Авторские права: © 2024 принадлежат авторам. Лицензиат: РНИМУ им. Н.И. Пирогова.
Статья размещена в открытом доступе и распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution (CC BY).

ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Выявление микроглии и макрофагов с использованием антител к различным последовательностям белка Iba-1

В. А. Разенкова, О. В. Кирик, В. С. Павлова, Д. Э. Коржевский
Информация об авторах

Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия

Для корреспонденции: Валерия Алексеевна Разенкова
ул. Акад. Павлова, д. 12, г. Санкт-Петербург, 197376, Россия; ur.xednay@zar.ayirelav

Информация о статье

Финансирование: исследование выполнено при финансовой поддержке Российского Научного Фонда, проект № 24-15-00032, https://rscf.ru/project/24-15-00032/

Вклад авторов: В. А. Разенкова — анализ литературы, интерпретация результатов, подготовка рукописи; О. В. Кирик — анализ результатов, редактирование текста, работа с иллюстрациями; В. С. Павлова — гистологическая проводка биологического материала, постановка иммуногистохимических реакций; Д. Э. Коржевский — концепция, планирование исследования, редактирование текста.

Соблюдение этических стандартов: исследование одобрено этическим комитетом ФГБНУ «ИЭМ» (протокол № 2/24 от 25 апреля 2024 г.), проведено в полном соответствии с положениями Хельсинкской декларации (2013 г.).

Статья получена: 17.05.2024 Статья принята к печати: 05.06.2024 Опубликовано online: 29.06.2024
|

Белок Iba-1 традиционно считают высокоселективным маркером микроглии благодаря специфической экспрессии гена именно в этой популяции клеток ЦНС. В результате альтернативного сплайсинга формируется несколько изоформ белка Iba-1, что может служить причиной расхождений результатов иммуногистохомических реакций в зависимости от того, к каким эпитопам иммуногена выработаны выбранные для исследования антитела. В связи с этим, а также с необходимостью определения надежных вариантов антител к Iba-1, доступных для исследователей в Российской Федерации, целью работы было оценить результаты выявления микроглии и макрофагов с использованием антител к различным последовательностям белка, выпускаемых разными производителями. Материалом для исследования служили образцы головного мозга и семенника половозрелых (3–5 месяцев) крыс-самцов Wistar (n = 8). В качестве первичных реагентов использовали поликлональные и моноклональные (клон JM36-62) антитела к Iba-1. Установлено, что моноклональные антитела клона JM36-62 позволяют добиться более высокой селективности выявления антигена при лучшем соотношении сигнал/фон и пригодны для замены реагентов, не доступных в настоящее время к приобретению. Использование поликлональных антител привело не только к иммуноспецифичной визуализации микроглии и макрофагов, но и к выявлению клеток эпителио-сперматогенного слоя семенника. Предполагается, что в клетках эпителио-сперматогенного слоя присутствует изоформа Iba-1, лишенная эпитопа, соответствующего последовательности иммуногенного для антител клона JM36-62 фрагмента нативного белка. Функциональное значение различных изоформ Iba-1 на настоящий момент остается неясным и требует дальнейших исследований.

Ключевые слова: иммуногистохимия, микроглия, макрофаги, Iba-1, AIF-1

КОММЕНТАРИИ (0)