МЕТОД
Многопараметрическая детекция бактериального обсеменения с помощью анализа изменений распространения поверхностных волн в фотонных кристаллах
1 Лаборатория нано-биоинженерии,Национальный исследовательский ядерный университет «МИФИ» (Московский инженерно-физический институт), Москва
2 Лаборатория спектроскопии конденсированных сред, Институт спектроскопии РАН, Троицк
Для корреспонденции: Игорь Руфаилович Набиев
Каширское шоссе, д. 31, г. Москва, 115529; moc.liamg@veiban.rogi
Финансирование: исследование поддержано Министерством здравоохранения Российской Федерации, в рамках Федеральной целевой программы "Национальная система химической и биологической безопасности Российской Федерации (2015–2020 годы), государственный контракт № К-27- НИР/144-5 от 24.12.2015 г.
Благодарности: авторы благодарны заведующему лабораторией трансляционной биомедицины ФГБУ «НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи» Минздрава России А. П. Ткачуку за предоставление кроличьих антител против термолабильного токсина LT.
Традиционные методы оценки качества продуктов питания, воды и других сред имеют ряд недостатков. Предлагается безметочный высокоточный аналитический метод многопараметрической детекции биомаркеров, основанный на анализе изменений параметров распространения поверхностных волн на поверхности фотонного кристалла (ПВФК). Метод позволяет проводить измерения молекулярных и клеточных аффинных взаимодействий в реальном времени путем независимой регистрации величин угла полного внутреннего отражения и угла возбуждения поверхностной волны на поверхности фотонного кристалла. На основании метода анализа ПВФК разработан протокол детекции экзотоксина A Pseudomonas aeruginosa и термолабильного токсина LT Escherichia coli. Протокол основан на детекции в реальном времени аффинного взаимодействия между антигенами, раствор которых прокачивается через микрофлюидную ячейку, и специфическими распознающими антителами, конъюгированными с химически активированной кремниевой подложкой каналов поверхности ФК. Показано, что метод ПВФК отличается более высокой чувствительностью, а также уменьшенным временем проведения анализа и сниженной материалозатратностью, по сравнению с методом поверхностного плазмонного резонанса.
Ключевые слова: фотонные кристаллы, поверхностные волны, бактериальные токсины, детекция в реальном времени