Оригинальное исследование Полногеномное секвенирование и сравнительный геномный анализ мутантов Mycobacterium smegmatis, устойчивых к соединениям класса замещенных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов – кандидатов в противотуберкулезные препараты
Д. А. Маслов, О. Б. Беккер, К. В. Шур, А. А. Ватлин, А. В. Коротина, В. Н. Даниленко
Распространение штаммов Mycobacterium tuberculosis с множественной и широкой лекарственной устойчивостью требует разработки новых противотуберкулезных препаратов. Ранее нами были исследованы соединения класса замещенных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов, показавшие способность ингибировать серин-треониновые протеинкиназы в оригинальной тест-системе M. smegmatis aphVIII+. Для определения механизма действия кандидатов в лекарственные препараты необходимо исследование мутаций в геноме микобактерий, приводящих к устойчивости к этим препаратам. Целью работы было найти и охарактеризовать мутации, определяющие устойчивость штаммов M. smegmatis. Проводили полногеномное секвенирование девяти мутантов, устойчивых к трем соединениям класса замещенных имидазо[1,2-b][1,2,4,5]тетразинов. В семи из девяти мутантных штаммов обнаружена мутация (Y52H) в гене MSMEG_1601, кодирующем белок с неизвестной функцией и являющемся консервативным для микобактерий, причем в трех штаммах дополнительно обнаружены две мутации в гене MSMEG_1380, кодирующем транскрипционный регулятор. В двух оставшихся мутантных штаммах обнаружены мутации в генах MSMEG_0641 и MSMEG_2087, кодирующих белки- транспортеры. Мутаций в генах, кодирующих СТПК, обнаружено не было. Вероятно, они не являются основными мишенями исследуемых соединений. Дальнейшее изучение функции белка MSMEG_1601 представляет интерес в случае, если этот белок является новой биомишенью, либо частью нового механизма реализации устойчивости к потенциальным противотуберкулезным препаратам.
Статья получена: 30.05.2018
Опубликовано online: 23.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.039
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 8779
Обзор Mycobacterium tuberculosis: проблемы лекарственной устойчивости, вирулентности и подходы к их решению
В. Н. Даниленко, М. В. Зайчикова, И. Н. Дьяков, К. В. Шур, Д. А. Маслов
Несмотря на достигнутые успехи мероприятий, направленных на снижение смертности от туберкулеза, данное заболевание по прежнему крайне распространено, а в некоторых регионах России численность больных достигает показателей, характерных для уровня эпидемии. Многолетнее широкое применение антибиотиков, изменение состава микробиоты человека и ряд других факторов привели к появлению лекарственноустойчивых и высоковирулентных сублиний Mycobacterium tuberculosis. Недостаточность уровня и объема фундаментальных знаний о механизмах возникновения и формирования клонов M. tuberculosis, одновременно устойчивых ко многим антибиотикам и обладающих повышенной патогенностью, усложняет проблему и требует разработки новой концепции борьбы с туберкулезом. Ключевые понятия этой концепции — «суперорганизм», «микробиота» и «резистом». Возникновение форм с множественной (МЛУ) и широкой (ШЛУ) лекарственной устойчивостью следует рассматривать в контексте их формирования в составе некоторого суперорганизма, элементами которого являются собственно организм человека, его микробиота (в том числе влияющая на иммунный статус) и M. tuberculosis. Клинически тестируемые фенотипы и генотипы штаммов МЛУ/ШЛУ формируются на основе клональной изменчивости M. tuberculosis в «суперорганизме». Поэтому при разработке противотуберкулезных препаратов следует обращать особое внимание на создание вакцин, адъювантов и пробиотиков с селективными иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами.
Статья получена: 05.06.2018
Опубликовано online: 23.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.038
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6719
Оригинальное исследование Определение мутаций гена CFTR у детей с муковисцидозом
А. И. Никифорова, Д. Д. Абрамов, Г. Ю. Зобкова, А. В. Горяинова, С. Ю. Семыкин, Е. Шубина , А. Е. Донников, Д. Ю. Трофимов
Муковисцидоз (МВ) — одно из наиболее распространенных моногенных заболеваний человека. Определение частоты мутаций моногенного заболевания для конкретных популяций позволяет оптимизировать ДНК-диагностику, сократив ее себестоимость и время проведения. В статье представлены результаты ретроспективного исследования гена CFTR у 191 ребенка со смешенной формой МВ. Для определения 24 наиболее распространенных мутаций CFTR использовали диагностическую ПЦР-панель, а минорные варианты выявляли методом высокопроизводительного секвенирования. С помощью диагностической панели в выборке выявлено 18 типичных мутаций гена CFTR: F508del (с аллельной частотой 54,7%), dele 2,3 (21kb) (7,3%), 2143delT (3,4%), 2184insA (3,4%), 1677delTA (2,4%), N1303K (2,1%), 3849+10kbC>T (2,1%), E92K (2,1%), G542X (1,6%), W1282X (1,6%), S1196X (1,3%), R334W (1,0%), 394delTT(0,8%), 3944delGT (0,8%), 3821delT (0,5%), 2789+5G>A (0,5%), 621+1G>T(0,3%), 2183AA>G (0,3%). В результате секвенирования обнаружено 24 генетических варианта CFTR с потенциальной клинической значимостью. Обнаружено 8 минорных вариантов CFTR, до этого не отмеченных у пациентов в РФ, в том числе 4 новых мутации гена CFTR — p.Glu819Ter, p.Gln378Ter, p.Val1360Phefs и p.Lys1365Argfs.
Статья получена: 10.07.2018
Опубликовано online: 23.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.037
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6529
Мнение Лимфоциты TH1: корреляты протекции или маркеры активности туберкулезной инфекции?
И. В. Лядова, А. В. Пантелеев, И. Ю. Никитина, Т. В. Радаева
Создание новых противотуберкулезных вакцин и разработка методов патогенетической хозяин-ориентированной терапии туберкулеза требуют понимания механизмов, ответственных за протективный противотуберкулезный иммунитет. На протяжении долгого времени основным коррелятом протекции считались антиген-специфичные лимфоциты Th1. Однако со временем накопились сведения, не согласующиеся с этой концепцией. В статье обсуждаются спорные вопросы, касающиеся роли лимфоцитов Th1 в противотуберкулезном иммунитете, и возможности их использования в качестве коррелятов протекции при проведении доклинических и клинических исследований эффективности разрабатываемых вакцинных препаратов.
Статья получена: 29.05.2018
Опубликовано online: 21.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.036
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 5686
Оригинальное исследование Электромиостимуляция как альтернатива физической тренировке у пациентов с ХОБЛ
Т. В. Кунафина, А. Г. Чучалин, А. С. Белевский, Н. Н. Мещерякова, Е. Н. Калманова, О. В. Кожевникова
Пациенты с обострением хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) не способны выполнять тренировочные упражнения в рамках программы легочной реабилитации. Альтернативой служит метод электромиостимуляции (ЭМС), поскольку его применение не вызывает усиления одышки у пациента. Целью работы была оценка эффективности краткосрочной ЭМС четырехглавой мышцы бедра на двигательную активность у пациентов с ХОБЛ. В проспективное открытое рандомизированное исследование вошли 36 пациентов, разделенные на две сопоставимые группы. Пациентам в основной группе проводили ЭМС в течение 10 дней. На 10-е сутки регистрировали и сравнивали клинико-функциональные параметры и потенциальные побочные эффекты. Между двумя группами не было отмечено существенных различий в отношении исходных характеристик. По результатам межгруппового анализа, основная группа имела статистически значимые улучшения показателей измерений, выполненных шагомерм и при миографии, равных соответственно 418,5 (86,0; 815,0) против 226,7 (48,0; 660,0) (p = 0,02), 463,0 (122; 804) против 210,5 (64; 481) (p = 0,0001). Отмечалось значительное снижение баллов при оценке ХОБЛ по CAT-тесту и оценке одышки по mMRC-шкале и по шкале Borg: 22,8 (18,0; 34,0) против 28,4 (26,0; 34,0) (p = 0,00007), 2,7 (2,0; 4,0) против 3,1 (3,0; 4,0) (p = 0,03) и 6,3 (5,0; 7,0) против 7,2 (6,0; 9,0) (p = 0,0002) соответственно. Побочных эффектов в основной группе отмечено не было. На основании полученных результатов можно сделать вывод, что краткосрочная ЭМС четырехглавой мышцы бедра улучшает двигательную активность пациентов, повышая качество жизни и способность выполнять программы легочной реабилитации в последующем, и является альтернативой физическим тренировкам у пациентов с ХОБЛ.
Статья получена: 19.05.2018
Опубликовано online: 17.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.035
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6010
Клинический случай Артериовенозная фистула после удаления вестибулярной шванномы
А. А. Реутов, М. С. Аронов, Ю. В. Кушель
Формирование артериовенозной фистулы в результате хирургических манипуляций составляет всего 0,22% всех случаев ее возникновения. В работе описано формирование артериовенозной фистулы у пациентки с вестубулярной шванномой, удаленной путем ретросигмовидного доступа. Клинические проявления фистулы в виде пульсирующего шума, усиливающегося при поворотах и наклонах головы, появились отсрочено после выписки. Диагноз был подтвержден с помощью прямой церебральной ангиографии во время повторной госпитализации. Описываются возможные осложнения хирургического лечения, клинические проявления и результаты успешного лечения артериовезнозной фистулы путем эндоваскулярного разобщения.
Статья получена: 19.01.2018
Опубликовано online: 15.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.034
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6066
Клинический случай Актуальность удаления невуса Ядассона у лиц молодого возраста
Т. А. Гайдина, А. С. Дворников, П. А. Скрипкина, Г. Б. Арутюнян
Одним из доброкачественных образований кожи является себорейный невус Ядассона (NSJ) — гамартома, локализующаяся преимущественно на коже лица или волосистой части головы и одинаково часто встречающаяся у мужчин и женщин. Плюрипотентные первичные эпителиальные клетки, входящие в структуру NSJ, являются благоприятной средой для развития на его фоне как доброкачественных, так и злокачественных опухолей. Для исключения неопластической трансформации целесообразно удалять NSJ сразу после полового созревания. При невозможности хирургического вмешательства пациентам требуется постоянное динамическое наблюдение. В данной работе представлено два случая успешного удаления СО2-лазером NSJ у пациентов молодого возраста.  
Статья получена: 05.05.2018
Опубликовано online: 14.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.033
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 7542
Оригинальное исследование Персистирование онколитического энтеровируса Коксаки А7 в подкожных мышиных ксенотрансплантатах глиобластом человека при экспериментальной терапии
А. С. Сидоренко, А. О. Желтухин, Т. Х. Ле, А. В. Соболева, А. В. Липатова, Д. А. Гольбин, П. М. Чумаков
Природные непатогенные и вакцинные штаммы энтеровирусов человека в настоящее время рассматриваются в качестве перспективных средств для лечения онкологических заболеваний, в том числе мультиформной глиобластомы — наиболее агрессивной опухоли головного мозга, для которой не существует эффективных средств терапии. Энтеровирусы могут избирательно реплицироваться в клетках опухоли, вызывая их лизис. Однако способность энтеровирусов длительно присутствовать в опухолевой ткани и совершать несколько последовательных циклов репликации с распространением от клетки к клетке плохо изучена. Целью исследования было установление возможности полного уничтожения подкожных ксенотрансплантатов глиобластом человека при однократном введении вируса внутривенной доставкой с помощью лейкоцитов периферической крови, а также длительность присутствия (персистирования) вируса в организме экспериментальных животных в процессе вирусной терапии. В качестве опухолевых клеток использовали нейросферы, полученные in vitro путем инкубации фрагментов удаленных у пациентов опухолей. Установлено, что лейкоциты периферическойкрови человека, инфицированные in vitro, способны осуществлять эффективную доставку в клетки опухоли вируса Коксаки А7. Однократное введение 2 × 104 зараженных вирусом лейкоцитов приводило к постепенной регрессии опухолей при постоянно определяющемся присутствии вируса в крови мыши. По результатам исследования сделан вывод, что доставка энтеровируса Коксаки А7 в опухоль может быть эффективно осуществлена с помощью лейкоцитов крови. В отсутствие полноценного иммунного ответа в опухолях у мышей наблюдается персистирование вирусов, заканчивающееся их полным уничтожением.
Статья получена: 13.07.2018
Опубликовано online: 11.08.2018
DOI: 10.24075/vrgmu.2018.032
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 6106