Оригинальное исследование Оптимизация условий культивирования В-клеток человека для экспансии активированных или дифференцированных В-клеток
С. Р. Соколова, И. Л. Григорова
Культуры В-клеток in vitro имеют важное значение для фундаментальной и прикладной науки: они могут быть использованы для изучения антигенной специфичности В- и T-клеток, а также для получения моноклональных антител и других биопрепаратов. Поэтому создание оптимальных протоколов культивирования активированных В-клеток, антитело-секретирующих клеток (АСК) и B-клеток герминативных центров (ГЦ) in vitro остается актуальной задачей. Целю работы было подобрать условия, обеспечивающие: высокий уровень экспансии и выживаемости В-клеток, накопление АСК, образование и накопление В-клеток ГЦ. Для этого В-клетки CD27– и/или CD27+ из периферической крови человека культивировали в присутствии фидерной линии 3T3-hCD40L, различных комбинаций цитокинов (IL21, IL4, BAFF), компонентов человеческой сыворотки или в контрольных условиях в течение 7 дней. Цитофлуориметрический анализ В-клеточных культур показал, что совместное присутствие CD40L и IL21 необходимо для достижения высокой экспансии, выживаемости и дифференцировки В-клеток с образованием CD27highCD38high АСК и CD95highBcl-6+ ГЦ-подобных клеток. Наибольшая экспансия наблюдалась в культурах из CD27-наивных клеток в присутствии компонентов человеческой сыворотки, добавление IL4 умеренно повышало долю ГЦ-подобных клеток. Максимальное накопление АСК наблюдалось в культурах из CD27+-В-клетки памяти. Разработанный подход позволил подобрать оптимальные условия для культивирования В-клеток in vitro, а также наглядно продемонстрировал влияние как отдельных цитокинов IL-21, IL-4, BAFF, так и их комбинаций на В-клеточные культуры из различных субпопуляций.
Статья получена: 26.09.2025
Опубликовано online: 30.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.053
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 341
Оригинальное исследование Нейрофизиологические маркеры иллюзии, вызванной зеркальной визуальной обратной связью
О. А. Мокиенко, П. Д. Бобров, А. А. Соловьева, М. Р. Исаев, Я. В. Керечанин, В. Ю. Ратникова, В. А. Катайцев, Е. Д. Шагина, В. Б. Никишина
Нейрофизиологические механизмы иллюзии, вызванной зеркальной визуальной обратной связью, остаются недостаточно изученными, несмотря на клиническое применение зеркальной терапии при фантомном болевом синдроме и при постинсультном гемипарезе. Цель исследования — определить нейрофизиологические корреляты зеркальной иллюзии у здоровых людей методами одновременной регистрации электроэнцефалографии (ЭЭГ) и ближней инфракрасной спектроскопии (БИКС). Обследовано 30 здоровых добровольцев (12 мужчин, 18 женщин; средний возраст 24 ± 8 лет). Экспериментальная процедура включала три блока: бимануальное движение без зеркала, движение одной рукой с зеркалом; тактильная стимуляция с зеркалом. Анализировали степень десинхронизации ЭЭГ-ритмов альфа-диапазона (8–13 Гц) в первичных сенсомоторных областях, дополнительной моторной области и задней теменной коре, а также методом БИКС, изменение концентрации окси- и дезоксигемоглобина (HbO и HbR). При движении рукой с зеркалом происходила билатеральная активация первичных сенсомоторных областей обоих полушарий: десинхронизация мю-ритма 9,71 [2,82; 16,20]%, в контралатеральном и 5,64 [2,84; 12,13]% в ипсилатеральном полушарии (p = 0,797), а также увеличение концентрации HbO на 6,88 [3,07; 17,20] нмоль/л в контралатеральном и на 4,91 [0,11; 14,59] нмоль/л в ипсилатеральном полушарии (p = 0,094). Корреляции между ЭЭГ и БИКС-показателями выявлены лишь в задней теменной коре (rs = 0,527, p = 0,003). Субъективные характеристики иллюзии коррелировали с эмоциональной реакцией, и лишь отдельные из них слабо коррелировали с нейрофизиологическими показателями. ЭЭГ и БИКС дополняют, но не заменяют друг друга при изучении зеркальной иллюзии, формирование которой обусловлено многоуровневой сетевой организацией мозговых процессов.
Статья получена: 29.09.2025
Опубликовано online: 28.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.052
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 452
Мнение Перспективы поиска патогенетически обоснованной терапии эпилепсии, ассоциированной с глиомой головного мозга
Т. И. Ашхацава, В. А. Калинин, А. В. Якунина, И. Е. Повереннова
В последние десятилетия научные исследования глиальных опухолей головного мозга в большей степени сосредоточены на изучении биохимических и молекулярных механизмов как в самой опухолевой, так и в перитуморальной ткани, что открывает новые и беспрецедентные перспективы в понимании патогенеза и терапии эпилепсии, ассоциированной с глиомами. Данные свидетельствуют о том, что нейроны играют центральную роль в росте опухоли и, в свою очередь, раковые клетки могут изменять конфигурацию нервной системы и ее функций. В ткани, окружающей глиому, выявляются уровни внеклеточного глутамата до 100 раз выше, чем в здоровом мозге. В то же время существующие данные подтверждают концепцию о том, что возбуждающий нейромедиатор глутамат является важнейшим медиатором припадков, связанных с глиомой. В статье описаны некоторые аспекты патогенеза глиомы головного мозга. По мнению авторов, современные противоэпилептические препараты могут влиять на течение опухолевого процесса. Представлен ряд противоэпилептических препаратов, имеющих противоопухолевый потенциал.
Статья получена: 18.09.2025
Опубликовано online: 27.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.051
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 315
Оригинальное исследование Молекулярно-цитогенетическая характеристика редкого случая рекомбинантной хромосомы 22 вследствие материнской интрахромосомной инсерции
Д. А. Юрченко, Ж. Г. Маркова, М. С. Петухова, Г. Н. Матющенко, Н. В. Шилова
Формирование рекомбинантных хромосом в потомстве носителей инверсий и инсерций представляет собой серьезную проблему клинической генетики в связи с высоким риском рождения детей с хромосомной патологией. Представлен клинический случай. Целью исследования было в ходе молекулярноцитогенетической диагностики рекомбинантной хромосомы 22 установить структуру и происхождение хромосомного дисбаланса у пациентки с задержкой моторного и психоречевого развития, черепно-лицевыми аномалиями и тугоухостью. При проведении хромосомного микроматричного анализа у пробанда с задержкой психомоторого развития и признаками дисморфогенеза были обнаружены три интерстициальные дупликации: 22q11.21, 22q12.3q13.1 и 22q13.2. FISH-анализ с использованием коммерческих и несерийных ДНК-зондов позволил установить, что у матери пациентки имеется сложная интрахромосомная перестройка: сочетание инициирующей парацентрической инверсии 22q11.21q12.3 и последующей межплечевой инсерции районов 22q11.21 и 22q12.3q13.1 в район ядрышкового организатора 22p12. Соответственно, выявленная у пробанда рекомбинантная хромосома является результатом сегрегации материнской сложной внутрихромосомной перестройки. Полученные результаты подчеркивают диагностическую ценность комплексного цитогеномного подхода для точной идентификации сложных хромосомных нарушений, определения их происхождения и оценки генетических рисков при медико-генетическом консультировании.
Статья получена: 16.09.2025
Опубликовано online: 26.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.050
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 279
Оригинальное исследование Реанимация радиоиммунологического метода определения аутоантител к инсулину
А. В. Тимофеев, Р. Р. Галимов, Е. А. Колесникова, А. С. Артюхов, Ю. С. Скоблов, С. В. Тактаров
Аутоантитела к инсулину (insulin autoantibodies, IAA) — один из главных серологических маркеров сахарного диабета 1-го типа (СД1) — заболевания, обусловленного аутоиммунным разрушением β-клеток в островках  поджелудочной железы. Тестирование на IAA используют в ранней и дифференциальной диагностике СД1 и при скрининге на это заболевание. Лучшие зарубежные клинико-диагностические лаборатории (КДЛ) тестируют IAA с помощью разных вариантов радиоиммунологического анализа (РИА). Операционные параметры РИА — диагностическая чувствительность (ДЧ), диагностическая специфичность (ДС) и диагностическая точность (ДТ) — в среднем составляют, соответственно, 44%, 100% и 81%. К сожалению, в России РИА уже давно не применяют для определения IAA. Все российские КДЛ с этой целью используют тест-системы, основанные на иммуноферментном анализе (ИФА). У этих тест-систем ДЧ, ДС и ДТ в среднем составляют, соответственно, 24%, 87% и 62%, т. е. существенно ниже, чем у тест-систем РИА. Целью нашей работы было воспроизвести метод РИА IAA в КДЛ РДКБ. Метод основан на конкурентном связывании IAA с инсулином и инсулином, меченным 125I. Тестировали IAA в образцах сывороток пациентов с впервые выявленным СД1 и пациентов без этого заболевания. ДЧ, ДС и ДТ составили, соответственно, 43%, 100% и 73%. Таким образом, операционные параметры воспроизведенного нами метода РИА IAA приближаются к параметрам методов РИА, применяемых в зарубежных КДЛ, и существенно превосходят параметры метода ИФА.
Статья получена: 16.09.2025
Опубликовано online: 26.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.049
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 265
Оригинальное исследование Сравнительный анализ конструкций металлических каркасов эндоваскулярных спиралей
Е. В. Чепелева, К. В. Козырь, В. П. Бородин, В. В. Хахалкин, С. В. Владимиров, М. А. Махмудов, А. Г. Бадоян, А. А. Баранов, О. В. Крестьянинов
В современных условиях развитие отечественного производства медицинских изделий приобретает особое значение в контексте обеспечения устойчивости системы здравоохранения. Использование международного опыта при разработке эмболизационных спиралей с учетом возможностей российских производств позволит создать изделия, соответствующие мировым стандартам. Целью работы было провести систематический анализ шести моделей эндоваскулярных спиралей ведущих зарубежных производителей и комплексное изучение конструктивных особенностей металлических каркасов спирали, включая оценку геометрических параметров, используемых материалов и технических решений. По результатам исследования и их сопоставления с клиническими и экспериментальными литературными данными определены оптимальные параметры для создания прототипа спирали: диаметр проволоки 0,07–0,12 мм, замковый механизм типа «спираль-сердечник» и полимерный атравматический кончик. Данные решения обеспечивают оптимальное сочетание эксплуатационных характеристик и технологичности изготовления. Полученные результаты формируют основу для разработки отечественных аналогов, соответствующих современным клиническим требованиям, с учетом имеющихся производственных возможностей.
Статья получена: 15.09.2025
Опубликовано online: 23.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.048
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 311
Оригинальное исследование Панель IFN-I-индуцируемых генов при системной склеродермии: потенциал биомаркера стратификации
И. А. Шагина, М. А. Турчанинова, О. А. Головина, Л. С. Буфеева, Т. И. Журина, Р. Ф. Сайфуллин, М. Ю. Мышкин, З. Ю. Мутовина, О. В. Британова
Системная склеродермия (ССД) остается заболеванием с высокой летальностью; валидированных биомаркеров для стратификации и мониторинга недостаточно.  Целью работы было изучить экспрессию разработанной панели IFN-I-индуцируемых генов (IFI27, IFI44, IFIT3, ISG15, XAF1) в периферической крови и пораженной коже при ССД. Исследовали образцы 48 пациентов с ССД и 31 здорового донора. Экспрессию генов определяли методом RT-qPCR (ΔΔCt) с нормировкой по референсному гену «домашнего хозяйства»; экспрессию гена SFRP4 использовали как маркер кожного фиброза. Экспрессия IFN-I-индуцируемых генов была достоверно (p < 0,1) повышена как в крови, так и в коже пациентов с ССД относительно образцов здоровых доноров. Сопоставление экспрессии между компартментами показало, что уровни экспрессии генов XAF1, IFI44, IFIT3, ISG15 в крови пациентов выше (p < 0,01), чем в образцах кожи. Экспрессия гена IFI27, напротив, более выражена в коже (p < 0,01). Результаты исследования показывают, что разработанная тест-система оценки интерфероновой сигнатуры потенциально может быть использована как неинвазивный инструмент стратификации пациентов с ССД по анализу РНК, полученной из образца крови, в том числе для обоснования назначения терапии блокаторами рецептора IFN-I.
Статья получена: 06.09.2025
Опубликовано online: 21.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.047
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 395
Оригинальное исследование Изменения митохондриального и лизосомного компартментов в условиях химиоиндуцированной сенесцентности
Р. О. Шаталова, Д. В. Шевырев
Старение связано с накоплением сенесцентных клеток, для которых характерно изменение функций, укорочение теломер, остановка клеточного цикла, устойчивость к апоптозу и метаболические нарушения. В последние годы широко изучают различные аспекты сенесцентности не только в контексте старения, но и в отношении терапии опухолей, так как сенесцентность в различных клетках опухоли может по-разному влиять на ход патологического процесса. Целью исследования было провести сравнительный анализ распространенных химиотерапевтических препаратов в контексте индукции сенесцентности и влияния на митохондриальный и лизосомный компартменты фибробластов, выделенных из кожи мышей линии C57BL/6. Сенесцентность клеток оценивали с помощью хромогенного и флуоресцентного методов определения активности фермента β-Gal. Окрашивание митохондрий проводили с использованием потенциалзависимого красителя MitoTracker® Orange, лизосомы окрашивали с помощью LysoTracker® Red. Для анализа использовали проточный цитометр BD LSRFortessa. В результате было выявлено значительное снижение митохондриального потенциала и усиление интенсивности флуоресценции лизосом в клетках с химиоиндуцированной сенесцентностью. Использование разработанного нами интегрального индекса индукции сенесцентности позволило установить, что влияние доксорубицина с точки зрения индукции сенесцентности и влияния на митохондриальный и лизосомный компартменты выражено сильнее, чем у цисплатина, блеомицина и этопозида.
Статья получена: 06.09.2025
Опубликовано online: 19.10.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.045
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 442