ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Получение рекомбинантного штамма Herpesvirus saimiri путем совместной культивации трансфицированной и пермиссивной клеточных культур

Информация об авторах

1 Московский физико-технический институт, Долгопрудный, Россия

2 Институт биоорганической химии имени академиков М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, Москва

Для корреспонденции: Степан Петрович Чумаков
ул. Миклухо-Маклая, 16/10, г. Москва, 117997; moc.liamg@lukhtah

Информация о статье

Финансирование: работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ (уникальный код проекта RFMEFI60418X0205).

Благодарности: авторы признательны Центру высокоточного редактирования и генетических технологий для биомедицины (Москва) за помощь в методах исследования.

Вклад авторов в работу: А. Хамад — работа с клеточными культурами, молекулярное клонирование; С. П. Чумаков — планирование исследования, работа с вирусными препаратами, трансфекция, титрование, анализ данных и подготовка рукописи.

Статья получена: 11.11.2019 Статья принята к печати: 25.11.2019 Опубликовано online: 12.12.2019
|
Рис. 1. Схематичная организация участка генома HVS в области гена vCD59 после интеграции экспрессионной кассеты. «vCD59 flank 1» и «vCD59 flank 2» — области генома, использованные в качестве учасктов гомологии для рекомбинации
Рис. 2. Популяция вируспермиссивных клеток линии ОМК, трансдуцированных экспрессионной кассетой SFFV-PURO-OFP
Рис. 3. А. Динамика изменения численности флуоресцентных популяций после инфицирования HVS-OFP. Б. Флуоресцентная бляшка, образованная при инфицировании рекомбинантным HVS-OFP культуры клеток ОМК. В, Г. PBMC (В) и A549 (Г), трансдуцированные HVS-OFP. Д, Е. Совместная культивация трансфицированных рекомбинантной кассетой и экспрессорами гликопротеинов вакцинного штамма кори HEK-293T и инфицированных HVS OMK в низкой (Д) и высокой (Е) плотностях
Таблица 1. Последовательности праймеров, использовавшиеся для сборки экспрессионной кассеты
Таблица 2. Количества клеток и их соотношения, использованные при совместной культивации, и инфекционный вирусный титр, зафиксированный в супернатантах
Таблица 3. Условия трансдукции пермиссивных клеток линии ОМК экспрессионной кассетой для рекомбинации HVS и достигнутые значения эффективности