Оригинальное исследование Изменения митохондриального и лизосомного компартментов в условиях химиоиндуцированной сенесцентности
Р. О. Шаталова, Д. В. Шевырев
Старение связано с накоплением сенесцентных клеток, для которых характерно изменение функций, укорочение теломер, остановка клеточного цикла, устойчивость к апоптозу и метаболические нарушения. В последние годы широко изучают различные аспекты сенесцентности не только в контексте старения, но и в отношении терапии опухолей, так как сенесцентность в различных клетках опухоли может по-разному влиять на ход патологического процесса. Целью исследования было провести сравнительный анализ распространенных химиотерапевтических препаратов в контексте индукции сенесцентности и влияния на митохондриальный и лизосомный компартменты фибробластов, выделенных из кожи мышей линии C57BL/6. Сенесцентность клеток оценивали с помощью хромогенного и флуоресцентного методов определения активности фермента β-Gal. Окрашивание митохондрий проводили с использованием потенциалзависимого красителя MitoTracker® Orange, лизосомы окрашивали с помощью LysoTracker® Red. Для анализа использовали проточный цитометр BD LSRFortessa. В результате было выявлено значительное снижение митохондриального потенциала и усиление интенсивности флуоресценции лизосом в клетках с химиоиндуцированной сенесцентностью. Использование разработанного нами интегрального индекса индукции сенесцентности позволило установить, что влияние доксорубицина с точки зрения индукции сенесцентности и влияния на митохондриальный и лизосомный компартменты выражено сильнее, чем у цисплатина, блеомицина и этопозида.
Статья получена: 06.09.2025
Опубликовано online: 19.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.045
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 465
Оригинальное исследование Особенности транскриптомного профиля FAP+-клеток в опухолях молочной железы различных молекулярно-биологических подтипов
А. Ю. Калинчук, И. А. Пацкан, М. М. Штадельман, Е. С. Григорьева, Л. А. Таширева
Понимание подтип-специфичной вариабельности функциональных программ FAP+ опухоль-ассоциированных фибробластов (ОАФ) является фундаментальным для разработки эффективных терапевтических стратегий, нацеленных на стромальные мишени. Целью работы было идентифицировать подтип-специфичные сигнальные пути, маркеры и молекулярные особенности FAP+ ОАФ. Исследовали образцы тканей, полученные от 15 пациенток с раком молочной железы (РМЖ). С помощью пространственного транскриптомного анализа продемонстрировано, что FAP+ ОАФ при люминальном РМЖ проявляют фенотип, характеризующийся организацией внеклеточного матрикса (GO:0030198, FDR q-value = 0,0307) и экспрессией генов, ассоциированных с метастазированием (COL10A1, MMP13, CXCL14, TSPAN8). В отличие от этого, FAP+ ОАФ при тройном негативном раке демонстрируют выраженный иммуномодуляторный фенотип со сверхэкспрессией генов иммуносупрессии (CD36, PLA2G2A, CHI3L1) и обогащением сигнальных путей иммунного ответа (иммунный ответ (GO:0006955, FDR q-value = 7,85e-17), ответ на воспаление (GO:0006954, FDR q-value = 2,79e-11), регуляция продукции цитокинов (GO:0001817, FDR q-value = 3,39e-10)). Идентифицированы также подтипспецифичные сигнатуры генов радиорезистентности: люминальные А- и Б-подтипы, показана активация путей репарации ДНК (IGF1R, ERBB3, CRIP1), в то время как тройные негативные опухоли демонстрируют обогащение маркеров эпителиально-мезенхимального перехода и стволовости (ZEB2, NOTCH4, FOXM1). Эти данные подчеркивают, что FAP+-фибробласты не являются однородной популяцией, а функционально специализируются в зависимости от подтипа опухоли, выступая в качестве архитекторов стромы при люминальном раке и регуляторов иммунного ответа при тройном негативном РМЖ.
Статья получена: 10.09.2025
Опубликовано online: 16.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.046
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 413
Оригинальное исследование Цитосовместимость свободноспеченной пористой B4C-керамики при исследовании in vitro
Е. В. Чепелева, К. В. Козырь, А. А. Вавер, В. В. Хахалкин
Материалы, применяемые при восстановлении костных дефектов, имеют ряд системных ограничений. Металлические импланты, демонстрируя высокую механическую прочность, обладают недостаточной остеоинтеграционной способностью, в то время как керамические и полимерные материалы имеют лучшую биосовместимость, но не удовлетворяют требованиям по механической надежности в зонах значительной нагрузки. В этой связи перспективным направлением представляется исследование новых классов материалов, сочетающих прочностные характеристики с остеогенным потенциалом. Цель исследования — оценить цитосовместимость пористого керамического материала на основе карбида бора (B4C) для подтверждения возможности его использования при замещении костных дефектов. Заготовки B4C изготавливали методом свободного спекания при 1900–2100 °C, исследование ультраструктуры поверхности полученных образцов проводили методами атомно-силовой и сканирующей электронной микроскопии. Цитотоксичность образцов B4C оценивали непрямым методом по отношению к мезенхимальным стволовым клеткам человека. Получены следующие показатели выживаемости клеток: для образцов после автоклавирования — 102,1% (24 ч) и 99,1% (72 ч); после обработки этиленоксидом — 110,0% (24 ч) и 94,4% (72 ч). Статистически значимых различий между группами не выявлено (U-критерий Манна–Уитни). Полученные результаты позволяют рассматривать B4C-керамику как перспективное решение для костной пластики, однако для оценки ее клинического потенциала требуются дальнейшие исследования, включая разработку протоколов стерилизации для образцов большего размера и сложной формы.
Статья получена: 10.09.2025
Опубликовано online: 12.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.044
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 426
Оригинальное исследование Возрастные изменения в иммунной системе стареющих мышей
К. С. Матвеева, Д. В. Шевырев
Накопление сенесцентных клеток в тканях связано с функциональным ухудшением и развитием возраст-ассоциированных патологий. Ключевую роль в этом процессе играет сенесцент-ассоциированный секреторный фенотип (SASP), способствующий хроническому вялотекущему системному воспалению, которое ассоциировано с повышенным риском аутоиммунных и онкологических заболеваний, а также снижением устойчивости к инфекциям. В норме иммунная система удаляет сенесцентные клетки, однако с возрастом эффективность этого процесса падает, в том числе по причине старения иммунной системы. Целью исследования было изучить возрастные изменения в основных популяциях лимфоцитов и миелоцитов в образцах селезенки и костного мозга мышей преклонного возраста. Исследование проводили на группах молодых (n = 8) и пожилых (n = 4) мышей линии С57BL/6. Анализ популяций проводили с использованием флуоресцентно-меченых антител методом проточной цитометрии. Фенотип старения оценивали по активности фермента β-Gal с предварительной обработкой бафиломицином А1, который обеспечивает защелачивание лизосом и позволяет выявить повышенную активность фермента, типичную для стареющих клеток (SA-β-Gal). В результате у пожилых мышей было выявлено значимое повышение содержания миелоидных популяций, CD11c+В-клеток, дважды негативных T-лимфоцитов, а также снижение CD8α+ дендритных клеток. Кроме того, при старении значимо возрастало содержание клеток позитивных по SA-β-Gal, особенно в популяциях миелоидных клеток. Полученные данные указывают, что возрастные изменения носят системный характер и отражают так называемый миелоидный сдвиг, а также накопление провоспалительных популяций в миелоидном и лимфоидном компартментах.
Статья получена: 27.08.2025
Опубликовано online: 30.09.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.043
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 439
Клинический случай Морфологический, иммуногистохимический и молекулярный анализ дифференцированной высокозлокачественной карциномы
Д. Р. Махачев, Д. В. Буланов, М. М. Шовхалов, Б. З. Бекмурзиев, И. А. Героев, А. М. Нецветова, А. Р. Жусупова, Д. С. Губич, А. М. Мановски
Высокозлокачественные неанапластические опухоли щитовидной железы (HGFC-NA) относятся к редкой и агрессивной категории новообразований, занимающих промежуточное положение между дифференцированными и анапластическими карциномами. Имеют место высокая смертность и ограниченные возможности стандартного лечения, которое обычно включает хирургическое удаление опухоли с последующей радиойодтерапией и супрессивной терапией левотироксином. При радиойодрезистентных формах дополнительно рассматривают таргетные тирозинкиназные ингибиторы, однако их эффективность ограничена. Представлен клинический случай дифференцированной высокозлокачественной карциномы (DHGTC) у пациентки 62 лет, перенесшей гемитиреоидэктомию. Использованы методы гистологического анализа, иммуногистохимии (TTF-1, PAX8, CK19, p53, Ki-67) и молекулярного тестирования ключевых маркеров (TERT, TP53, BRAF). Опухоль имела размеры 3,4 × 2,8 × 2,5 см, демонстрировала выраженную архитектоническую гетерогенность, очаговый некроз, высокую митотическую активность — 8–10 митозов на 10 полей зрения при ×400 (что соответствует ≥ 5 на 2 мм2), а индекс пролиферации Ki-67 достигал 35%. С помощью ИГХ выявлена экспрессия TTF-1 и PAX8, p53 с мутационным типом экспрессии, что указывает на мутацию TP53. Молекулярное исследование не показало изменения в генах TERT и BRAF. Эти признаки позволили верифицировать диагноз DHGTC. Сделан вывод о необходимости комплексной морфо-молекулярной диагностики HGFC-NA, поскольку количественные параметры митотической активности, Ki-67 и статус TERT/TP53 определяют прогноз и выбор персонализированной терапии.
Статья получена: 02.09.2025
Опубликовано online: 24.09.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.042
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 563
Оригинальное исследование Определение фенотипа старения по изменению спонтанной и индуцированной продукции интерлейкина-6 и интерлейкина-10 in vitro
В. В. Греченко, Т. В. Громова, А. Д. Огурцова, Т. Г. Мурадян, Э. Р. Журавлева, Л. В. Ганковская
В процессе старения изменения в иммунной системе сопровождаются развитием системного стерильного воспаления «inflammaging». Выделяют успешный и патологический фенотипы старения. Степень развития «inflammaging» во многом зависит от соотношения про- и противовоспалительных медиаторов, особенно ИЛ-6 и ИЛ-10. Целью исследования было провести анализ продукции ИЛ-6 и ИЛ-10 в культурах мононуклеарных клеток (МНК) периферической крови пациентов как возможного подхода определения фенотипа старения. В работу включены данные пациентов пожилого возраста (n = 80), старческого возраста (n = 100) и долгожителей (n = 30), среди которых выделены подгруппы с успешным и патологическим фенотипом, а также группы сравнения (молодых лиц). Проводили оценку коэффициента стимуляции (КС) по соотношению уровней стимулированной и спонтанной выработки цитокинов. Для успешного фенотипа в пожилом, старческом возрасте и у долгожителей выявлено снижение КС ИЛ-6 до 5,3 [2,2–14,3] (p < 0,01), 5,3 [3,01–7,8] (p < 0,01), 6,5 [5,2–14,1] соответственно, по отношению к группе сравнения, где показатель составил 17,6 [13,7–31,1] (p < 0,05). При патологическом фенотипе показатели КС ИЛ-6 исследуемых возрастных групп достоверно не отличались от группы сравнения. Для успешного фенотипа в старческом возрасте выявлено повышение КС ИЛ-10 до 6,9 [3,8–13,8] по отношению к уровню группы патологического фенотипа — 3,3 [2,0–5,9] (p < 0,01) и группы сравнения — 2,0 [1,9–2,2] (p < 0,001). В группе долгожителей при патологическом фенотипе значительно повышался КС ИЛ-10 (11,2 [5,4–18,1] против 2,7 [2,3–6,5] p < 0,001) в группе успешного старения, что может свидетельствовать о выраженном компенсаторном противовоспалительном резерве, являющемся фактором выживания и долголетия при наличии большого количества возраст-ассоциированных заболеваний в данной группе.
Статья получена: 03.08.2025
Опубликовано online: 30.08.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.041
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 693
Оригинальное исследование Сравнение эффективности мРНК вакцин против M. tuberculosis на основе линейных и кольцевых РНК
А. С. Киршина, Г. С. Шепелькова, А. С. Хлебникова, А. А. Маслов, А. В. Козлова, Д. А. Кунык, В. В. Еремеев, Р. А. Иванов, В. В. Решетников
Успехи вакцинных препаратов на основе мРНК против вирусных инфекций побудили многих исследователей к разработке мРНК-вакцин против бактериальных инфекций. Разработка новой вакцины против туберкулеза является актуальной задачей, поскольку единственная одобренная к использованию вакцина BCG, хотя и снижает риск развития тяжелых форм заболевания, не является достаточно эффективной для предотвращения инфицирования. Целью исследования было сравнить две мРНК-вакцины против туберкулеза на основе классической линейной мРНК (mRNA-MTB-mEp-5-1) и на основе кольцевой мРНК (circRNA-MTB-mEp-5-1) по иммуногенности и способности защищать мышей I/St от заражения M. tuberculosis. Эффективность мРНК-вакцин в составе с липидными наночастицами сравнивали с эффективностью BCG. Результаты свидетельствуют о том, что иммунизация мРНК-вакциной на основе линейной мРНК привела к формированию клеточного и гуморального иммунного ответа (OD IgG = 0,36 ± 0,12), который был менее выражен, чем после вакцинации BCG (OD IgG = 0,54 ± 0,14). В то же время иммунизация мРНК-вакциной и BCG обеспечила сопоставимое снижение бактериальной нагрузки в легких и селезенке экспериментальных мышей (КОЕ в легочной ткани BCG: 4,00 × 105 ± 2,13 × 105, p = 0,0068; линРНК: 4,72 × 105 ± 3,44 × 105, p = 0,0059; LNP: 4,91 × 106 ± 3,89 × 106, ns; PBS: 4,01 × 106 ± 1,69 × 106) и повысила их выживаемость после заражения M. tuberculosis. Иммунизация вакциной на основе кольцевой мРНК привела к формированию только гуморального иммунитета (OD IgG = 0,52 ± 0,13) и не обеспечила защиту после заражения M. tuberculosis (КОЕ в легких колРНК: 2,12 × 106 ± 5,30 × 105, p = 0,85). Таким образом, в наших исследованиях противотуберкулезные вакцины на основе кольцевых мРНК уступают в эффективности препаратам на основе линейных РНК.
Статья получена: 22.07.2025
Опубликовано online: 26.08.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.040
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 743
Оригинальное исследование Динамика мозгового натрийуретического пептида и кортикостерона при экспериментальной хронической сердечной недостаточности на фоне физических нагрузок
Т. И. Джандарова, М. О. Табунщикова, С. И. Кубанов, Д. А. Доменюк
Умеренные физические нагрузки не только оказывают положительное влияние на общее состояние организма, но и могут выступать в качестве вполне доступного профилактического средства для сохранения здоровья, в частности, сердечно-сосудистой системы. Целью исследования было оценить адаптационные возможности сердечно-сосудистой системы при хронической сердечной недостаточности на фоне умеренных физических нагрузок в разных возрастных категориях. Умеренные физические нагрузки создавали у крыс в возрасте 6 и 19 месяцев принудительным плаванием в ванне с водой температурой 32–34 °С. На фоне тренировок хроническую сердечную недостаточность вызывали путем внутрибрюшинного введения антрациклинового антибиотика доксорубицин в кумулятивной дозе 15 мг/кг, разделенной на шесть инъекций в течение 14 дней. У всех крыс на протяжении эксперимента через каждые семь дней определяли в сыворотке крови содержание мозгового натрийуретического пептида и кортикостерона иммуноферментным методом. Установлено, что при хронической сердечной недостаточности на фоне проводимых умеренных нагрузок адаптация миокарда значимо выше в обеих возрастных группах. Наиболее ярко она проявляется у стареющих крыс, о чем свидетельствует динамика содержания натрийуретического пептида в сыворотке крови на протяжении всего эксперимента. Как у крыс репродуктивного периода, так и у стареющих крыс адаптационные возможности организма при возникновении нарушений сердечной деятельности на фоне умеренных физических нагрузок оказываются выше, чем в условиях отсутствия тренировок.
Статья получена: 07.08.2025
Опубликовано online: 23.08.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.039
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 764