Оригинальное исследование Роль окислительного стресса в патогенезе остеодеструктивного синдрома у больных с хроническим лимфолейкозом
М. В. Осиков, Е. А. Коробкин
У пациентов с хроническим лимфоцитарным лейкозом (ХЛЛ) несколько чаще наблюдаются снижение минеральной плотности кости (МПК), остеопения и остеопороз. Риск остеопоротических переломов при ХЛЛ выше, чем у здоровых лиц того же возраста. Механизм снижения МПК при ХЛЛ может быть связан со снижением антиоксидантной защиты и окислительным стрессом (ОС). Целью работы было исследовать взаимосвязь между показателями окислительного стресса, антиоксидантной защиты и показателями остеопении у пациентов с ХЛЛ. Обследовали мужчин в возрасте 50–70 лет. Группу 1 составили 14 здоровых мужчин, группу 2 — 54 пациента с ХЛЛ без изменений МПК, группу 3 — 22 пациента с ХЛЛ с признаками остеопении. На денситометре оценивали МПК, Т- и Z-критерии в поясничных позвонках, шейке бедренной кости (ШПОБК), проксимальном отделе бедренной кости во всех группах. На старте исследования в сыворотке во всех группах и в гомогенате костной ткани в группах 2 и 3 определяли содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ); общий антиоксидантный статус (ОАС). Показатели остеоденситометрии, ПОЛ и ОАС в сыворотке крови во всех группах оценивали через 6 месяцев наблюдения. На старте исследования по данным остеоденситометрии у 29% больных с ХЛЛ выявлена остеопения в ШПОБК, а через 6 месяцев остеопению наблюдали во всех локализациях у 55% больных. На старте исследования у пациентов с ХЛЛ и остеопенией в сыворотке и костной ткани зафиксированы ОС и сниженный ОАС. Через 6 месяцев у пациентов с ХЛЛ и остеопенией выявлены признаки прогрессии ОС и снижения ОАС. У пациентов с ХЛЛ показатели ОС в сыворотке и костной ткани сопоставимы и могут быть использованы для прогноза возникновения остеопении через 6 месяцев.
Статья получена: 11.10.2024
Опубликовано online: 30.11.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.053
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1956
Оригинальное исследование Цепецентричность Т-клеточных рецепторов у первично активированных эффекторов и рестимулированных клеток памяти
А. А. Калинина, М. В. Кубекина, Н. А. Персиянцева, А. В. Брутер, Л. М. Хромых, Д. Б. Казанский
Т-клетки, эффекторы адаптивного иммунитета, оснащены антигенраспознающим Т-клеточным рецептором (ТКР), который представляет собой αβ-гетеродимер. Для ряда ТКР было показано функциональное доминирование одной цепи, и эта особенность рецептора получила название цепецентричности. В настоящее время неизвестно, является ли цепецентричность врожденным свойством некоторых ТКР и каков механизм ее формирования. Целью работы было установить частоту встречаемости подобных рецепторов в репертуаре эффекторов и рестимулированных клеток памяти мыши, специфичных к антигенам аллогенной опухоли. Сформированные в ходе первичного иммунного ответа in vivo долгоживущие клетки памяти рестимулировали клетками иммунизирующей опухоли in vitro. Первичные эффекторы получали в культуре in vitro путем стимуляции Т-клеток неиммунизированных мышей клетками этой же аллогенной опухоли. Методом NGS-секвенирования были созданы библиотеки ТКР эффекторов, вовлеченных в первичный и вторичный иммунный ответ. Для идентификации цепецентрических рецепторов были отобраны по 10 вариантов ТКРα из каждого репертуара. Путем трансдукции Т-клетки интактных мышей модифицировали индивидуальными вариантами α-цепей ТКР с последующей оценкой уровня их пролиферации в присутствии специфических аллогенных стимуляторов. В ходе скрининга in vitro выявлено 10% цепецентрических рецепторов в пуле первичных эффекторов, при этом доля таких ТКР в репертуаре реактивированных клеток памяти составила 30%. Таким образом, цепецентричность является исходно присущим свойством некоторых ТКР, но вторичная антигенная стимуляция может быть фактором селекции клонотипов с такими рецепторами.
Статья получена: 09.10.2024
Опубликовано online: 30.11.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.052
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1926
Оригинальное исследование Анализ возможностей метода оценки кривой «поток–объем» по изменению ее формы при обструкции бронхов
Е. М. Десяцкова, В. В. Греченко, В. В. Соболева
При обструкции бронхов кривая «поток–объем» имеет характерную вогнутую форму, однако данному признаку не уделяют должного внимания. Анализ скоростных показателей функции внешнего дыхания (ФВД), таких как пиковая объемная скорость выдоха (ПОС) и максимальные объемные скорости выдоха (МОС), позволит расширить диагностические возможности спирометрии. Цель работы — провести сравнительный анализ диагностической эффективности методов оценки кривой «поток–объем» по изменению ее формы на фоне обструктивных нарушений. Оценено 540 проб ФВД пациентов (234 мужчины 57 [36; 67] лет и 306 женщин 59 [44; 69] лет), для каждого определено процентное отношение площадей под фактической кривой и кривой предполагаемой нормы, рассчитан угол, образованный кривой, определено процентное отношение фактических МОС с предположительно нормальными, рассчитаны отрезные точки с целью разграничения обструктивных нарушений и нормы. Сформировано заключение о наличии или отсутствии у пациента обструкции бронхов. Результаты сравнивали с заключениями, полученными с помощью системы Knudson, с расчетом операционных характеристик теста относительно стандарта. Показано, что методы оценки угла β и общей вогнутости кривой обладают высокими значениями чувствительности (87,8% и 95,6% соответственно), а оценка площади под кривой «поток–объем» (AEX-FV) обладает высоким значением специфичности (88,6%). Таким образом, продемонстрирована достаточная диагностическая эффективность методов оценки кривой по изменению ее формы. Однако использование этих методов в отрыве от принятых систем расчета должных не видится целесообразным. Логичным представляется совместное использование системы расчета должных и одного из методов оценки кривой по форме.
Статья получена: 08.10.2024
Опубликовано online: 27.11.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.051
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2735
Оригинальное исследование Взаимосвязь между бактериями-эпибионтами Nanosynbacter lyticus и воспалительными заболеваниями пародонта
Л. В. Побожьева, Г. А. Скворцов-Игралов, Ю. А. Бочарова, И. С. Копецкий, И. В. Чеботарь
Патогенез воспалительных заболеваний пародонта детерминируется микроорганизмами полости рта. Кроме хорошо изученных пародонтопатогенов, при гингивите и пародонтите обнаруживаются микробные агенты с недоказанным клиническим значением, к числу которых принадлежат бактерииэпибионты. Целью работы было определить взаимосвязь между присутствием эпибионта Nanosynbacter lyticus и воспалительными заболеваниями пародонта. У 47 участников исследования (среди них 31 женщина и 16 мужчин) в возрасте 18–45 лет с помощью ПЦР определяли наличие консервативных последовательностей ДНК, специфичных для родов Nanosynbacter, Schaalia, а также домена Bacteria. Результаты выражали в виде индексов, определяющих количественные соотношения между N. lyticus и Schaalia spp. (индекс NS), а также между N. lyticus и представителями домена Bacteria (индекс NB). У значительной доли (11/27, 40,7%) пациентов без пародонтита Schaalia spp. не были обнаружены. Все пациенты со средней и тяжелой степенью пародонтита, а также 75% пациентов с легкой степенью пародонтита были носителями Schaalia spp. Для всех Schaaliaпозитивных образцов от пациентов с пародонтитом индекс NS был более высоким (р < 0,05), чем у Schaalia-позитивных образцов без пародонтита: медианы показателя NS составляли соответственно Ме = 0,89 (0,79; 0,93) и Ме = 0,63 (0,00; 0,73). Индекс NB у пациентов, страдающих хроническим генерализованным пародонтитом (Ме = 0,83 (0,79; 0,85)), был достоверно выше (р < 0,05), чем у пациентов без пародонтита, Ме = 0,67 (0,00; 0,81).
Статья получена: 07.10.2024
Опубликовано online: 22.11.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.050
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1963
Оригинальное исследование Влияние эндовитреальной иллюминации на оксидативные процессы в крови кроликов
Р. Р. Ямгутдинов, Т. Р. Мухамадеев, Р. Р. Ахмадеев, К. С. Мочалов
Актуальной проблемой офтальмологии является исследование механизмов фотоповреждений сетчатки, происходящих во время витреоретинальных вмешательств. Цель исследования — оценить влияние эндоиллюминации различной интенсивности и продолжительности на изменение оксидативных процессов в крови кроликов. Эксперимент проводили на 16 кроликах, сетчатку которых подвергали воздействию эндоиллюминации разной продолжительности (30 и 60 мин) и интенсивности (8 и 16 кд/м2). Образцы крови из ушной вены кролика забирали до и после светового воздействия. Для оценки оксидативных процессов измеряли биохемилюминесценцию в цельной крови и сыворотке крови. Данные анализировали с использованием U-теста Манна–Уитни, а результаты считали достоверными при p ≤ 0,05. При 30-минутной световой экспозиции в цельной крови было зафиксировано статистически значимое увеличение биохемилюминесценции: в 1,5 раза при интенсивности 8 кд/м2 и в 2,5 раза при интенсивности 16 кд/м2 по сравнению с контрольными показателями (p < 0,05), что отражает усиление генерации активных форм кислорода клетками крови. В сыворотке, напротив, выявлено достоверное снижение уровней биохемилюминесценции: в 1,2 раза при интенсивности 8 кд/м2 и в 2 раза при интенсивности 16 кд/м2 относительно контроля (p < 0,05), что, очевидно, может свидетельствовать о компенсаторном увеличении антиокислительной активности в ответ на гиперактивацию свободнорадикальных процессов. При 60-минутной экспозиции изменения биохемилюминесценции имели более выраженный характер: усиление в цельной крови в 3 и 7 раз, и снижение в сыворотке крови в 2 и 3 раза соответственно. Таким образом, при интенсивном  световом воздействии отмечено изменение оксидативных процессов, определяемое временем и длительностью воздействия.
Статья получена: 30.09.2024
Опубликовано online: 15.11.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.049
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1697
Мнение Дисбиоз кишечника и колоректальный рак: от гипотез онкогенеза к неинвазивной диагностике
Е. В. Глазунова, А. С. Курносов, О. А. Злобовская
Колоректальный рак (КРР) — одно из самых распространенных злокачественных новообразований, занимающее лидирующие позиции по смертности от рака. Основная проблема КРР — диагностика заболевания на поздних стадиях (около 50% случаев выявляют на III и IV стадиях), что приводит к высокой летальности. Одним из ключевых факторов риска КРР являются дисбиотические нарушения кишечной микробиоты. С целью объяснить взаимосвязь дисбиоза и канцерогенеза были сформулированы три гипотезы возникновения КРР: «Alpha-bug», «Keystone pathogen hypothesis» и «DriverPassenger». Модель «Driver-Passenger» наиболее перспективна и разделяет бактерии на «драйверы» рака, запускающие воспаление и повреждение клеток, и «бактерии-пассажиры», моделирующие микроокружение опухоли, усиливающие ее рост и усугубляющие дисбиоз. Драйверы и пассажиры могут выступать маркерами различных стадий онкогенеза. Колоноскопия поверхности прямой и ободочной кишки — наиболее эффективный метод для обнаружения КРР, в том числе на ранних стадиях заболевания. Однако повсеместное применение данной процедуры ограничивается связанным с ней дискомфортом для пациентов и риском возможных последствий. Неинвазивное исследование микробиоты на основе модели «Driver-Passenger» может стать безопасной и доступной альтернативой инвазивной диагностике в ходе профилактического скрининга, позволяя повысить выживаемость за счет вовлечения большего числа пациентов.
Статья получена: 15.10.2024
Опубликовано online: 31.10.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.046
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2340
Оригинальное исследование Получение и оценка биологической активности экзогенной мРНК, кодирующей белок MxA человека
М. А. Плотникова, Д. Е. Бобков, С. А. Клотченко
Индуцируемый интерферонами типа I и типа III человеческий белок MxA является важным медиатором врожденного иммунитета и проявляет антивирусную активность в отношении широкого спектра РНК- и ДНК-содержащих вирусов. По последним данным, сверхэкспрессия белка MxA повышает чувствительность к проводимой химиотерапии и является одним из факторов благоприятного прогноза для пациентов с раком молочной железы. Экзогенная мРНК, способная к внутриклеточной продукции белка MxA, не только обладает потенциалом для лечения респираторных вирусных инфекций, но и может стать важным инструментом для фундаментальных исследований. Целью работы было сконструировать и получить методом in vitro транскрипции (IVT) экзогенную мРНК, кодирующую функциональный цитоплазматический белок MxA человека; изучить ее трансляционные свойства; оценить и выявить закономерности в экспрессии некоторых генов системы интерферонов в ответ на введение этой экзогенной мРНК в клетки. В результате работы были успешно сконструированы и получены методом IVT экзогенные мРНК (в количествах до 200 мкг), способные к эффективной трансляции (до 20 нг/мл белка со 100 нг мРНК в лунке 96-луночного планшета) в эукариотических клеточных системах; подтверждено диффузное внутриклеточное распределение белка MxA в клетках MDCK; выявлены достоверные изменения экспрессии интерферон-стимулируемых генов, таких как OAS1, PKR (EIF2AK2), MDA5, RIG-I. Наши дальнейшие исследования будут посвящены оценке терапевтического потенциала разработанных экзогенных мРНК в отношении вирусов гриппа А и В, респираторно-синцитиального вируса и коронавируса SARS-CoV-2.
Статья получена: 30.09.2024
Опубликовано online: 30.10.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.048
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2593
Мнение Выбор метода количественной оценки микробиоты кишечника: сравнительный анализ 16S NGS и ПЦР-РВ
О. А. Злобовская, А. С. Курносов, А. Ф. Шептулина, Е. В. Глазунова
В последнее время наблюдается значительная коммерциализация услуг по количественной оценке микробиоты кишечника с целью диагностики дисбиоза — нарушения микробного баланса. В условиях растущего интереса к персонализированным подходам в медицине и профилактической терапии диагностика дисбиоза приобретает все большее значение. Результаты подобного скрининга используют для рекомендаций по корректировке питания, изменению образа жизни или, при необходимости, назначения медикаментозного лечения. Для подобной оценки необходим надежный и точный метод оценки микробиоты, поскольку от качества полученных данных зависит корректность последующих рекомендаций и терапевтических вмешательств. В статье рассмотрены основные аспекты двух подходов, применяемых для количественной оценки микробиоты, — высокопроизводительного секвенирования гена 16S рРНК (16S NGS) и ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ), а также представлены их сильные, на наш взгляд, и слабые стороны.
Статья получена: 15.10.2024
Опубликовано online: 30.10.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.047
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 3165