Изучение индуцированных плюрипотентных стволовых клеток человека (иПСК) и создание технологий их практического использования — одно из самых наукоемких направлений современных биомедицинских исследований. Несмотря на потенциал применения иПСК в персонализированной медицине и в создании клеточных моделей заболеваний различной этиологии, использование иПСК остается крайне сложным. Так, межклеточная гетерогенность иПСК при отсутствии эффективных способов определения идентичности и оценки существенно затрудняет воспроизводимость подобных исследований. Целью работы было создать линию иПСК, несущую ген транскрипционного фактора ATOH1 под контролем системы индукции экспрессии Tet-One, ген флуоресцентного белка TagBFP и ген устойчивости к пуромицину для селекции клеток. В работе использовали методы молекулярного клонирования, лентивирусную трансдукцию, культивирование клеток, иммунофлуоресцентное окрашивание и флуоресцентную микроскопию. Созданная клеточная модель позволит анализировать состояние единичных клеток и, следовательно, имеет большой практический потенциал как для лабораторных, так и для медицинских исследований.
ПРОСМОТРЫ 1161
Изучению циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК) в последнее время уделяют большое внимание, благодаря их ведущей роли в формировании отдаленных метастазов. В то же время мало данных о свойствах циркулирующих клеток с одновременной экспрессией лейкоцитарных и эпителиальных маркеров и их возможной роли в опухолевой прогрессии и резистентности к химиотерапии. Целью исследования было изучить субпопуляции клеток с гибридным эпителиально-лейкоцитарным фенотипом, а также оценить признаки стволовости, эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП) и интегриновый интерфейс, обусловливающие их возможные метастатические свойства при раке молочной железы (РМЖ). В работу включены данные исследования 128 больных инвазивной карциномой неспецифического типа молочной железы. Для оценки популяционного состава и метастатического потенциала циркулирующих в крови клеток и клеток первичной опухоли с гибридным фенотипом использовали метод многоцветной проточной цитометрии. Суспензию клеток первичной опухоли готовили методом механической дезагрегации. В популяции клеток с гибридным фенотипом отмечена высокая степень гетерогенности, включая комбинацию признаков стволовости, ЭМП и разнообразный интегриновый интерфейс. Клетки с гибридным фенотипом принимают участие в механизмах лимфогенного и гематогенного метастазирования. При лимфогенном метастазировании метастатический потенциал этих клеток ассоциирован с признаками стволовости (р = 0,0422) и коэкспрессией β3-, β4- и αVβ5-интегринов (р = 0,0338). При гематогенном метастазировании метастатический потенциал гибридных клеток ассоциирован с признаками стволовости (р = 0,015) и не связан с признаками ЭМП и экспрессией интегринов.
ПРОСМОТРЫ 1154
Изучение механизма прорезывания зубов является важным и перспективным направлением ввиду увеличения частоты случаев возникновения болезней, связанных с нарушением или затрудненным прорезыванием, которые могут приводить к гнойно-септическим осложнениям. Целью исследования было изучить вариабельность и структурные особенности минерального компонента и органического матрикса в твердых тканях нижних третьих моляров, находящихся на разных стадиях прорезывания. У участников исследования (n = 67; женщины, возраст от 14 до 36 лет) проводили микроскопическое и биохимическое исследование эмали, дентина и эмалево-дентинного соединения нижних третьих моляров методами растровой электронной микроскопии и ИК-Фурье-спектроскопии. Продемонстрирована связь стадии прорезывания со структурными особенностями твердых тканей: уровнем минерализации и размерами дентинных канальцев, ориентацией и размерами эмалевых призм. Содержание воды в твердых тканях нижних третьих моляров значимо различается, что характеризуют обменные процессы и скорость созревания (p < 0,05). По данным ИК-спектроскопии интенсивность полос поглощения коллагена с возрастом в эмали увеличивается, а в дентине уменьшается (1202, 1249 и 1342 см–1), при этом сочетание снижения интенсивности полосы 1202 см–1 с увеличением полосы 1342 см–1 у эмалево-дентинного соединения подтверждает его важную роль связующего звена между эмалью и дентином за счет обменной, амортизирующей, защитной, питательной функций. Полученные данные указывают на значительные изменения упаковки и ориентации коллагеновых фибрилл и волокон в твердых тканях, что влияет на первичную пространственную ориентацию и топографическое расположение зубов в нижней челюсти.
ПРОСМОТРЫ 1366
В возникновении и развитии обострений рассеянного склероза (РС) участвуют персистирующие инфекции: вирусы Эпштейна–Барр, герпеса 6-го типа, простого герпеса 1-го и 2-го типов, варицелла-зостер-вирус. Выработка цитокинов имеет ключевое значение в ограничении распространения герпетической инфекции в организме человека, а дисбаланс их продукции является фактором прогрессирования РС. Целью исследования было определить уровень цитокинов в сыворотке крови у пациентов РС, оценить их клиническое значение и взаимосвязь с реактивацией герпетической инфекции. Обследовано 36 пациентов (12 мужчин и 24 женщины), с достоверным РС (критерии McDonald) и ремитирующим течением. У 18 человек выявлена реактивация периферической герпес-вирусной инфекции. Сывороточный уровень 15 цитокинов: IL1β, IL4, IL6, ФНО-а, ИНФ-γ, IL10, IL17А, IL17F, IL21, IL22, IL23, IL25, IL31, IL33, sCD40L исследовали с помощью мультиплексной технологии хMАР. При РС, в сравнении с контролем, выявлено увеличение IL10, IL33 (p < 0,001). Наиболее часто выявляли высокие значения IL33 — у 20 (52,8%) пациентов. При обострении заболевания средний уровень IL10 был выше (p < 0,01), достоверно чаще встречались высокие значения IL31 (соответственно 42,8 и 6,9%; p = 0,04) и превалировало сочетанное повышение IL33 с другими цитокинами (IL17А, IL17F, IL21, IL31) (соответственно в 57,1 и 6,9% случаев; p = 0,008). При реактивации герпес-вирусной инфекции уровень IL1β, IL23 и IL33 был выше, чем без нее (p < 0,05 и p < 0,01 соответственно). Высокие значения IL33 значимо чаще регистрировали в этой группе пациентов (77,7 и 33,3%; p = 0,008). Обсуждается участие IL10, IL31, IL33 и других цитокинов в патогенезе ассоциированного с вирусами герпеса РС.
ПРОСМОТРЫ 1119
В настоящее время в мире идет активная работа по оптимизации применения подходов к определению хромосомной патологии эмбрионов. Целью исследования было оценить возможность использования неинвазивного преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидии (ниПГТ-А) путем анализа внеклеточной ДНК в отработанной культуральной среде (ОКС). Проведено ниПГТ-А анеуплоидных эмбрионов путем анализа внеклеточной ДНК в ОКС. Все бластоцисты были анеуплоидными по результатам предшествующего преимплантационного генетического тестирования на анеуплоидии (ПГТ-А) с биопсией трофэктодермы (ТФЭ). В исследование было включено 11 эмбрионов от семи супружеских пар. Все эмбрионы размораживали и культивировали в каплях по 10 мкл в течение 9 ч. Весь объем ОКС собирали и анализировали путем ниПГТ-А. Полученные результаты сравнивали на соответствие с предшествующими данными по ПГТ-А. Суммарно выполнили анализ 12 образцов ОКС: 11 образцов, в которых были культивированы эмбрионы, и один контрольный образец. В одном случае (9,1%) из 11 были получены хаотичные результаты по данным ниПГТ-А, не позволяющие провести диагностику состояния кариотипа. Полное соответствие результатов ПГТ-А и ниПГТ-А получено в семи случаях из 10 (70%), клиническое соответствие результатов — в девяти случаях из 10 (90%). В одном случае (10%) по данным ниПГТ-А кариотип бластоцисты был диагностирован как эуплоидный. Вывод: ниПГТ-А может быть перспективным, не требующим биопсии, методом диагностики хромосомного статуса преимплантационных эмбрионов.
ПРОСМОТРЫ 1051
У 85% больных во всем мире сразу или в течение трех лет рак желудка (РЖ) переходит в метастатическую форму. Печень является органом метастазирования РЖ с частотой 30–50%, включая как синхронные, так и метахронные метастазы. При наличии мультифокальных метастазов печени прогноз для пациентов весьма неблагоприятен: медиана выживаемости составляет около 10–15 месяцев, а трехлетняя выживаемость — менее 10%, и паллиативным вариантом лечения в таких случаях является системная химиотерапия. Внедрение относительно молодого локального метода воздействия на метастатические очаги — трансартериальной химиоэмболизации (ТАХЭ) в комбинации с иммунотерапией открыло новые возможности лечения метастазов в печень. Представлен клинический случай использования методики ТАХЭ в комбинации с иммунотерапией, а также химиотерапией у пациента при нерезектабельном метастатическом поражении печени HER2+ аденокарциномой желудка с продолжительностью жизни 42 месяца с момента установления диагноза.
ПРОСМОТРЫ 853
Болезнь Паркинсона (БП) — хроническое нейродегенеративное заболевание с характерными неврологическими расстройствами у пациентов, поражающее преимущественно дофаминергические нейроны черной субстанции с накоплением в телах нейронов нейротоксичных доз агрегатов белка α-синуклеина. В статье представлен взгляд авторов на отдельные патохимические и биохимические аспекты развития болезни Паркинсона во взаимосвязи путей обмена катехоламинов и пигментов, в частности возможного пути синтеза нейромеланина в телах нейронов и его значение в жизни клетки. Дана оценка определенным, имеющим прямое патогномоничное значение, биомаркерам нейродегенеративной патологии в лабораторной диагностике этого заболевания. Предложено использовать полученные результаты в сфере глубокого понимания биохимических процессов, лежащих в основе нейрональной смерти, для ранней диагностики БП в разных возрастных группах и дальнейшего изучения патогенеза  на основе фундаментальной биохимии и патобиохимии процессов, протекающих в клетке.
ПРОСМОТРЫ 919
Дальневосточный федеральный округ (ДФО) России подвержен частым лесным пожарам. Целью работы было выявить связь между онкологическими заболеваниями и лесными пожарами на территории ДФО; оценить временные лаги указанных связей; выявить возрастные группы, статистически наиболее чувствительные к воздействию пожаров. Число пожаров (ЧП) за год на территории административных единиц (АЕ), приведенное к максимальному значению для всех АЕ за период наблюдения 1992–2019 гг., использовали в качестве показателя лесных пожаров. Показатели заболеваемости пятью видами рака (ЗР)  за год среди детей в возрасте до 14 лет и населения в целом нормировали аналогично ЧП и сопоставляли с нормированными показателями ЧП. Все комбинации из семи АЕ ДФО исследовали на наличие статистических связей между нормированными показателями ЧП и ЗР. Модели ARIMA использовали для анализа временных рядов ЧП и ЗР за период 1992–2019 гг. Линейный статистический анализ применяли для более коротких временных рядов ЧП и ЗР (10–12 лет) на территории центральной АЕ ДФО для детей в возрасте до 4 лет. При  этом кроме перечисленных пяти видов детского рака для категории «дети младшего возраста (0–4 лет)» были рассмотрены три дополнительных вида рака, а также пять доброкачественных новообразований. Анализ с применением модели ARIMA позволил выявить 27 связей между ЧП и ЗР с лагом от 0 до 3 лет в двух возрастных группах для пяти видов рака (0,002 < p < 0,1). Линейный статистический анализ в группе «дети младшего возраста (0–4 года)» показал корреляции для трех из пяти видов рака, для двух из трех видов эмбрионального рака и трех из пяти видов доброкачественных опухолей (0,002 < p < 0,046). Выводы: колебания заболеваемости опухолями гемопоэтических, лимфоидных тканей, сосудистыми опухолями, опухолями мягких тканей и ЦНС среди детей младшего возраста (0–4 года), детей/подростков в возрасте 0–14 лет и населения ДФО в целом отчасти связаны  с лесными пожарами. Население ДФО в целом и дети в возрасте до 4 лет на территории центральной АЕ ДФО наиболее чувствительны к воздействию лесных пожаров. Связь «число пожаров – заболеваемость раком», как правило, имеет временной лаг от 0 до 3 лет.
ПРОСМОТРЫ 1061