
Статья размещена в открытом доступе и распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution (CC BY).
ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Интраназальное введение липополисахарида крысам Sprague-Dawley как биомодель острого респираторного дистресс-синдрома
1 Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы, Москва, Россия
2 Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени В. И. Кулакова, Москва, Россия
3 Российский научный центр хирургии имени Б. В. Петровского, Москва, Россия
Для корреспонденции: Виктория Викторовна Киселева
ул. Опарина, д. 4, г. Москва, 117997, Россия; moc.liamg@1991.avosonruk.airotciv
Финансирование: работа поддержана Российским научным фондом (номер гранта 24-25-00203).
Благодарности: авторы благодарят руководителя лаборатории патологии клетки НИИ морфологии человека имени А. П. Авцына к. б. н. Д. А. Арешидзе за измерение показателей общей формулы крови животных.
Вклад авторов: В. В. Киселева — дизайн и проведение эксперимента, анализ полученных результатов, написание статьи; П. А. Вишнякова — консультирование по вопросам проведения эксперимента, материальная база, редактирование; А. М. Косырева — консультирование по вопросам проведения эксперимента, редактирование; Е. Ю. Кананыхина, И. И. Емельянов — работа с животными; А. В. Ельчанинов — консультирование по вопросам проведения эксперимента, материальная база, редактирование; Т. Х. Фатхудинов — материальная база исследования.
Соблюдение этических стандартов: исследование одобрено этическим комитетом НИИ морфологии человека имени А. П. Авцына (протокол № 21 от 29 марта 2019 г.). Все манипуляции с животными проводили в соответствии с рекомендациями ARRIVE и Директивой ЕС 2010/63/EU о защите животных, используемых в научных целях.
Для острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС) характерны высокая частота летальных исходов и отсутствие патофизиологической терапии. Для воспроизведения у животных ОРДС используют интратрахеальное введение липополисахарида (ЛПС). Ограничением метода является необходимость использования оборудования для выполнения интубации и контроля за состоянием животного. Целью исследования было оценить возможность использования интраназального введения ЛПС вместо интратрахеального и определить его оптимальную дозу. ЛПС E. coli O111:B4 7,5 мг/кг или 15 мг/кг или NaCl 0,9% в объеме 150 мкл вводили 21 крысе Sprague-Dawley. Через 48 ч кровь из хвостовой вены отбирали для определения лейкоцитарной формулы и концентрации TNFa. Легкие извлекали для оценки сухого остатка (Wet/dry ratio), определения уровней экспрессии генов про- и противовоспалительных цитокинов методом ПЦР-РВ, определения относительного количества CD68, CD86 и MHC II положительных клеток в ткани легкого методом проточной цитометрии. W/d ratio было выше при дозе 15 мг/кг массы тела (p = 0,0228, Ordinary one-way Anova). В крови содержание лимфоцитов было снижено (p = 0,0019, Ordinary one-way Anova), а нейтрофилов повышено (p = 0,0021, Ordinary one-way Anova) при обеих дозах введения. Количество CD86 (p = 0,0014, Ordinary one-way Anova) и MHC II положительных клеток (p = 0,0050, Ordinary one — way Anova) повышалось после введения ЛПС. Уровень экспрессии гена IL10 был значимо повышен при дозе 15 мг/кг (p = 0,0024, Ordinary one-way Anova), а IL4 (p = 0,0194, Ordinary one-way Anova) снижен при дозе 7,5 мг/кг. Таким образом, интраназальное введение ЛПС может быть использовано для воспроизведения ОРДС у крыс Sprague-Dawley. Высокая доза введения приводит к быстрому развитию воспалительных процессов в легких.
Ключевые слова: ЛПС, ОРДС, липополисахарид, крысы Sprague-Dawley, цитокин, модель на животных, уровень экспрессии