Оригинальное исследование Комплексное антибактериальное действие ферментов на биопленки Staphylococcus aureus
А. А. Загоскин, Р. А. Авакова, Л. Ф. Резвых, М. В. Захарова, Э. К. Мубаракшина, Р. А. Иванов, М. О. Нагорных
Широкое использование антибиотиков в медицине и сельском хозяйстве значительно ускорило темпы возникновения бактерий со множественной устойчивостью к антибиотикам. Поскольку к традиционным антибиотикам довольно быстро возникает резистентность, одним из перспективных направлений является разработка альтернативных антимикробных препаратов, обладающих иными механизмами действия на бактерии. Ферменты c бактерицидным действием могут быть одним из вариантов таких антибактериальных средств. Целью работы было получить комбинированные препараты рекомбинантных белков, активных в отношении бактерий и их биопленок. С помощью подходов генной инженерии были получены растворимые формы пяти рекомбинантных белков. Два из них обладают бактериолитическим эффектом (эндолизины LysK и PM9 из бактериофагов Staphylococcus aureus), остальные способны разрушать внеклеточный ДНК-матрикс у биопленок (две неспецифические нуклеазы NucA, а также ДНК-специфичная дезоксирибонуклеаза I). Показано, что природный эндолизин PM9 с усеченным каталитическим доменом обладает меньшей в 4 раза бактериолитической эффективностью по сравнению с полноразмерным вариантом LysK. С помощью сравнительного анализа выявлена в 1,5–2 раза большая эффективность неспецифических нуклеаз для разрушения бактериальных биопленок по сравнению с ДНК-специфичной дезоксирибонуклеазой I. Продемонстрировано, что одновременное использование эндолизинов и нуклеаз оказывает синергичное антибактериальное действие и разрушает биопленки патогенной бактерии Staphylococcus aureus. Полученные результаты показывают перспективность разработки антибактериальных препаратов на основе рекомбинантных белков.
Статья получена: 25.11.2024
Опубликовано online: 23.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.064
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1732
Оригинальное исследование Динамика маркеров воспаления на начальных стадиях хронической болезни почек при сахарном диабете 1-го типа
М. В. Осиков, Л. А. Эфрос, Л. Ю. Журавлева, А. А. Федосов
Сахарный диабет (СД) — один из основных факторов, способствующих развитию и усугублению хронической болезни почек (ХБП). Точные и удобные маркеры для раннего выявления, оценки прогрессирования и надлежащего контроля терапии ХБП у лиц с СД ограничены показателями скорости клубочковой фильтрации (СКФ) и альбуминурией. В связи с ролью хронического воспаления в патогенезе СД и ХБП целью работы было изучить показатели воспалительного процесса и их взаимосвязь с СКФ у больных СД 1-го типа (СД1) при ранних стадиях ХБП. В исследовании участвовали здоровые люди (n = 14), больные СД1 без признаков ХБП (n = 30), а также больные СД1 с 1-й стадией ХБП (n = 60), 2-й стадией ХБП (n = 38) и 3-й стадией ХБП (n = 31). СКФ рассчитывали по формуле СКD-ЕРI (рСКФ), в сыворотке иммуноферментным методом определяли концентрацию IL1β и TNFα, С-реактивного белка (С-РБ), а также концентрацию церулоплазмина (ЦП), рассчитывали индекс нейтрофилы/лимфоциты, лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ). Установлено, что в сыворотке повышается концентрация IL1β, TNFα, С-РБ и ЦП, увеличивается ЛИИ, индекс нейтрофилы/ лимфоциты. Выраженность воспалительного процесса и острофазового ответа прогрессирует и максимальна при 3б стадии ХБП, когда концентрация в сыворотке IL1β увеличивается в 2,4 раза (р = 0,042), TNFα — на 34% (р = 0,005), С-РБ — в 33 раза (р < 0,000), ЦП — на 73% (р = 0,008), ЛИИ — в 8,4 раза (р < 0,000), индекс нейтрофилы/лимфоциты — в 5 раз (р = 0,013). Интегральный показатель функции почек рСКФ снижается по мере увеличения содержания в сыворотке вышеперечисленных показателей. Таким образом IL1β, TNFα, С-РБ, ЦП, ЛИИ и индекс нейтрофилы/лимфоциты можно считать доступными и информативными показателями оценки воспалительного процесса, возрастающими по мере прогрессирования начальных стадий ХБП у больных СД1.
Статья получена: 24.10.2024
Опубликовано online: 23.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.060
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1458
Оригинальное исследование Сравнительный анализ способов расчета торической интраокулярной линзы у пациентов после сквозной кератопластики
М. В. Синицын, А. А. Воскресенская, Н. А. Поздеева
Расчет торической интраокулярной линзы (тИОЛ) у пациентов после сквозной кератопластики (СКП) вызывает ряд сложностей. Целью исследования было провести сравнительный ретроспективный анализ различных способов расчета тИОЛ при факоэмульсификации катаракты (ФЭК) у пациентов после СКП. Был проведен анализ историй болезни 36 глаз (36 пациентов) после СКП, на которых была выполнена ФЭК с имплантацией тИОЛ. Все тИОЛ были пересчитаны четырьмя способами. В  группе 1 расчет тИОЛ проводили с применением данных кератометрии передней поверхности роговичного трансплантата, измеренных при помощи кератотопографа, и задней поверхности роговичного трансплантата — при помощи оптической когерентной томографии роговицы или шаймпфлюг-кератотопографа). В группе 2 измерение кератометрии обеих поверхностей роговичного трансплантата выполняли при помощи шаймпфлюг-кератотопографа, в группе 3 — на ОКТ роговицы, в группе 4 — при помощи кератотопографа. Для расчета тИОЛ в группах 1–3 применяли онлайн-калькулятор Barrett True — K Toric Calculator, в группе 4 — The Kane Formula. Была отмечена статистически значимая разница по значениям сферического и цилиндрического компонентов рефракции между исследуемыми группами (p < 0,05). Наибольшая предсказуемость расчета тИОЛ обнаружена в группе 1: попадание в послеоперационную рефракцию по сферическому компоненту в пределах ±0,5 дптр — в 58% глаз и в пределах ±1,0 дптр — в 67% глаз, по цилиндрическому компоненту — в пределах –0,5 дптр — в 56% глаз и в пределах –1,0 дптр — в 89% глаз. Таким образом, наибольшая предсказуемость расчета тИОЛ была отмечена у пациентов группы 1.
Статья получена: 11.11.2024
Опубликовано online: 22.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.063
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1523
Оригинальное исследование Транскрипционный профиль в предоперационном тесте ингибиторами ароматазы у больных раком молочной железы
О. В. Бурменская, Д. Ю. Трофимов, В. В. Кометова, М. В. Родионова, В. В. Родионов
Тестовая предоперационная гормонотерапия стала стандартной процедурой лечения  ESR+/Her2-негативного рака молочной железы ранних стадий. Хорошим подспорьем в оценке эффективности данной терапии могут стать транскрипционные профили генов. Целью исследования было оценить изменения экспрессионной активности генов при проведении предоперационного теста на гормоночувствительность опухоли к ингибиторам ароматазы у женщин постменопаузального возраста при ESR+/HER2-негативном раке молочной железы. В исследование вошло 100 больных раком молочной железы, проходивших лечение в отделении патологии молочной железы ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова». Выполнено патоморфологическое исследование FFPE-блоков трепан-биопсии, проведенной до назначения теста на гормоночувствительность, и операционного материала, а также иммуногистохимическое (Ki67, ER, PR, HER2/neu) и молекулярно-генетическое исследование экспрессионной панели 45 целевых генов методом количественной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Применение ингибиторов ароматазы в предоперационном тесте на гормоночувствительность сопровождается статистически значимыми изменениями в экспрессии мРНК 37 генов в опухолях молочной железы, из них снижение уровня экспрессии установлено для 35 генов (ESR1, PGR, AR, ERBB2, FGFR4, MKI67, MYBL2, CCNB1, AURKA, BIRC5, CCND1, CCNE1, CDKN2A, KIF14, PPP2R2A, PTTG1, TMEM45B, TPX2, ANLN, MMP11, CTSL2, EMSY, PAK1, BCL2, BAG1, PTEN, TYMS, EXO1, UBE2T, NAT1, SCGB2A2, GATA3, FOXA1, ZNF703, CD274/PD-L1), повышение для 2 генов (SFRP1, KRT5). Полученные результаты могут быть использованы в дальнейшем при разработке теста на гормоночувствительность и персонификации адъювантной системной терапии больных раком молочной железы.
Статья получена: 08.11.2024
Опубликовано online: 21.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.059
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1219
Оригинальное исследование Штаммы Mycobacterium tuberculosis с мутациями в gyrA различаются по уровню конкурентного фитнеса
С. Н. Андреевская, Т. Г. Смирнова, Л. Н. Черноусова, Е. Е. Ларионова, Э. В. Севастьянова, В. В. Устинова, Е. А. Киселева, А. Эргешов
В процессе формирования устойчивости M. tuberculosis к фторхинолонам в организме хозяина могут одновременно сосуществовать пулы M. tuberculosis, чувствительные к препаратам этой группы, и пулы M. tuberculosis с различными детерминантами устойчивости. Целью исследования было изучить особенности роста in vitro штаммов M. tuberculosis, отличающихся генетическими детерминантами устойчивости к фторхинолонам, в условиях конкуренции за питательные вещества. Исследование проведено на пяти клинических штаммах M. tuberculosis с множественной лекарственной устойчивостью, различающихся структурой gyrA. Штаммы культивировали попарно и индивидуально в оптимальных условиях (среда Middlebrook 7H9) и в условиях мультистресса (50% среда Middlebrook 7H9, 2 мМ KNO2, 0,02% H2O2). Время эксперимента составило 21 сутки. Число клеток каждого из совместно культивируемых штаммов оценивали по калибровочным кривым зависимости порогового цикла полимеразной цепной реакции по целевому для мутации каналу от концентрации клеток M. tuberculosis. По числу клеток каждого штамма при совместном культивировании вычисляли величину конкурентного фитнеса и удельную скорость роста. Было установлено, что штаммы M. tuberculosis с мутациями в gyrA уступали в скорости роста штамму с диким типом gyrA, что было особенно сильно выражено в условиях мультистресса. Штамм с наиболее распространенной мутацией gyrA_D94G имел наименьшую скорость роста из всех исследованных штаммов. Была высказана гипотеза, что медленный рост M. tuberculosis с этой мутацией может приводить к толерантности к противотуберкулезным препаратам и в результате этого штамм получает преимущество в условиях химиотерапии по сравнению с другими мутантными по gyrA вариантами.
Статья получена: 05.11.2024
Опубликовано online: 19.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.058
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1239
Оригинальное исследование Микрореконструктивные технологии подшивания интраокулярной линзы к радужке с полным сохранением ее функций
Х. П. Тахчиди
Имплантация интраокулярной линзы (ИОЛ) в капсульный мешок на сегодняшний день признана стандартом в хирургическом лечении пациентов с катарактой и афакией различного генеза. Несмотря на это существует ряд причин и состояний, при которых имплантация линзы в капсульную сумку не представляется возможной или связана с высоким риском ее нестабильной фиксации: несостоятельность связочного аппарата хрусталика, разрушение цинновых связок, в том числе дислокация комплекса «ИОЛ — капсульный мешок» в послеоперационном периоде; повреждение или удаление капсульного мешка во время операции, а также его отсутствие или разрушение при имплантации на афакичных глазах. На сегодняшний день проблемы фиксации и центрации ИОЛ в случаях нестандартных ситуаций, связанных с несостоятельностью или отсутствием «капсульной поддержки», остаются нерешенными. Целью исследования было разработать технологии подшивания ИОЛ к радужке с полным сохранением ее функций, при различных ситуациях несостоятельности или отсутствии возможности фиксации и центрации линзы в капсульном мешке. Пациенты (n = 12; 12 глаз) в зависимости от клинической ситуации были разделены на группы: группа 1 — дислокации комплекса «ИОЛ — капсульный мешок» (6 глаз); группа 2 — полное отсутствие «капсульной поддержки» (3 глаза); группа 3 — несостоятельность «капсульной поддержки» (3 глаза). Для каждой ситуации из этих трех групп была разработана отдельная технология подшивания. В результате проведенного лечения получены высокие клинико-функциональные результаты за счет надежной фиксации и высококачественной центрации ИОЛ, а также полного сохранения объема функций и косметических свойств радужки.
Статья получена: 14.10.2024
Опубликовано online: 18.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.057
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1314
Оригинальное исследование Оценка влияния хронического радиационного воздействия на потерю теломерных участков хромосом в Т-лимфоцитах у женщин
Я. В. Кривощапова
Более 60 лет назад жители прибрежных сел реки Теча были подвержены хроническому облучению в широком диапазоне доз. Предметом исследования были теломерные районы в метафазных хромосомах культивированных Т-лимфоцитов периферической крови. Целью исследования было оценить влияние хронического облучения на потери теломерных участков хромосом у облученных женщин Южного Урала с применением метода флуоресцентного окрашивания. Определяли хроматидные и хромосомные потери теломерных участков хромосом в трех дозовых подгруппах: группа сравнения (0–0,01 Гр), группа облучения дозой 0,2–0,9 Гр и группа облучения дозой 1–4,6 Гр. В выборке жителей Южного Урала женского пола, подвергшихся хроническому облучению в диапазоне поглощенных доз на ККМ от 0 до 4,6 Гр, было установлено, что хроматидные потери теломер для группы сравнения и группы облученных в дозе более 1 Гр статистически не различимы (p > 0,33), в то же время группа облученных средними дозами 0,2–0,9 Гр статистически отличается от них (p < 0,05). Для хромосомных потерь установлено статистически значимое различие между всеми группами (p < 0,05). Согласно полученным данным, теломерные потери присутствуют в 99,85% клеток доноров. Достоверно чаще во всех группах встречались потери теломерного участка на одной из хроматид. Таким образом, в группе с дозой 0,2–0,9 Гр среднее число потерь хроматид выше и статистически значимо отличается от других групп женского пола в исследуемом возрастном диапазоне.
Статья получена: 16.10.2024
Опубликовано online: 13.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.055
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1191
Оригинальное исследование Исследование дисфункции нижних мочевыводящих путей у женщин с рассеянным склерозом
Е. И. Лузанова, М. И. Карпова, О. С. Абрамовских, Е. А. Четвернина, С. В. Куприянов, М. А. Зотова, А. В. Бершадский
Рассеянный склероз (РС) — хроническое заболевание центральной нервной системы, преимущественно поражающее молодых женщин. Нейрогенная дисфункция нижних мочевыводящих путей (ДНМП) — одно из проявлений заболевания, оно создает риски инфекционных осложнений и поражения почек. В настоящее время недостаточно данных о составе микрофлоры мочи, полученных современными высокотехнологичными методами диагностики. Целью исследования было дать клиническую оценку ДНМП при РС, влияния ее на качество жизни (КЖ), а также уточнить данные о составе микрофлоры мочи. Для обследования 33 женщин с РС в возрасте 36 [39,5; 30,5] лет использовали специализированные опросники для оценки частоты и степени тяжести ДНМП, оценки уровня КЖ. Качественный и количественный состав условно-патогенной микрофлоры (УПМ) мочи определяли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. У 19 (57,6%) женщин с РС были симптомы ДНМП: симптомы фазы накопления (15 человек, 45,5%) и фазы опорожнения (16 человек, 48,5%). Почти у половины женщин с РС жалобы включали симптомы нарушения обеих фаз работы мочевого пузыря (12 человек, 36,4%), преобладали среднетяжелые нарушения (12 человек, 34,6%). Женщины с РС и ДНМП были более инвалидизированы согласно шкале EDSS (3,5 [5,0; 3,0] баллов; p < 0,001) и имели больший стаж болезни (13 [20,0; 5,0] лет; p < 0,001). Индекс КЖ у женщин с ДНМП отражал неудовлетворенность функцией мочевого пузыря. В результате исследования выявлено наличие бактериурии у пациенток с РС и ДНМП. Представлены данные о составе микрофлоры мочи: в 8 образцах от женщин с РС и ДНМП обнаружены представители УПМ (бактерии группы ESKAPE). Бактериурия имела бессимптомный характер.
Статья получена: 21.10.2024
Опубликовано online: 12.12.2024
DOI: 10.24075/vrgmu.2024.056
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 1408