Авторские права: © 2024 принадлежат авторам. Лицензиат: РНИМУ им. Н.И. Пирогова.
Статья размещена в открытом доступе и распространяется на условиях лицензии Creative Commons Attribution (CC BY).

ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Рекомбинантный вирус осповакцины, экспрессирующий интерферон типа 1 как платформа для селективной иммунотерапии глиобластомы и меланомы

Информация об авторах

1 Институт молекулярной биологии имени Энгельгардта Российской академии наук, Москва, Россия

2 Федеральный научно-клинический центр специализированных видов медицинской помощи и медицинских технологий Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия

3 Федеральный центр мозга и нейротехнологий Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия

4 Научно-исследовательский институт пульмонологии Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия

Для корреспонденции: Анастасия Валерьевна Липатова
ул. Вавилова, д. 32/1, г. Москва, 119991, Россия; moc.liamg@vnaavotapil

Информация о статье

Финансирование: создание рекомбинантных штаммов вируса осповакцины было выполнено при поддержке гранта Российского научного фонда № 23-14-00370, изучение их свойств на моделях in vitro и in vivo проводилось при подержке гранта Российского научного фонда № 22-64-00057, гистологические и иммуногистохимические исследования опухолевой ткани проводили при поддержке ФМБА России.

Вклад авторов: Е. Р. Набережная — реализация экспериментов in vitro и in vivo, написание рукописи; А. В. Соболева — получение данных проточной цитометрии, определение чувствительности линий к вирусам; П. О. Воробьёв — создание рекомбинантных вирусов, наработка препаративных количеств штаммов; В. В. Вадехина — проведение экспериментов in vivo; Г. М. Юсубалиева — интерпретация данных эксперимента in vivo, написание статьи; И. В. Исаева — проведение гистологического и иммуногистохимического исследования; В. П. Баклаушев — проведение микроскопии, описание гистологических и иммуногистохимических данных, подготовка рисунка, написание статьи; П. М. Чумаков, редактирование рукописи; А. В. Липатова — концепция исследования, общее руководство проектом.

Соблюдение этических стандартов: исследование in vivo одобрено этическим комитетом ФГБУ ФНКЦ ФМБА России (протокол № 7 от 06 сентября 2022 г.), проведено в соответствии с рекомендациями Коллегии ЕЭК от 14.11.2023 № 33 «О Руководстве по работе с лабораторными (экспериментальными) животными при проведении доклинических (неклинических) исследований». Число животных в группах было минимизировано, размеры подкожных опухолей в группах не превышали 2000 мм3. Эксперименты in vitro проведены на коммерчески доступных линиях клеток животных и человека.

Статья получена: 26.11.2024 Статья принята к печати: 19.12.2024 Опубликовано online: 30.12.2024
|
Рис. 1. Схематичная иллюстрация конструкции плазмиды
Рис. 2. Фотографии клеток BHK-21 через 24 ч после инфицирования LIVP-mIFNα (А–В) и LIVP-hIFNα (Г–Е) (А, Г — в светлом поле; Б, Д — в красном флуоресцентном канале; В, Е — совмещенное изображение). Увеличение: ×200; отрезок = 100 мкм
Рис. 3. Оценка кинетики репликации вируса через 24, 48, 72 и 96 ч после инфицирования рекомбинантным штаммом VV на различных клеточных линиях
Рис. 4. Чувствительность опухолевых и нормальных клеточных линий к вирусу осповакцины, экспрессирующему tagRFP и А) экспрессирующему человеческий IFNα и Б) мышиный IFNα. По оси абсцисс показаны линии опухолевых клеток, по оси ординат — lgTCID50/мл
Рис. 5. Оценка функциональной активности интерферонов, экспрессируемых штаммами LIVP-hIFNα на клеточной линии U87-MG (А) или LIVP-mIFNα на клеточной линии B16 (Б)
Рис. 6. Динамика роста опухолей после инъекции LIVP-mIFNα
Рис. 7. Гистологическое и иммуногистохимическое исследование препаратов опухолей через 24 дня после инокуляции. А. Окрашивание гематоксилином и эозином (слева общий вид опухоли, справа фрагменты с увеличением ×200). Б. Иммуногистохимическое окрашивание на кластеры дифференцировки: СD4, CD8, CD56. Сверху вниз показаны репрезентативные препараты животных из контрольной группы, группы с LIVP-RFP и группы LIVP-mIFNα соответственно