баллами по HADS-A (тревога) и уровнем норадреналина (Rs = –0,410, p < 0,05). Полученные результаты дают основания предполагать, что на расширенных клинически гомогенных выборках будет возможность подтверждения полученных предварительных результатов и получения новых данных.
Статья получена: 30.10.2025
Опубликовано online: 19.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.080
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 149