ОБЗОР
Применение дуплекс-специфичной нуклеазы из камчатского краба в методах молекулярной биологии
1 Центр высокоточного редактирования и генетических технологий для биомедицины, Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова, Москва, Россия
2 Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени В. И. Кулакова, Москва, Россия
Для корреспонденции: Денис Владимирович Ребриков
ул. Академика Опарина, д. 4, г. Москва, 117997, Россия; moc.liamg@4pigacn
Финансирование: работа выполнена при финансовой поддержке грантом № 075-15-2019-1789, Центр высокоточного редактирования и генетических технологий для биомедицины.
Вклад авторов: Д. А. Шагин — подготовка рукописи; Д. В. Ребриков — редактирование рукописи.
Дуплекс-специфичная нуклеаза (ДСН) из гепатопанкреаса крабоида Paralithodes camtschaticus (камчатский краб) обладает уникальным сочетанием свойств. Наряду с термостабильностью и высокой оптимальной температурой катализа, фермент проявляет высокую субстратную избирательность, расщепляя исключительно ДНК в составе дуплексов (ДНК-ДНК или ДНК-РНК). Соответственно, ни одиночные цепи ДНК, ни одноцепочечные участки ДНК, ни цепи РНК с любой вторичной структурой субстратами ДСН не являются. Такие свойства позволяют создавать уникальные молекулярнобиологические протоколы на основе ДСН, которая также представляет собой важный объект фундаментальных исследований в области эволюции нуклеаз. В обзоре рассматриваются различные применения ДСН из камчатского краба в современных методах молекулярной биологии.
Ключевые слова: дуплекс-специфичная нуклеаза, ДСН, гепатопанкреас краба, Paralithodes camtschaticus, камчатский краб