ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Дискриминирующая способность метода мультиплексной ПЦР при выявлении микобактериальной коинфекции

Информация об авторах

1 Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза, Москва, Россия

2 Московский государственный медико-стоматологический университет имени А. И. Евдокимова, Москва, Россия

Для корреспонденции: Татьяна Геннадьевна Смирнова
Яузская аллея, д. 2, к. 1А, г. Москва, 107564, Россия; ur.liam@aktat_s

Информация о статье

Финансирование: исследование проведено в рамках выполнения работ по Государственному заданию ФГБНУ "ЦНИИТ" № НИОКТР 122041100246-3 «Межвидовой и внутривидовой полиморфизм микобактерий у больных туберкулезом и микобактериозом на фоне специфической терапии».

Вклад авторов: Т. Г. Смирнова — проведение эксперимента (постановка ПЦР в режиме реального времени), анализ полученных данных, подготовка черновика рукописи; С. Н. Андреевская — анализ литературы, интерпретация данных, обзор публикаций по теме статьи; В. В. Устинова — постановка ПЦР, Е. Е. Ларионова — анализ данных; Е. А. Киселева — подготовка модельных образцов, Л. Н. Черноусова, А. Эргешов — разработка дизайна исследования; все авторы участвовали в обсуждении результатов.

Статья получена: 21.06.2024 Статья принята к печати: 16.07.2024 Опубликовано online: 04.08.2024
|

Диагностика микобактериальной коинфекции — одна из актуальных проблем здравоохранения. Целью исследования было определить дискриминирующую способность метода мультиплексной ПЦР видовой идентификации при выявлении смешанных популяций микобактерий. Исследование выполнено на модельных образцах, представляющих собой смесь ДНК микобактерий двух видов в соотношении 1 : 1, 1 : 9, 1 : 99 и 1 : 999 с разной суммарной концентрацией ДНК (от 103 ГЭ/мл до 106 ГЭ/мл). Модельные образцы исследовали набором «Амплитуб-РВ-дифференциация» («Синтол»; Россия), основанном на мультиплексной ПЦР. Показано, что набор способен выявлять смеси видов микобактерий с высокой дискриминирующей способностью. Дискриминирующая способность метода ПЦР в режиме реального времени при анализе смеси ДНК двух видов микобактерий зависела от суммарного содержания ДНК в образце и варьировала от 0,1% для высоконагруженных образцов (суммарная концентрация ДНК × 106 ГЭ/мл) до 50% для низконагруженных образцов (суммарная концентрация ДНК × 103 ГЭ/мл) и соответствовала количеству ДНК вида в смеси не менее 5 × 102 ГЭ/мл. При количестве ДНК каждого вида в смеси не менее 5 × 102 ГЭ/мл результат ПЦР на выявление коинфекции не зависел от вида микобактерий, входящих в смесь, что необходимо учитывать при анализе результатов ПЦР.

Ключевые слова: туберкулез, микобактерии туберкулезного комплекса, нетуберкулезные микобактерии, микобактериальная коинфекция, мультиплексная ПЦР, микобактериоз

КОММЕНТАРИИ (0)