ISSN Print 2070–7320
ISSN Online 2070–7339
НАУЧНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ РНИМУ ИМЕНИ Н. И. ПИРОГОВА
Авторские права: © 2024 принадлежат авторам. Лицензиат: РНИМУ им. Н.И. Пирогова.
Статья размещена в открытом доступе и распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution (CC BY).
Статья размещена в открытом доступе и распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution (CC BY).
ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Комплексное антибактериальное действие ферментов на биопленки Staphylococcus aureus
Информация об авторах
1 Научно-технологический университет «Сириус», Сочи, Россия
2 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов Российской академии наук, Пущино, Россия
Для корреспонденции: Максим Олегович Нагорных
Проспект Науки, д. 5, г. Пущино, 142290, Россия; moc.liamg@rennabred
Информация о статье
Финансирование: работа выполнена при поддержке программы Министерства высшего образования и науки РФ (соглашение №. 075-10-2021-113, уникальный номер проекта RF----193021X0001).
Вклад авторов: А. А. Загоскин, Р. А. Мирзоян — создание генетических конструкций, хроматографическая очистка рекомбинантных белков; Л. Ф. Резвых — создание генетических конструкций; М. В. Захарова, Э. К. Мубаракшина — подбор условий наработки рекомбинантых белков, эксперименты по наработке в разных штаммах E. coli; М. О. Нагорных — концепция работы, дизайн генетических конструкций, написание статьи; Р. А. Иванов — общее руководство.
Статья получена: 25.11.2024
Статья принята к печати: 15.12.2024
Опубликовано online: 23.12.2024
|
Рис. 1. Схема экспериментальной работы по получению препаратов энзибиотиков и проверке их антибактериальной активности
Рис. 2. Стратегия получения рекомбинантных белков, склонных к агрегации при помощи наработки в виде химерной молекулы, на N-конце которой находится вспомогательный полипептид, повышающий растворимость целевого белка. В частности, электрофореграмма в ПААГ демонстрирует примеры влияния вспомогательного полипептида TIG на растворимость ДНКазы I (А) и вспомогательного полипептида MBP на растворимость эндолизина PM9 (Б)
Рис. 3. Каталитическая активность двух эндолизинов против клеточной стенки бактерий Staphylococcus aureus. Оба рекомбинантных фермента обладают антибактериальной активностью, разрушая клеточную стенку. Эндолизин LysK, имеющий полноразмерный каталитический домен, обладает существенно большей антибактериальной активностью в отношении грамположительного патогена Staphylococcus aureus, по сравнению с эндолизином PM9, имеющим усеченный каталитический домен
Рис. 4. Разрушение бактериальных биопленок Staphylococcus aureus препаратами рекомбинантных нуклеаз, а также комбинированными препаратами, совмещающими разные каталитические активности (эндолизин + нуклеаза). Неспецифические нуклеазы обладают большей активностью в отношении разрушения бактериальных биопленок по сравнению с ДНКазой I. Комбинации ферментов с разной специфичностью в одном препарате усиливают антибактериальное действие
Таблица 1. Оценка наработок рекомбинантных эндолизинов и нуклеаз в штаммах E. coli
Примечание: Р — растворимый, Н — нерастворимый, «+» — степень наработки растворимого белка.
Таблица 2. Оценка наработок рекомбинантных эндолизинов и нуклеаз в штаммах E. coli
Примечание: Р — растворимый, Н — нерастворимый, «+» — степень наработки растворимого белка.
