МЕТОД
Тканевая хемилюминесценция как метод оценки супероксид радикал-продуцирующей способности митохондрий
Кафедра медицинской биофизики, факультет фундаментальной медицины,Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова, Москва
Для корреспонденции: Джатдоева Айшат Абдрахмановна
Ломоносовский пр-т, д. 31, корп. 5, г. Москва, 119192; moc.liamg@jdtahsya
Финансирование: работа выполнена при поддержке Российского научного фонда (грант № 14-15-00375).
Благодарности: авторы благодарят Алексея Гришина, студента кафедры физиологии МГУ имени М. В. Ломоносова, за помощь в подборе состава газовых смесей.
Дисфункция митохондрий лежит в основе развития многих заболеваний человека, включая дегенеративные. Одно из следствий митохондриальной дисфункции — апоптоз функционально-активных клеток. На начальной стадии апоптоза отмечается усиление продукции супероксид анион-радикала (САР). Перспективным методом обнаружения САР в клетках и тканях является метод хемилюминесценции (ХЛ), прежде всего — в присутствии люцигенина, специфичного для САР химического активатора ХЛ. В исследовании был предложен способ усовершенствования метода, а также оценена его эффективность при определении уровня образования САР в переживающих тканях лабораторных животных при моделировании гипоксии и паркинсонизма. Предложенные для аэрации опытных образцов кислород- содержащая (O2 — 15 %, CO2 — 5 %, N2 — 80 %) и бескислородная (CO2 — 5 %, N2 — 95 %) газовые смеси обеспечивали постоянство pH 7,4, необходимое для корректной регистрации ХЛ. С помощью изучаемого метода было показано достоверное увеличение уровня образования САР в ткани сердца крыс при циклах гипоксии длительностью 150 и 240 мин — в 1,8 и 2,0 раза. При паркинсонизме уровень образования САР в ткани мозга мышей, содержащей стриатум и черную субстанцию, через 12 ч после введения последней дозы пронейротоксина оказался выше в 1,7 и 1,3 раза соответственно в сравнении с контролем.
Ключевые слова: гипоксия, апоптоз, митохондриальные заболевания, супероксид анион-радикал, супероксид радикал-продуцирующая способность, паркинсонизм, тканевая хемилюминесценция, люцигенин