Естественное инфицирование и вакцинация против COVID-19 приводят к выработке антител против вирусных антигенов, играющих важную роль в мониторинге иммунного ответа [1]. Хотя ожидается, что приобретенный естественным путем иммунитет к SARS-CoV-2 будет длительным [2–3], серологический эквивалент защиты от вируса еще не установлен. Одним из препятствий для определения такого коррелята является отсутствие стандартизации лабораторных анализов, что, вероятно, объясняет противоречивые литературные данные о серологических исследованиях при SARS-CoV-2инфекции. Недавно ВОЗ ввела Международный стандарт анти-SARS-CoV-2-иммуноглобулинов (IS-SARS-CoV-2), который позволяет унифицировать результаты измерения уровня антител к SARS-CoV-2, используя единицы IS-SARS-CoV-2, а именно единицы связывания антител (binding antibody units, BAU) [1]. Целью исследования было измерить концентрацию IgG к рецепторсвязывающему домену (RBD) SARS-CoV-2 в разные моменты времени в течение 12-месячного периода в когорте медицинских работников, переболевших SARS-CoV-2-инфекцией, с использованием наборов для иммуноферментного анализа (ИФА), откалиброванных по IS-SARS-CoV-2.

ПАЦИЕНТЫ И МЕТОДЫ

В исследовании, продолжавшемся с мая 2020 г. по июнь 2021 г., приняли участие сотрудники Российской детской клинической больницы РНИМУ им. Н. И. Пирогова. Критерии включения в исследование: наличие положительного ПЦРтеста на CoVID-19. Критерии исключения: отсутствовали.

В апреле и мае 2020 г. лица с положительным результатом ПЦР на SARS-CoV-2 после возвращения на работу сдавали образец сыворотки с интервалом в месяц для измерения анти-RBD-IgG. Образцы собирали ежемесячно в течение 6 месяцев, а последняя проба была получена через 12 месяцев после положительного результата ПЦР; от каждого участника было получено 4–7 образцов. Собранные образцы хранили при температуре –80 °C.

Все образцы были проанализированы в одной серии в июле 2021 г. с использованием набора ИФА для количественного определения анти-RBD-IgG (XEMA; Россия) [4], откалиброванного при помощи IS-SARSCoV-2. Аналитический диапазон составлял 15–240 BAU/мл; образцы с концентрацией анти-RBD-IgG >240 BAU/мл дополнительно разводили в 10–100 раз и повторно измеряли в отдельной серии. Положительными считали образцы при уровне анти-RBD-IgG ≥15 BAU/мл.

Статистическую обработку проводили при помощи пакета программ IBM SPSS Statistics 27.0 (IBM Corp.; США).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Всего в ходе исследования было получено 97 образцов сыворотки у 20 индивидов, в том числе у 14 (70%) женщин, с подтвержденной ПЦР SARS-CoV-2-инфекцией. Медиана возраста составила 50 лет (Q₁–Q₃, 40–57 лет). Течение COVID-19 у всех участников было легкой или средней степени тяжести, тяжелые случаи отсутствовали.

У трех человек образцы сыворотки были получены за месяц до заражения SARS-CoV-2; в этих образцах анти-RBD-IgG не обнаружены. Через месяц после положительного результата ПЦР SARS-CoV-2 у всех участников присутствовали анти-RBD-IgG в концентрации выше порогового значения, равного 15 BAU/мл, со средним геометрическим титром (GMT) 433 BAU/мл (95% ДИ, 123–1527 BAU/мл; диапазон — 36–25900 BAU/мл) (см. рисунок). В точке 2 месяца медиана GMT имела близкое значение — 456 BAU/мл (95% ДИ, 154–1353 BAU/мл). В дальнейшем концентрация анти-RBD-IgG постепенно снижалась, достигнув медианы GMT 68 BAU/мл (95% ДИ, 35–131 BAU/мл) к 12 месяцу. В промежутке между первым и шестым месяцами все образцы были анти-RBD-IgGположительными. Из 14 человек, обследованных через 12 месяцев после заражения SARS-CoV-2, 13 (93%) индивидов сохраняли серопозитивность в отношении антиRBD-IgG с GMT выше 15 BAU/мл. Медиана концентрации анти-RBD-IgG была в 6,7 раза ниже (95% ДИ, 4,4–10,3 раз) через 12 месяцев по сравнению с самой высокой медианой GMT, выявленной на втором месяце после инфицирования SARS-CoV-2.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

До сих пор было опубликовано лишь несколько исследований, в которых использованы стандартизированные значения количества антител против SARS-CoV-2 после естественной инфекции и/или вакцинации [5–7]. Так, при помощи метода нейтрализации живого вируса показано, что анти-RBD-IgG в концентрации ≥100 BAU/мл через год после заражения полностью нейтрализовали три вызывающих опасения варианта SARS-CoV-2, что снизило риск повторного заражения этими штаммами вируса [5]. В другом сообщении у вакцинированных м-РНК-вакциной на 14-й день после вакцинации GMT анти-RBD-IgG составлял 7756 BAU/мл [6]. Таким образом, количественные результаты дают основание для поиска общего серологического коррелята иммунной защиты против SARS-CoV-2. Более того, такие данные важны для мониторинга естественного иммунитета и облегчают сравнение иммунного ответа на различные вакцины [1]. Значительные различия и системная погрешность в числовых результатах, выраженных в BAU/мл, при использовании различных тест-систем [7] оправдывают дальнейшие усилия по унификации серологических тестов, выявляющих антитела против SARS-CoV-2.

ВЫВОДЫ

В работе проведена оценка динамики антительного ответа на SARS-CoV-2-инфекцию в ходе формирования естественного иммунитета. Применение IS-SARS-CoV-2 для калибровки ИФА-тест-системы позволило продемонстрировать изменение концентрации антиRBD IgG в широком диапазоне от 36 до 25900 BAU/мл с максимальным разбросом значений в первые два месяца после инфицирования. С течением времени уровень антиRBD-IgG постепенно снижался, однако положительные значения сохранялись на протяжении всех 12 месяцев наблюдения у большинства обследованных.