ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Нокаут мутантного ТР53 в клетках линии HaCaT усиливает их миграционную активность

Информация об авторах

Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В. Н. Ореховича, Москва, Россия

Для корреспонденции: Александр Леонидович Русанов
ул. Погодинская, д. 10, стр. 8, г. Москва, 119121, Россия; moc.liamg@vonasur.l.rednaxela

Информация о статье

Финансирование: работа выполнена в рамках Программы фундаментальных научных исследований в Российской Федерации на долгосрочный период (2021 - 2030 годы) № 122022800481-0.

Вклад авторов: Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов ― концепция исследования; Д. Д. Ромашин, П. М. Кожин, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов ― дизайн исследования и анализ литературы; Д. Д. Ромашин, П. М. Кожин ― планирование и проведение исследования; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов ― анализ и интерпретация полученных данных; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин ― подготовка текста статьи; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов ― редактирование рукописи.

Соблюдение этических стандартов: исследование проведено в соответствии с принципами Хельсинкской декларации Всемирной Медицинской ассоциации и всех ее пересмотров.

Статья получена: 12.12.2022 Статья принята к печати: 24.12.2022 Опубликовано online: 30.12.2022
|
Рис. 1. Пролиферативная активность клеток HaCaT. А. Распределение клеток HaCaT дикого типа (WT) и HaCaT с нокаутом mutTP53 (dp53) по фазам клеточного цикла. Б. Пролиферативная активность клеток HaCaT дикого типа (WT) и HaCaT с нокаутом mutTP53 (dp53)
Рис. 2. Scratch-test. Скорость заполнения дефекта монослоя разными типами клеток: нормальные кератиноциты (NHK), клетки HaCaT дикого типа (WT) и HaCaT с нокаутом mutTP53 (dp53). A. Световая микроскопия; ув. ×40; 0-й день (сразу после нанесения) и 3 дня после нанесения дефекта. Б. Обобщенная диаграмма относительной площади дефекта на 1-й, 2-й, 3-й день после нанесения дефекта. В. Относительная экспрессия генов LAMB3, LAMC2. * — значимые различия по сравнению с HaCaT дикого типа (p < 0,05); # — значимые различия по сравнению с NHK в соответствующий день (p < 0,05)
Рис. 3. Формирование многослойного кожного эквивалента кератиноцитами разных линий: нормальные кератиноциты (NHK), клетки HaCaT дикого типа (WT) и HaCaT с нокаутом гена mutTP53 (dp53). А. Иммунофлуоресцентная микроскопия. Окраска: ядра (DAPI) — синий, KRT5 — красный; ув ×400. Б. Значения трансэпителиального сопротивления (TEER). * — значимые различия по сравнению с WT в соответствующий день (p < 0,005)
Таблица 1. Использованные праймеры