ISSN Print 2070–7320    ISSN Online 2070–7339
НАУЧНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ РНИМУ ИМЕНИ Н. И. ПИРОГОВА

Новые статьи

Acinetobacter baumannii представляет собой патоген высокого приоритета, быстро приобретающий множественную лекарственную устойчивость. Ограниченное временное разрешение на протеомном и транскриптомном уровнях затрудняет углубленное исследование процессов приобретения резистентности в режиме реального времени, что усложняет разработку эффективных стратегий преодоления устойчивости. Целью работы было исследовать процессы приобретения резистентности на 45 клинических штаммах A. baumannii из трех географических зон в течение 72 ч путем воздействия карбапенемами, аминогликозидами и β-лактамными антибиотиками в субингибирующей концентрации. Процесс приобретения кинетической резистентности одновременно отслеживали посредством вестерн-блоттинга для определения уровня экспрессии белков резистентности (β-лактамаз, эффлюксных насосов, поринов) и количественной ПЦР (ОТ-ПЦР) мРНК с использованием специально разработанных зондов TaqMan с максимально высоким временным разрешением (13 временных точек с интервалом 6 ч). Анализ методом вестерн-блоттинга выявил ранее не известную двухфазную индукцию белков резистентности: раннюю фазу (0–18 ч) с 3,4-кратной индукцией OXA-23 и позднюю фазу (24–72 ч) с 7,8-кратной индукцией NDM-1. Результаты применения ОТ-ПЦР показали, что уровень мРНК достигает максимума за 4–8 ч до достижения максимальной экспрессии белка, что говорит о существовании полноценной посттранскрипционной регуляции. Обнаружено, что уровень белка семейства эффлюксных насосов AdeB повысился в 12,6 раз при повышении уровня мРНК лишь в 2,1 раза, что свидетельствует о значительном усилении трансляции с соотношением белок/ мРНК, равным 6,1. Алгоритм машинного обучения разделил результаты воздействия на три различные категории, что имеет большое клиническое значение: эффект достигнут рано (воздействие неэффективно в 89% случаев); эффект достигнут поздно (воздействие неэффективно в 45% случаев); имеет место конститутивная экспрессия (воздействие неэффективно в 67% случаев). Таким образом, интегративный анализ выявил новые параметры временной динамики развития резистентности, основные «окна» для вмешательства продолжительностью 4–8 ч до момента, когда резистентность становится необратимой. Посттранкрипционная регуляция намного более важна, чем принято считать. Ее можно использовать для разработки новой комплексной терапии и персонализированной противомикробной терапии.
ПРОСМОТРЫ 2
Аваскулярный некроз головки плечевой кости ухудшает результаты лечения переломов проксимального отдела плечевой кости. Цель работы — оценить частоту аваскулярного некроза у пациентов с трех- и четырехфрагментарными переломами проксимального отдела плечевой кости и улучшить результаты лечения с помощью новой техники репозиции. В ретроспективно-проспективное когортное исследование были включены 357 пациентов с трех- и четырехфрагментарными переломами проксимального отдела плечевой кости. 200 пациентов (147 (73,5%) женщин и 53 (26,5%) мужчины) основной группы были прооперированы с применением управляемого комплекса «головка–пластина» (патент РФ №2705234), 157 пациентов (120 (76,4%) женщин и 37 (23,6%) мужчин)  группы сравнения — традиционной техникой. Через два года было обследовано 329 пациентов. Применение разработанного метода репозиции привело к снижению частоты аваскулярного некроза (АН) II–IV стадий по Cruess с 28,8% до 17,3% (p = 0,015). Риск АН увеличивался с возрастом, при сахарном диабете и остеопорозе и полиморбидности.
ПРОСМОТРЫ 101
Вульгарная пузырчатка — тяжелое аутоиммунное буллезное заболевание, обусловленное продукцией аутоантител к десмоглеину 3 (Dsg3). Для разработки отечественных диагностических тест-систем на основе иммуноферментного анализа (ИФА) необходим доступный стандартизированный антигенный компонент — рекомбинантный внеклеточный фрагмент Dsg3. Цель проведенного ретроспективного экспериментального исследования — получить рекомбинантный эктодомен Dsg3 (домены ЕС1-ЕС5) в гетерологичной системе экспрессии и оценить его иммунореактивность с аутоантителами пациентов с вульгарной пузырчаткой при использовании в качестве целевого антигена в ИФА. Синтетический ген, кодирующий домены ЕС1-ЕС5 Dsg3, клонировали в эукариотические экспрессионные векторы p1.1-Tr2 и p1.2-GS. Полученными конструкциями трансфицированы клетки линии CHO4BGD. Целевой белок очищали методом аффинной хроматографии на Ni-Sepharose FF сорбенте. Иммунореактивность рекомбинантного Dsg3 как антигенного субстрата оценивали методом ИФА с использованием сывороток пациентов с вульгарной пузырчаткой (n = 12) и здоровых доноров (n = 5) в двух буферных условиях: с ЭДТА (Dsg3-ЭДТА) и с добавлением ионов Ca2+ (Dsg3-Ca2+). Референсом служила коммерческая тест-система для ИФА Euroimmun (целевой антиген — эктодомен Dsg3). В результате получены транзиентные культуры клеток-продуцентов ЕС1-ЕС5 доменов Dsg3. Методом аффинной хроматографии выделен белок с чистотой > 90%. При ИФА-тестировании в буфере Dsg3-ЭДТА положительными были классифицированы 33,3% образцов, а в буфере Dsg3-Ca2+ — 50,0%; эффект добавления Ca2+ был гетерогенным: у 58,3% образцов отмечено повышение сигнала, у 41,7% — снижение. Результаты указывают на необходимость перехода к экспрессии Dsg3 в клетках человека (HEK293).
ПРОСМОТРЫ 92
Высокозлокачественная серозная карцинома яичников — одна из значимых проблем онкологии. Цель исследования — оценить пространственную и фенотипическую гетерогенность экспрессии белков EpCAM, HER2, TROP2 и пан-цитокератина в клетках первичной опухоли, перитонеальных метастазах и асцитическом опухолевом компартменте (АОК), представленном сфероидами и одиночными клетками, а также изучить связь выявленных субпопуляций с проведением неоадъювантной химиотерапии (НАХТ) и прогрессированием заболевания. В проспективном одноцентровом исследовании у 27 пациенток с гистологически верифицированным серозным раком яичников высокой степени злокачественности исследовали методом иммунофлуоресценции экспрессию EpCAM, HER2, TROP2 и пан-цитокератина. Доля EpCAM–HER2– клеток различалась между первичной опухолью, перитонеальными метастазами и АОК, преобладая среди отдельных клеток асцитической жидкости (АЖ) и тканью метастазов (р = 0,0012). CK–TROP2– клетки были более представлены среди отдельных клеток АЖ (73,50 (51,00–91,25)%, р = 0,0249). Доля CK+TROP2– клеток выше в солидных опухолевых очагах (83,00 (65,00–95,00)% в первичной опухоли и 94,50 (47,00–98,00)% в ткани метастазов, р < 0,0001). У пациенток, получавших НАХТ, доля EpCAM+HER2+ клеток в первичной опухоли и метастатических опухолевых очагах выше, чем у пациенток без предоперационного лечения (42,50 (6,25–71,25)% против 0,00 (0,00–5,00)%, р = 0,0333). Клиническая значимость субпопуляции клеток с фенотипом EpCAM–HER2– зависела от формы организации в асците. Так, увеличение доли EpCAM–HER2– среди отдельных клеток АЖ, а не в составе сфероидов, было независимо связано с повышенной вероятностью прогрессирования (ОШ (95% ДИ) 1,256 (1,010–7,769), р = 0,0322) и более плохой выживаемостью без прогрессирования (ОШ (95% ДИ) 1,118 (1,001– 1,518), р = 0,0459). HGSOC характеризуется выраженной фенотипической гетерогенностью между опухолевыми компартментами. АОК может отражать особенности фенотипического состояния диссеминированных опухолевых клеток.
ПРОСМОТРЫ 108

Популярные статьи

В связи с высокой распространенностью послеоперационных вентральных грыж необходима разработка эффективных протоколов реабилитации, направленных на раннее восстановление функции мышц брюшного пресса и снижение риска рецидива. Целью работы было оценить влияние электромиостимуляции (ЭМС) мышц передней брюшной стенки на уровень физической активности и силовые показатели у пациентов после хирургического лечения послеоперационных вентральных грыж. В исследовании участвовало 128 пациентов (47,9 ± 8,6 лет), перенесших открытую комбинированную сепарационную герниопластику с ретромускулярной установкой сетчатого импланта. Пациентам в основной группе (n = 64) с 10-х суток после операции проводили курс ЭМС передней брюшной стенки аппаратом COMPEX SP-2.0, в контрольной (n = 64) — стандартные послеоперационные мероприятия. Оценивали уровень физической активности (шагометрия за 7 суток) и силу мышц туловища (тензодинамометрия, Back-Check 700). Через 6 месяцев после операции в группе ЭМС зафиксировано значимое увеличение силы мышц: при разгибании туловища медиана силы составила 26,9 кг против 15,4 кг в контроле (прирост на 74,7%; p < 0,001); при сгибании — 15,7 кг против 8,0 кг в контроле (прирост на 96,3%; p < 0,001). Уровень физической активности в группе ЭМС был статистически значимо выше: медиана числа шагов за неделю — 27304,5 ± 2903,48 (95% ДИ 20964,6–33644,5) в контрольной группе — 11173,6 ± 3688,8 (95% ДИ 10065,4–12281,9) шагов, что соответствует восстановлению до 90,0% от исходного дооперационного уровня. Таким образом, курс ЭМС мышц передней брюшной стенки, начатый в ранние сроки после герниопластики, является эффективным методом реабилитации, достоверно улучшающим силовые характеристики мышц кора и восстанавливающим физическую активность пациентов.
ПРОСМОТРЫ 1389
Замершая беременность относится к числу наиболее распространенных форм ранних репродуктивных потерь и остается актуальной проблемой акушерства и гинекологии. Несмотря на достижения в области репродуктивной медицины, молекулярные механизмы, лежащие в основе прекращения развития эмбриона на ранних сроках гестации, изучены недостаточно. Целью сравнительного одноцентрового исследования было оценить уровень экспрессии генов TGF-β и MMP-9 в периферической крови женщин с физиологической и замершей беременностью и определить их потенциальную прогностическую значимость при оценке риска ранних репродуктивных потерь. В исследование были включены 40 беременных женщин: 20 пациенток с физиологически протекающей беременностью сроком 9–11 недель (контрольная группа) и 20 женщин с диагнозом замершей беременности (основная группа). Уровень экспрессии генов TGF-β и MMP-9 определяли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени после выделения тотальной РНК из периферической крови. Для статистической обработки результатов использовали критерий Манна‒Уитни и ROC-анализ. Статистически значимых различий между исследуемыми группами по уровням экспрессии генов TGF-β и MMP-9 выявлено не было. Вместе с тем ROC-анализ позволил определить пороговые значения исследуемых показателей, обладающие определенной диагностической информативностью. Для MMP-9 наиболее информативным оказалось значение Ct ≤ 29, обеспечивающее чувствительность 80% и специфичность 60%. Для TGF-β пороговое значение Ct ≤ 27,4 характеризовалось чувствительностью 75% и специфичностью 70%. Полученные результаты свидетельствуют о потенциальной прогностической значимости исследуемых генов при оценке риска замершей беременности.
ПРОСМОТРЫ 1285
Уважаемые исследователи!
В конце 2015 г. «Вестник РГМУ» значительно изменился: и внешне, и содержательно. Мы подготовили новую редакционную политику и установили жесткие этические требования к рукописям, соответствующие стандартам уважаемых международных ассоциаций. В результате за прошедший год мы отклонили четверть поступивших на рассмотрение рукописей. Самая частая причина отказа: авторы пытаются опубликовать заново ранее представленные данные. Чуть изменили введение, исключили из исследования несколько человек, пересчитали данные, получили другие цифры — и кажется, что новая работа готова. Именно поэтому в спецпроекте «Авторская работа» мы решили поговорить в первую очередь о научной честности, самоплагиате и плагиате.
Ричард ФЕЙНМАН Наука самолетопоклонников
Американский физик Ричард Фейнман, Нобелевский лауреат, всегда был крайне щепетилен в том, что касалось качества научного исследования. В 1974 году, выступая перед выпускниками КалТеха, он напутствовал молодых исследователей «не дурачить самих себя». К прочтению всем, кто считает себя ученым!
Иван ПАВЛОВ О русском уме
Российский физиолог Иван Павлов, Нобелевский лауреат, в 1918 году прочел две лекции: об уме вообще и о русском уме в частности; о свойствах ума, определяющих успех в научной работе, и о том, насколько эти свойства присущи научному русскому уму. Размышления Павлова — прививка от дурного мышления.