Рис. 1. Варианты универсальных CAR. А. Модульная CAR-система с использованием биотин-связывающих иммунорецепторов. Б. Модульная CAR-система с использованием флуоресцеина изотиоцианата. В. Модульные CAR-системы с использованием неоэпитопа (5b9, PNE). Г. Модульная CAR-система с использованием мотива лейциновой молнии (SUPRA CAR)

Рис. 2. Схематичная иллюстрация модуляции противоопухолевой активности CAR-Т-клеток в условиях иммуносупрессивного микроокружения. А. Подавление экспрессии гена pdcd-1 в Т-лимфоцитах с помощью трансфекции siRNA. Взаимодействие рецептора PD-1 со своими лигандами PD-L1/2 ингибирует активирующий сигнал CAR. После трансфекции клеток дуплексы siRNA взаимодействуют с RISC-связывающим комплексом (РНК-индуцируемый комплекс выключения гена, RNA-induced silencing complex, RISC), одна из нитей РНК удаляется из комплекса, а вторая в составе RISC связывается с мРНК, инициируя ее деградацию. В результате экспрессия рецептора PD-1 на поверхности клетки снижается. Б. Нокаут гена pdcd-1 с использованием метода геномного редактирования CRISPR/Cas9. В. TRUCKs: помимо CAR, в Т-клетки вводят плазмиду, содержащую последовательности элементов отклика NFAT (NFAR-RE, NFAT responsive element) и последовательности генов IL12, IL15 или IL18. При взаимодействии CAR с таргетным антигеном Т-лимфоцит активируется. Это приводит к дефосфорилированию транскрипционного фактора NFAT, который перемещается в ядро и, связываясь с NFAR-RE, запускает синтез кодируемого цитокина. Локальная секреция цитокина инициирует иммунный ответ против опухолевых клеток, «невидимых» для CAR-Т-лимфоцитов