Оригинальное исследование Современный подход к диагностике патогенетических вариантов ишемического инсульта при атеросклерозе и артериальной гипертонии
П. Л. Ануфриев, М. М. Танашян, Т. С. Гулевская
Активное развитие в последние десятилетия методов ангио- и нейровизуализации определяет актуальность совершенствования этиопатогенетической классификации ишемического инсульта, используемой для выбора целенаправленной тактики лечения и вторичной профилактики этого заболевания. С целью уточнить возможности клинической диагностики патогенетических вариантов ишемического инсульта в 125 случаях выполнено посмертное макро- и микроскопическое исследование мозга и сердечно-сосудистой системы для верификации патогенеза инсульта, установленного в результате предшествующего обследования пациентов. Показаны широкие возможности диагностики ведущих патогенетических подтипов инсульта (атеросклероз крупной артерии, кардиоаортальная эмболия, окклюзия мелкой артерии) при использовании комплекса современных клинико-инструментальных методов и основных морфологических критериев этих подтипов, отмеченных в общепризнанной классификации TOAST. Вместе с тем, клиническое и патоморфологическое исследование позволило выделить в подтипе «атеросклероз крупной артерии» инсульты, обусловленные различными изменениями одной церебральной артерии — атеротромботической окклюзией (44% инсультов этого подтипа), артерио-артериальной эмболией (13%) и критическим атеростенозом (10%), а также инсульты, возникающие по механизму сосудистой мозговой недостаточности (33%). Таким образом, высокая информативность существующих методов исследования позволяет более дифференцированно подходить к установлению причины ишемического инсульта, что в полной мере отвечает персонализированной направленности современной медицины.
Статья получена: 24.11.2020
Опубликовано online: 25.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.081
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 4131
Оригинальное исследование Картографический атлас распространения 45 фармакогенетических маркеров в народонаселении России и сопредельных стран
Е. В. Балановская, В. С. Петрушенко, С. М. Кошель, Э. А. Почешхова, Д. К. Черневский, К. Б. Мирзаев, Ш. П. Абдуллаев, О. П. Балановский
Нехватка информации о распространенности в РФ фармакогенетических маркеров приводит к невозможности внедрения алгоритмов персонализации, разработанных для Западной Европы. Целью работы было систематическое изучение распространенности ряда значимых фармакогенетических маркеров по всей территории России. Из нескольких массивов популяционно-генетических данных отобраны 45 маркеров (ADME-генов; генов, кодирующих фармакодинамические мишени лекарственных средств; генов, кодирующих компоненты системы гемостаза), генотипированных суммарно для 2197 индивидов. Определены частоты этих маркеров в 50 популяциях, включающих информацию о 137 этнических и субэтнических группах. В результате создан фармакогенетический атлас — систематическое собрание геногеографических карт распространенности фармакогенетических ДНК маркеров по всей территории России и сопредельных стран. Атлас выявил три паттерна пространственной изменчивости. Паттерн клинальной изменчивости (градиентного изменения частот по оси «восток–запад») объединяет маркеры, следующие основной закономерности всего генофонда населения Северной Евразии (13% карт атласа). Паттерн равномерного распределения выделяет маркеры, средняя частота которых характерна для большинства регионов России (27% карт атласа). Паттерн «очаговой» изменчивости объединяет фармакогенетические маркеры, характерные только для определенной группы этносов и отсутствующие в других регионах (60% карт атласа). Атлас показывает, что средняя частота маркера и информация о его встречаемости в отдельных популяциях не могут служить указанием на тип его распределения в пространстве РФ — для выявления паттерна изменчивости необходима геногеографическая карта.
Статья получена: 06.11.2020
Опубликовано online: 19.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.080
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 5722
Оригинальное исследование Буккальная уретеропластика при рецидивных протяженных стриктурах и облитерациях дистального отдела мочеточника
А. А. Волков, Н. В. Будник, О. Н. Зубань, М. А. Абдулаев, Д. В. Плоткин, М. Н. Решетников
Выбор метода хирургического лечения тяжелых обструктивных заболеваний верхних мочевых путей является сложной проблемой и на современном этапе развития урологии. Целью исследования было изучить результаты применения буккального графта (БГ) при протяженных рецидивных стриктурах и облитерациях дистального отдела мочеточника. Прооперировано семь пациенток с данными заболеваниями: у шести пациенток была выполнена полная заместительная уретеропластика БГ, у одной — заместительная onlay уретеропластика. Лапароскопическим доступом оперировали в одном случае, в остальных использовали открытый. Протяженность замещенного дефекта мочеточника составила 5–8 см. Лоскут дополнительно васкуляризировали подвздошной мышцей в пяти случаях, в одном — тканью сальника, и у одной пациентки использовали подвзошную мышцу и сальник. Тяжелые осложнения по классификации Clavien–Dindo, а также летальные исходы отсутствовали. Период наблюдения за пациентами составил 4–18 месяцев, рецидива заболевания у оперированных на сегодняшний день нет. Контрольные исследования показали полную проходимость неоуретера и хорошую васкуляризацию БГ. Таким образом, данный способ может служить одной из дополнительных методик при невозможности восстановления дистального отдела мочеточника с использованием тканей собственных мочевых путей или сегментов желудочно-кишечного тракта.
Статья получена: 25.10.2020
Опубликовано online: 17.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.079
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2851
Оригинальное исследование Избирательное изменение экспрессии α-субъединиц интегринов в клетках кишечного эпителия Caco-2 при гипоксии в условиях микроциркуляции
Д. В. Мальцева, А. А. Полозников, В. Г. Артюшенко
Кишечный эпителий постоянно находится в условиях физиологической гипоксии. Дополнительная тканевая гипоксия способна приводить к нарушению его функций и является признаком активного воспалительного процесса. В исследованиях in vitro значительную роль играют условия культивирования, поскольку в свою очередь могут влиять на свойства клеток. Целью работы было провести оценку экспрессии интегриновых рецепторов в клетках аденокарциномы толстого кишечника человека Caco-2 при моделировании условий гипоксии хлоридом кобальта (II) и микроциркуляции. С помощью транскриптомного анализа обнаружено значимое увеличение экспрессии генов α2- и α5-субъединиц интегриновых рецепторов ITGA2 и ITGA5 в условиях гипоксии и уменьшение ITGA5 при инкубировании в микрофлюидном чипе. Экспрессия β-субъединиц при этом не изменилась. При анализе микроРНК-транскриптомов выявлено уменьшение экспрессии микроРНК hsa-miR-766-3p и hsa-miR-23b-5p. В число валидированных мишеней обеих микроРНК входит мРНК гена ITGA5. Показано, что микроциркуляция позволяет создать для энтероцитов кишечника условия культивирования, более близкие к физиологическим. Представлено обсуждение возможного биологического значения выявленных изменений экспрессии профиля интегринов и роли микроциркуляции.
Статья получена: 09.11.2020
Опубликовано online: 17.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.078
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2844
Оригинальное исследование Методика ускоренного получения модельных кишечных барьеров in vitro
С. В. Никулин, А. А. Полозников, Д. А. Сахаров
Для повышения эффективности разработки лекарственных препаратов необходимо увеличивать производительность экспериментов, проводимых на доклинической стадии. Существенным недостатком используемых на сегодняшний день in vitro моделей кишечного барьера является скорость образования функционального монослоя энтероцитов со сформировавшимися плотными контактами. Целью работы было провести комплексный подбор параметров (различные покрытия и плотность клеток) для быстрого и эффективного получения пригодного к проведению экспериментов монослоя клеток Caco-2. Для оценки состояния культуры клеток при различных условиях применяли прижизненную микроскопию и импедансную спектроскопию. Для определения возможного биологического механизма действия различных белковых субстратов на энтероциты использовали транскриптомный анализ. Показано, что покрытие субстрата для роста клеток коллагеном IV существенно повышает скорость пролиферации и миграции клеток линии Caco-2. Такое воздействие позволяет в течение 24 ч сформировать функциональный монослой эпителиальных клеток с плотными контактами. С целью получения пригодного для проведения экспериментов кишечного барьера in vitro в течение 24 ч начальная плотность клеток должна лежать в диапазоне 90–200 тыс. клеток на 1 см2. Обнаружено, что клетки Caco-2 слабо экспрессируют коллаген IV, при этом рецепторы к коллагену IV у данных клеток экспрессированы на достаточно высоком уровне. Показано также, что еще один компонент базальной мембраны ламинин 332 не оказывает заметного влияния на скорость формирования функционального монослоя эпителиальных клеток. Таким образом, в работе были определены оптимальные параметры, позволяющие существенно повысить производительность экспериментов с in vitro моделями кишки.
Статья получена: 09.11.2020
Опубликовано online: 15.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.077
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2659
Оригинальное исследование Структура и нейрометаболический потенциал микробиоты кишечника у здоровых детей разного возраста
А. С. Ковтун, О. В. Аверина, Е. У. Полуэктова, Г. П. Костюк, В. Н. Даниленко
В последние годы большое внимание уделяется изучению влияния кишечной микробиоты на здоровье детей, в том числе психическое. Целью данной работы было определить изменения в таксономическом составе и содержании бактериальных генов, кодирующих ферменты, участвующие в метаболизме нейроактивных соединений, в метагеноме микробиоты кишечника детей младшего и подросткового возраста. Данные для анализа были получены при помощи секвенирования полного метагенома. Для определения изменения представленности бактериальных генов и метагеномных сигнатур использовали разработанный биоинформатический алгоритм и каталог гомологов генов. В результате построена коровая нейрометаболическая сигнатура кишечной микробиоты здоровых детей младшего возраста, включающая в себя виды Bacteroides uniformis, Faecalibacterium prausnitzii и Lachnospiraceae bacterium и гены, участвующие в образовании уксусной, пропионовой и масляной кислот, глутамата и ферментов с антиоксидантной активностью. Сравнение метагеномов детей разных возрастных групп показало статистически значимое (P-value < 0,1) изменение представленности для 3 родов бактерий и 18 видов. Альфа-разнообразие микробиоты подростков выше как на родовом, так и на видовом уровнях. Кроме того, в микробиоте подростков повышена (P-value < 0,1) представленность генов, кодирующих ферменты, участвующие в образовании короткоцепочечных жирных кислот, глутамата, триптофана и ферментов с антиоксидантной активностью и деградации гистидина, конъюгации линолевой кислоты. Полученные результаты подтверждают имеющиеся данные об увеличении биоразнообразия и развитии функциональных свойств кишечного микробного сообщества со взрослением человека.
Статья получена: 13.11.2020
Опубликовано online: 11.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.076
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 3033
Оригинальное исследование Паттерны атрофии головного мозга при лобно-височной деменции: данные воксель-ориентированной морфометрии
Д. Р. Ахмадуллина, Р. Н. Коновалов, Ю. А. Шпилюкова, Д. А. Гришина, Е. С. Бердникович, С. С. Фоменко, Е. Ю. Федотова, С. Н. Иллариошкин
Лобно-височная деменция (ЛВД) — нейродегенеративное заболевание, вторая по частоте деменция с ранним началом, проявляющаяся речевыми и поведенческими нарушениями. Выявление паттернов атрофии важно для диагностики данной патологии. Однако визуальная оценка данных магнитно- резонансной томографии может быть недостаточно чувствительной, что требует использования объективного метода определения объема серого вещества (СВ). Целью исследования было оценить паттерн атрофии СВ у пациентов с ЛВД в сравнении с контрольной группой при помощи воксель- ориентированной морфометрии (ВОМ). В исследование включены 16 пациентов с ЛВД (12 — с аграмматическим вариантом первичной прогрессирующей афазии (авППА), три — с поведенческим вариантом ЛВД, один — с логопеническим вариантом ППА) и 10 здоровых добровольцев. При проведении ВОМ в группе ЛВД и контрольной группе выявлено три статистически значимые (pFWE-corr < 0,05) зоны атрофии — в левой нижней лобной извилине, левой фузиформной и левой надкраевой извилинах. В связи с преобладанием в группе ЛВД пациентов с авППА дополнительно проводили ВОМ в этой группе и группе контроля, при которой был выявлен иной паттерн атрофии: уменьшение объема СВ обнаружено в левой нижней лобной и левой средней лобной извилинах (pFWE-corr < 0,05). Полученные результаты показывают, что для ЛВД независимо от клинического варианта характерен свой определенный паттетрн атрофии, захватывающий как лобно-височные отделы, так и теменную долю. На примере авППА было показано, что у каждого из вариантов заболевания локализация атрофического процесса имеет отличный от других характер.
Статья получена: 21.10.2020
Опубликовано online: 08.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.075
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2994
Оригинальное исследование Взаимосвязь изменения экспрессии микроРНК и мРНК в клетках линии нт-29 в условиях гипоксии
С. А. Нерсисян, А. В. Галатенко, Д. В. Мальцева, Ю. А. Ушкарев, А. Г. Тоневицкий
Гипоксия возникает в различных патофизиологических процессах, включая прогрессирование опухолевых заболеваний и метастазирование. Один из механизмов молекулярного ответа клеток на гипоксию состоит в рекрутировании специфичных микроРНК, регулирующих экспрессию своих генов-мишеней. Целью работы было оценить изменения экспрессии микроРНК и их генов-мишеней в клеточной линии колоректальной аденокарциномы человека HT-29 в ответ на гипоксию с помощью интегрированного секвенирования микроРНК и мРНК. Для моделирования условий гипоксии клетки обрабатывали хлоридом кобальта (II). Было обнаружено достоверное изменение экспрессии 16 человеческих микроРНК, шесть из них (hsa-miR- 18a-5p, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-27a-5p, hsa-miR-182-5p, hsa-miR- 215-5p, hsa-miR-425-5p) имели статистически значимую долю генов-мишеней с противоположным направлением изменения экспрессии. На основании биоинформатического анализа взаимодействий дифференциально экспрессированных факторов транскрипции и микроРНК была построена возможная регуляторная сеть, основыми узлами которой оказались HIF-1α, p65, с-Myc и Egr1 (кодируемые генами HIF1A, RELA, MYC и EGR1).
Статья получена: 26.10.2020
Опубликовано online: 07.12.2020
DOI: 10.24075/vrgmu.2020.074
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 2845