Исследование иммунитета новорожденных, рожденных от матерей с генетически доказанной новой коронавирусной инфекций COVID-19, представляет большой интерес в связи с продолжающейся пандемией, вызванной COVID-19. В зарубежной литературе имеются лишь единичные работы, посвященные этому вопросу. Представленные авторами данные в отношении иммунитета новорожденных к новой коронавирусной инфекции COVID-19 единичны, а результаты наблюдений требуют дальнейшего углубленного изучения и анализа. Считается, что вертикальный путь передачи новой коронавирусной инфекции COVID-19 от матери к ребенку крайне маловероятен [1]. Описано всего несколько достаточно спорных случаев возможной вертикальной передачи вируса в Китае [2, 3] и в Перу [4]. Согласно действующему руководству ВОЗ, анализы на коронавирус COVID-19 необходимо проводить с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) как наиболее точного и надежного метода диагностики вирусной инфекции [5]. Он позволяет определить даже очень небольшое количество РНК вируса в биологическом материале человека. Тестирование заболевших на наличие антител IgM и IgG к вирусу SARS-CoV-2 в настоящее время применяют достаточно широко, и использование этой методики в отношении новорожденных и матерей представляется достаточно интересным методом для изучения иммунитета новорожденных, родившихся от матерей с генетически доказанной новой коронавирусной инфекцией COVID-19. Целью работы было исследовать иммунитет новорожденных, появившихся от матерей с генетически доказанной коронавирусной инфекцией COVID-19. Наличие иммуноглобулинов класса IgG к вирусу SARS-CoV-2 у новорожденных позволяет судить о наличии врожденного иммунитета и носит прогностический характер.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

Для исследования была отобрана группа рожениц (n = 20), возраст которых составлял от 19 до 39 лет, поступивших на роды в родильный дом ГКБ № 15 имени О. М. Филатова в период с 01.05.2020 по 20.05.2020. При поступлении в родильный дом всем роженицам была выполнена ПЦР- диагностика COVID-19. Кроме того, на первом–втором дне жизни всем новорожденным (n = 21, в одном случае родилась двойня) также проводили ПЦР-исследование. Критерии включения пациенток в исследование: диагностирование COVID-19 в предродовом периоде; наличие легких и среднетяжелых клинических проявлений COVID-19, тяжесть течения заболевания оценивали согласно Временным методическим рекомендациям [6]. Критерии исключения: в исследование не вошли родильницы с ОРВИ, а также родильницы с отрицательными результатами ПЦР- диагностики на РНК вируса SARS-CoV-2.
Лабораторную (молекулярно-биологическую) диагностику новой коронавирусной инфекции (COVID-19) проводили в соответствии с актуальной на момент исследования версией временных методических рекомендаций [6].

Забор биоматериала для ПЦР-диагностики коронавируса SARS-CoV-2 проводили согласно действующим нормативным документам [7]. Этиологическая диагностика новой коронавирусной инфекции COVID-19 заключается в установлении факта инфицирования коронавирусом SARS-CoV-2 на основе выявления в биоматериале от пациента РНК SARS-CoV-2 с использованием методов амплификации нуклеиновых кислот. В нашей лаборатории выделение РНК коронавируса SARS-CoV-2 проводили на тест-системах «Ампли-Тест SARS-CoV-2», разработанных в Центре стратегического планирования и управления медико-биологическими рисками здоровья Федерального медико-биологического агентства (ЦСП ФМБА; Россия).
Проводили тестирование на антитела класса IgM и IgG к штамму вируса SARS-CoV-2 в сыворотке у родильниц и новорожденных на первый–второй день жизни с целью количественного определения антител к вирусу, вызывающему COVID-19. Взятие, транспортировку и хранение биологического материала осуществляли в соответствии с рекомендациями разработчика тест-системы.
Исследования выполняли на анализаторе CL 6000i (Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Cо.; Китай).

Качественное определение антител IgG и IgM к вирусу SARS-CoV-2 (SARS-CoV-2-IgG, SARS-CoV-2-IgM) проводили иммунохемилюминесцентным методом (чувствительность и специфичность метода составляют, согласно данным разработчика, 97,8 и 97,9% соответственно). Референсные значения для примененной нами методики определения антител класса IgM и IgG к вирусу, вызывающему COVID-19, составляли 0,00–0,999 ОСЕ и 0,00–9,90 Ед./мл соответственно.
Родоразрешение проводили через естественные родовые пути (n = 16). В четырех наблюдениях было выполнено кесарево сечение в нижнематочном сегменте по общепринятой методике. Все мамы носили маски, все медицинские сотрудники использовали защитные костюмы и маски класса защиты FFP2-3 в соответствии с требованиями эпидемиологического режима.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Младенцы были изолированы от матерей сразу после родов. Все дети имели на первой минуте рождения 8–9 баллов по шкале Апгар, на пятой минуте — 9–10 баллов. Неонатальные мазки из носа и носоглотки, взятые на первый–второй день жизни, имели отрицательные результаты ПЦР-теста у всех новорожденных. Одновременно с выполнением ПЦР- диагностики COVID-19 выполняли исследование крови на IgM и IgG к вирусу SARS-CoV-2.
В сыворотке у всех новорожденных были обнаружены антитела. У одного младенца были повышены уровни IgM и IgG, у четырех новорожденных уровень IgM и IgG находился в пределах референсных значений, такие же результаты были получены и у матерей. У 14 новорожденных выявлено превышение уровня IgG, при этом у матерей были выше референсных значений и уровень IgM, и уровень IgG (таблица).
У всех детей, рожденных от обследованных матерей с подтвержденным COVID-19, РНК вируса SARS-CoV-19 не была обнаружена в мазке из горла методом ПЦР. Тем не менее у всех новорожденных в образцах сыворотки крови были выявлены вирусспецифичные антитела класса IgG.
Уровень IgG был повышен у 16 детей, но в тех же случаях, когда он был повышен и у матери (n = 16).

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Исходя из полученных нами данных, можно сделать вывод, что, по всей видимости, антитела класса IgG пассивно переносятся кровотоком матери через плаценту к плоду во время конца второго триместра и достигают наибольшего уровня к моменту рождения. По данным других источников, антитела класса IgM, которые в нашем исследовании были обнаружены у одного новорожденного, не передаются от матери к плоду из-за его большого молекулярного веса [1–4]. Однако IgM мог продуцировать сам младенец, если вирус, вызывающий COVID-19, проник в плаценту. Наши данные совпадают с результатами китайских исследователей, полученными на меньшем числе наблюдений [8–10]. Мы не проводили исследование плаценты, поэтому данное суждение всего лишь предположение. Наше наблюдение ограничено небольшим размером выборки, отсутствием исследования вируса и антител в амниотической жидкости и грудном молоке. Тем не менее полученные данные могут быть важны для понимания серологических характеристик новорожденных, чьи матери инфицированы вирусом SARS-CoV-2.

ВЫВОДЫ

1. В крови новорожденных от матерей с генетически доказанной новой коронавирусной инфекцией COVID-19 на первый–второй день жизни в крови обнаружен повышенный уровень IgG. 2. Повышенный уровень вирусспецифичного IgG может свидетельствовать о наличии врожденного иммунитета к этой инфекции.
3. Отсутствие повышенного уровня вирусспецифичного IgM у новорожденных от матерей с генетически доказанной COVID-19 обусловлено с большой степенью вероятности невозможностью трансплацентарного переноса от матери IgM в связи с большим молекулярным весом.