Эволюция вызываемых бактериями с множественной лекарственной устойчивостью заболеваний обусловливает потребность в новых противомикробных препаратах на основе растительного сырья. Листья карри (Murraya koenigii L. Spreng) часто используют в традиционной медицине, однако необходимо подтвердить их фармакологическое действие и эффективность экстракции. Цель исследования: провести качественное фитохимическое профилирование и физико-химическую стандартизацию порошка листьев карри с применением систем с  водой, этанолом и метанолом в качестве растворителей. МПК измеряли методом микроразведений, чтобы определить наличие антибактериальной активности в отношении панели клинически значимых патогенов. Для микробиологического анализа использовали диско-диффузионный метод. Для оценки статистических различий после однофакторного дисперсионного анализа использовали апостериорный тест Тьюки. При проведении физико-химического анализа установлены содержание золы общей 15,4% ± 0,3% (по массе) и низкое содержание влаги, составившее 4,2% ± 0,3% (по массе). Выявлены биологически активные вторичные метаболиты, в том числе танины, алкалоиды и флавоноиды, наличие которых подтверждено при проведении фитохимического скрининга. Применение спиртовых растворителей продемонстрировало большую эффективность экстракции по сравнению с водой. Этанольный экстракт показал высокую антибактериальную активность в отношении Proteus mirabilis (21,0 мм) и Staphylococcus aureus (21,0 мм) в экспериментах с применением дискодиффузионного метода, а водный экстракт продемонстрировал полное отсутствие активности (0,0; p < 0,001). У Bacillus sp. и Streptococcus mutans были самые низкие значения МПК при применении этанольного экстракта (0,156 мг/мл). Полученные результаты подтверждают возможность разработки M. koenigii как природного лекарственного средства путем определения фармакогностических маркеров качества растения и демонстрации факта, что его этанольный экстракт содержит чрезвычайно мощные антибактериальные вещества, особенно эффективные против клинических изолятов грамположительных бактерий.
ПРОСМОТРЫ 47
Патогенез дегенеративных изменений мениска важен для понимания и разработки новых методик лечения и включает в себя биохимические, структурные и микроциркуляторные изменения, затрагивающие все структуры сустава. Цель исследования — изучить влияние стандартной и фотоактивированной обогащенной тромбоцитами плазмы (PRP) in vitro на концентрацию IL6, IL17A, экспрессию COL2A1 и маркера апоптоза CD95 фиброхондроцитов мениска человека при IL1β-индуцированном воспалении. Для эксперимента отобрали хрящевую ткань мениска коленного сустава человека 12 соматически здоровых доноров от 18 до 35 лет. Клетки разделены на 4 группы: первую — интактную (контроль), вторая, третья и четвертая подвергались воздействию IL1β для индукции дегенеративных изменений, во вторую вносили 0,9% NaCl, в третью — PRP доноров, в четвертую — PRP с фотоактивацией. Показатели определяли через 48 часов. Статистические расчеты проводили в GraphPad Prism 9. Для связанных групп применяли rm-ANOVA. Данные представлены как mean ± SD, при p < 0,05. Во II группе в сравнении с I возрастали IL6 (79,6 ± 4,3 пг/мл против 28,4 ± 2,1 пг/мл), IL17A (42,8 ± 2,5 пг/мл против 14,2 ± 1,0 пг/мл), CD95 (28,5 ± 2,2% против 6,8 ± 0,7%) соответственно; снизился COL2A1 (с 1,00 ± 0,08 до 0,42 ± 0,05); в III группе по сравнению со II снижались IL6 до 55,1 ± 3,4 пг/мл, IL17A — до 29,4 ± 2,1 пг/мл, CD95 до 17,2 ± 1,5%, COL2A1 повысился до 0,71 ± 0,06; IV группе по сравнению с III снижались IL6 до 38,2 ± 2,6 пг/мл, IL17A — до 18,6 ± 1,7 пг/мл, CD95 — до 9,4 ± 0,8%; повысился COL2A1 до 0,94 ± 0,07 (p < 0,05). Стандартная PRP оказывает положительное влияние на ткани мениска in vitro через 48 ч. Эффект усиливается после воздействия красного света на PRP.
ПРОСМОТРЫ 44
Импутация генотипов позволяет значительно снизить затраты на получение полногеномных данных при сохранении информативности, однако ее точность напрямую зависит от наличия качественной фазированной референсной панели гаплотипов. Существующие панели для Macaca mulatta охватывают преимущественно индийскую линию вида и не отражают генетическую структуру лабораторных популяций смешанного происхождения. Целью ретроспективного биоинформатического исследования было создать и отвалидировать фазированную референсную панель на основе консолидации 618 общедоступных полногеномных данных M. mulatta обеих географических линий, обработанных по единому стандартизированному протоколу. Итоговая панель включает 33 457 491 SNP-маркер. Валидация на образцах индийского и китайского происхождения при сверхнизком покрытии (0,1×–0,9×) подтвердила высокую точность импутации, максимальную для доминирующей в панели индийской линии. Апробация на 10 независимых образцах при покрытии 0,6х показала высокий средний показатель достоверности импутации (INFO = 0,898). Созданный ресурс открывает возможности для экономически эффективного генотипирования больших когорт M. mulatta и служит основой для проведения полногеномных ассоциативных и популяционно-генетических исследований в отечественных и зарубежных приматологических центрах.
ПРОСМОТРЫ 132
Замершая беременность относится к числу наиболее распространенных форм ранних репродуктивных потерь и остается актуальной проблемой акушерства и гинекологии. Несмотря на достижения в области репродуктивной медицины, молекулярные механизмы, лежащие в основе прекращения развития эмбриона на ранних сроках гестации, изучены недостаточно. Целью сравнительного одноцентрового исследования было оценить уровень экспрессии генов TGF-β и MMP-9 в периферической крови женщин с физиологической и замершей беременностью и определить их потенциальную прогностическую значимость при оценке риска ранних репродуктивных потерь. В исследование были включены 40 беременных женщин: 20 пациенток с физиологически протекающей беременностью сроком 9–11 недель (контрольная группа) и 20 женщин с диагнозом замершей беременности (основная группа). Уровень экспрессии генов TGF-β и MMP-9 определяли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени после выделения тотальной РНК из периферической крови. Для статистической обработки результатов использовали критерий Манна‒Уитни и ROC-анализ. Статистически значимых различий между исследуемыми группами по уровням экспрессии генов TGF-β и MMP-9 выявлено не было. Вместе с тем ROC-анализ позволил определить пороговые значения исследуемых показателей, обладающие определенной диагностической информативностью. Для MMP-9 наиболее информативным оказалось значение Ct ≤ 29, обеспечивающее чувствительность 80% и специфичность 60%. Для TGF-β пороговое значение Ct ≤ 27,4 характеризовалось чувствительностью 75% и специфичностью 70%. Полученные результаты свидетельствуют о потенциальной прогностической значимости исследуемых генов при оценке риска замершей беременности.
ПРОСМОТРЫ 238
Применение живых аттенуированных гриппозных векторов требует баланса между снижением вирулентности и сохранением иммуногенности. Один из возможных подходов для усиления иммуногенности и защитной эффективности таких аттенуированных штаммов — встраивание в геном вируса трансгенов, способных активировать врожденный и адаптивный иммунитет. Цель экспериментального исследования — сконструировать рекомбинантные аттенуированные вирусы гриппа, способные экспрессировать IL1β человека, и провести сравнительный анализ их репликативных свойств, иммуностимулирующей активности и профиля безопасности in vivo. Рекомбинантные штаммы с различным положением трансгена получили методом обратной генетики, провели оценку их ростовых характеристик и уровня экспрессии трансгена. Активацию генов врожденного иммунитета изучали в культуре клеток А549 в ответ на заражение рекомбинантными штаммами. Аттенуированный фенотип подтверждали в модели мышей. В представленном исследовании были сконструированы и получены рекомбинантные аттенуированные вирусы гриппа, имеющие укороченный до 124 аминокислот белок NS1 и экспрессирующие IL1β человека. Подтверждена способность рекомбинантных штаммов экспрессировать функционально активный IL1β, показано усиление относительной экспрессии генов врожденного иммунитета (RIG-I, MDA5, OAS1), а также провоспалительных цитокинов (IL6 и TNFα) в ответ на инфицирование клеток рекомбинантными штаммами по сравнению с пустым вектором NS124. Так, экспрессия гена IL6 увеличивалась более чем в 10 раз (p < 0,0001), а гена TNFα — в 3–4 раза (p < 0,0001). В экспериментах in vivo был подтвержден аттенуированный фенотип полученных рекомбинантных штаммов, что свидетельствует о сохранении профиля безопасности наряду с усиленной иммуностимулирующей активностью.
ПРОСМОТРЫ 273
Актуальность исследования связана с поиском малоинвазивных молекулярных признаков состояния тканей зубодесневого комплекса у детей. Цель пилотного исследования — выявить в пилотной выборке спектральные признаки перестройки белков десневой жидкости у детей 8–14 лет при кариесе и воспалительных изменениях десны (гингивите) на основе анализа ИК-спектральной полосы Амид III. Проанализированы образцы десневой жидкости, полученные у 20 детей 8–14 лет с различным стоматологическим статусом. ИК-спектры регистрировали методом синхротронной ИК-Фурье-спектроскопии на спектрометре Bruker Vertex 80/v в диапазоне 3800–700  см–1 с акцентом на область Амид III. Вклад элементов вторичной структуры белков оценивали с помощью деконволюции спектрального профиля и методов многомерного анализа. В пилотной выборке кариес ассоциировался с направленным увеличением суммарного вклада компонент, соответствующих β-складчатым структурам. По данным суммарной оценки основных элементов вторичной структуры, вклад β-складчатых компонентов во всех четырех аналитических группах превышал 50%, вклад неупорядоченных конформаций составлял примерно 21–31%, а вклад β-поворотов и α-спиральных компонент оставался менее 10–11%. При воспалительных изменениях десны отмечена тенденция к уменьшению вклада β-поворотов и относительному увеличению неупорядоченных конформаций. Таким образом, профиль полосы Амид III может отражать интегральные физико-химические изменения белков десневой жидкости при кариесе и гингивите. Выявленные особенности следует рассматривать как кандидатные спектральные признаки, имеющие гипотезо-генерирующий характер и требующие дальнейшей клинической проверки.
ПРОСМОТРЫ 475
COVID-19 характеризуется диффузным альвеолярным повреждением легких (COVID-19-АПЛ). Особого внимания заслуживают изменения гемостаза при COVID-19, проявлениями которых выступают венозные и артериальные тромбозы. Проблема особенно актуальна у больных с сахарным диабетом. Цель наблюдательного исследования — оценить роль полиморфизмов генов ITGB3, ITGA2 и GP1BA в изменении агрегации тромбоцитов у больных с COVID-19-АПЛ в сочетании с сахарным диабетом второго типа (СД 2). В контрольную группу вошли клинически здоровые добровольцы (группа 1; n = 22). В зависимости от наличия СД 2 больные с COVID-19-АПЛ поделены на группы: группа 2 без СД 2 (n = 52) и группа 3 с СД 2 (n = 56). Агрегацию тромбоцитов оценивали на лазерном анализаторе агрегации тромбоцитов «АЛАТ-2», в качестве индукторов агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) в концентрации 2,5 мкг/мл, коллаген 2,0 мкг/мл, адреналин 5 мкг/мл и ристомицин 7,5 мг/мл. Скорость формирования агрегатов при индукции АДФ у больных с СOVID-19-АПЛ  и СД 2 выше у носителей Т/С- и С/С-вариантов по сравнению с Т/Т-вариантом на 14 и 23% по медиане (р < 0,05). Полиморфизмы определяли методом полимеразной реакции в буквальном соскобе эпителия. В группе больных СOVID-19-АПЛ без СД 2 в зависимости от полиморфизма rs1126643 гена ITGA2 при вариантах С/Т и Т/Т по сравнению с С/С ускоряется коллаген-индуцированная агрегация тромбоцитов — на 55 и 49% соответственно (р < 0,05); при СOVID-19-АПЛ с СД 2 у носителей Т/Т-варианта скорость коллаген-индуцированной агрегации выше на 30% по сравнению с носителями С/С-варианта (р < 0,05). Вывод: у больных COVID-19-АПЛ и СД 2 наличие мутантного аллеля Т полиморфизма rs1126643 гена ITGA2 и аллеля С полиморфизма rs5918 гена ITGB3 увеличивает скорость коллаген- и АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов.
ПРОСМОТРЫ 470
Психологические последствия лечения онкологического заболевания ребенка затрагивают всех членов семьи, в частности здоровых братьев и сестер (сиблингов). Известно о снижении качества их жизни, самооценки, страхе смерти и одиночества. Цель исследования — сравнить уровень хронического утомления у сиблингов детей с онкологическими заболеваниями и у детей из семей без тяжелобольных близких в зависимости от информанта: по данным самооценки ребенка и наблюдения родителя. В поперечном контролируемом исследовании заполняли опросник «Степень хронического утомления» 113 диад «родитель–ребенок»: 65 пар, где есть второй больной ребенок (группа сиблингов), и 48 контрольных пар. Группы были сопоставимы по полу и возрасту детей (7–11 лет). Линейными смешанными моделями выявлено значимое взаимодействие «группа × информант» (p < 0,001). В контроле родители занижали уровень утомления в сравнении с самооценкой детей (−10 баллов), а у сиблингов родительские оценки были сопоставимы с детскими или превышали их по большинству шкал, кроме социальной сферы (Δ = 2 балла, p < 0,001). Внутренняя корреляция в группе сиблингов оказалась сильнее (r = 0,73, p < 0,001), чем в контрольной (r = 0,34, p = 0,019). Межгрупповые самооценки детей по общему баллу не различались, но у сиблингов выраженность физиологического дискомфорта была выше (p = 0,037), а снижение общего самочувствия, когнитивного дискомфорта и нарушения в социальной сфере ― ниже (p < 0,001). Вывод: в семьях с тяжелобольным ребенком родители систематически завышают уровень утомления здорового ребенка, а сами дети оценивают свое состояние иначе. Это расхождение необходимо учитывать при медико-психологическом сопровождении семей.
ПРОСМОТРЫ 561