2020 / 05

DOI: 10.24075/vrgmu.2020.068

ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Новые однодоменные антитела к мезотелину и клеточные модели для разработки таргетной терапии рака молочной железы

Ю. Е. Кравченко, С. П. Чумаков, Е. И. Фролова
Информация об авторах

Институт биоорганической химии имени М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова, Москва, Россия

Для корреспонденции: Степан Петрович Чумаков
ул. Миклухо-Маклая, 16/10, г. Москва, 117997; moc.liamg@lukhtah

Информация о статье

Финансирование: работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (уникальный код проекта RFMEFI60418X0205).

Соблюдение этических стандартов: работу с животными проводили в соответствии с принципами и требованиями Международной лаборатории по уходу за животными и Директивой совета европейских сообществ (86/609/EEC) от 24 ноября 1986 г.

Вклад авторов: Ю. Е. Кравченко — работа с клеточными культурами, ПЦР-РВ, ИФА; С. П. Чумаков — получение иммунных библиотек, проведение селекции, очистка белковых препаратов, цитометрия, написание рукописи; Е. И. Фролова — планирование исследования, проведение манипуляций с животными, работа с первичными культурами, редактирование рукописи.

Статья получена: 28.09.2020 Статья принята к печати: 20.10.2020 Опубликовано online: 31.10.2020
|
Рис. 1. Селекция наноантител. А. Уровни сывороточных антител к мезотелину в крови иммунизированного животного на момент проведения каждого раунда иммунизации. Б. Динамика обогащения иммунных фаговых библиотек наноантителами, специфично распознающими мезотелин, после каждого раунда селекции. В. Результаты скрининга 96 случайно отобранных клонов (прямая ИФА на мезотелин). 1–48 — клоны из общей библиотеки, 49–96 — клоны из предселектированной библиотеки
Рис. 2. Определение уровней мезотелина. A. Относительные уровни экспрессии MSLN в клеточных культурах ТНРМЖ, согласно данным ПЦР-РВ.Б. Уровни MPF в культуральных средах клеток ТНРМЖ. Приведены медианные значения и стандартные отклонения между биологическими повторностями
Рис. 3. Тестирование наноантител на культурах ТНРМЖ. Результаты измерения на проточном цитометре модельных клеточных культур ТНРМЖ, меченых MesoVHH-2H5B (A) и MesoVHH-1E3B (Б). Окрашивание проводили при помощи Streptavidin-FITC