Метод Подготовка и алгоритм исследования адгезированных на поверхности биокерамики клеток методом сканирующей электронной микроскопии
К. В. Данилко, В. А. Солнцев, Р. В. Плотницкий, А. В. Михайлова, А. Р. Билялов, С. С. Чугунов, М. Ф. Галаутдинов, В. Н. Акбашев, И. Ш. Ахатов
Метод сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) в настоящее время позволяет анализировать поверхности различных материалов, в том числе эукариотических клеток. Способность клеток различных тканей организма прикрепляться и расти на поверхности материалов для имплантации служит важной характеристикой их биосовместимости. СЭМ позволяет напрямую визуализировать характер контакта клеток с поверхностью. Однако методика подготовки проб к анализу традиционно требует высокой степени обезвоживания образца и применения токсичного тетраоксида осмия. Целью работы было провести оптимизацию методики подготовки животных клеток, растущих на поверхности биокерамических образцов, к анализу с помощью СЭМ. В работе предложена методика подготовки мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани человека, выращенных на поверхности трех типов биокерамических образцов, к анализу с помощью СЭМ. Она включает фиксацию с помощью альдегида, спиртовое обезвоживание, подкрашивание красителем Гимзы и высушивание с последующим напылением золота. Предложен также алгоритм поиска прикрепленных клеток на поверхности пористого и шероховатого материала. Данный подход позволяет быстро подготовить клетки к СЭМ-анализу без использования высокотоксичных реагентов.
Статья получена: 13.11.2025
Опубликовано online: 17.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.072
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 151
Оригинальное исследование Транскрипционная киназа CDK8, но не CDK19 способствует развитию атеросклеротических поражений у мышей
А. Н. Незнамов, Ю. П. Байкова, Е. Н. Коршунов, Е. М. Исаева, А. В. Брутер, М. В. Кубекина
Атеросклероз, являющийся основной причиной инфаркта миокарда и инсульта, остается глобальной медико-социальной проблемой. Несмотря на его признание в качестве хронического воспалительного заболевания, внутриклеточные молекулярные механизмы, управляющие прогрессированием болезни, изучены недостаточно. Циклин-зависимые киназы CDK8 и CDK19, являющиеся ключевыми регуляторами транскрипции и воспаления, потенциально могут играть значительную роль в патогенезе атеросклероза. Целью исследования было изучить влияние нокаута генов Cdk8 и Cdk19 на развитие атеросклеротических поражений у мышей с дефицитом аполипопротеина E (ApoE⁻/⁻). Показано, что как эндотелиоспецифичный, так и системный нокаут Cdk8 достоверно снижает площадь атеросклеротических поражений аорты, причем тотальный нокаут оказывает более выраженный антиатерогенный эффект. Это свидетельствует о плейотропной роли CDK8 в патогенезе атеросклероза, опосредованной его функцией не только в эндотелиальных клетках, но и, вероятно, в макрофагах. В отличие от Cdk8, системный нокаут Cdk19 не оказал значимого влияния на развитие атеросклероза. Таким образом, CDK8, но не CDK19, идентифицирован в качестве проатерогенного регулятора, что делает его перспективной мишенью для разработки новых терапевтических стратегий.
Статья получена: 31.10.2025
Опубликовано online: 16.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.078
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 188
Оригинальное исследование Особенности системного воспалительного статуса пациенток при эндометрит-ассоциированном бесплодии
О. Е. Савельева, Т. А. Криволесова, А. С. Жигалина, Л. П. Сигарева, А. В. Сабуров, В. А. Резник
Среди заболеваний эндометрия, снижающих его репродуктивный потенциал, ведущую роль играет хронический эндометрит (ХЭ). Патогенетически значимые воспалительные маркеры, такие как цитокины, воспалительные белки и гематологические индексы пока не нашли широкого применения в медицинской практике для диагностики ХЭ. Цель исследования — оценить показатели системного воспалительного статуса, включая гематологические лабораторные параметры и воспалительные индексы, у пациенток с бесплодием и определить их диагностическую значимость при ХЭ. Представлены данные исследования 50 пациенток с бесплодием. Подсчет количества лейкоцитов крови проводили стандартным гематологическим методом. На основе клеточного состава крови рассчитывали воспалительные индексы NLR, MLR, PLR и SII. Концентрацию СРБ в сыворотке крови определяли методом иммуноферментного анализа. У пациенток с бесплодием, ассоциированным с ХЭ, абсолютное и относительное количество лимфоцитов было ниже (p = 0,0451 и p = 0,0089 соответственно), а относительное количество моноцитов и базофилов было выше (p = 0,0469 и p = 0,0005 соответственно), чем у пациенток без ХЭ. У пациенток из исследуемой группы концентрация СРБ в крови была почти в 4 раза выше, чем у пациенток из группы сравнения (p = 0,0191). При этом все показатели оставались в пределах нормальных значений. Сравнительный анализ индексов NLR, MLR, PLR и SII показал их статистически значимое повышение при бесплодии, ассоциированном с ХЭ (p = 0,0387, p = 0,0058, p = 0,0335 и p = 0,0333 соответственно). ROC- анализ позволил установить предиктивную значимость у индексов NLR (0,871 (95% ДИ: 0,767–0,974); p < 0,0001) и MLR (0,848 (95% ДИ: 0,737–0,958); p < 0,0001) для выявления ХЭ у пациенток с бесплодием.
Статья получена: 29.10.2025
Опубликовано online: 15.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.071
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 234
Оригинальное исследование HMGB1 и анти-HMGB1 антитела при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях
М. М. Меламуд, Е. А. Ермаков, А. С. Толмачева, А. Э. Сизиков, Н. А. Кляус, Г. А. Невинский, В. Н. Бунева
Белок B1 группы высокой подвижности (англ. high-mobility group protein B1, HMGB1) относится к аларминам ― группе молекул, участвующих в воспалительных реакциях. HMGB1 активно изучают в контексте некоторых ревматических заболеваний (РЗ), включая системную красную волчанку (СКВ), ревматоидный артрит (РА), анкилозирующий спондилит (АС) и псориатический артрит (ПсА), однако накопленных знаний недостаточно. HMGB1 может также выступать антигеном, но уровень анти-HMGB1 антител плохо изучен при РЗ. Целью работы было изучить концентрации HMGB1 и анти-HMGB1 антител при четырех РЗ. Методом иммуноферментного анализа проанализированы образцы плазмы пациентов с РА (n = 60), АС (n = 60), СКВ (n = 24), ПсА (n = 30) и здоровых доноров (ЗД) ( n= 60). После поправки на возраст и длительность заболевания показано, что концентрация HMGB1 достоверно повышалась при СКВ (p < 0,01), РА (p < 0,01) и АС (p = 0,017), а при ПсА выявлено статистически незначимое повышение HMGB1 (p = 0,07) по сравнению с ЗД. Среди четырех заболеваний наибольший уровень HMGB1 выявлен при СКВ (p < 0,01). Концентрация анти-HMGB1 антител оказалась также выше при СКВ (p < 0,01), РА (p = 0,026) и АС (p = 0,028). Методами корреляционного и регрессионного анализа установлена выраженная прямая ассоциация между уровнем HMGB1 и индексом DAS28 при РА (p < 0,01 для обоих анализов). Результаты работы описывают характерные изменения уровня HMGB1 и анти-HMGB1 антител при РЗ и указывают на вовлеченность HMGB1 в патогенез этих заболеваний.
Статья получена: 29.10.2025
Опубликовано online: 14.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.074
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 170
Оригинальное исследование Урогенитальные зонды типа Пайпель-C не предотвращают контаминацию эндометриальных образцов цервикальной микробиотой
Д. Л. Зорников, А. А. Бехтер, Д. О. Корнилов, В. М. Симарзина, Д. М. Нечаева, А. Е. Карякина, М. А. Лешукова, П. Г. Аминева, Е. С. Ворошилина
Существенным методологическим ограничением в изучении микробиома эндометрия выступает риск контаминации проб цервикальной микробиотой в ходе трансцервикального взятия материала. Целью работы было экспериментально оценить эффективность урогенитальных зондов типов Пайпель-C1 (Пайпель-биопсия) и Пайпель-C2 (Эндобраш) в предотвращении данного вида контаминации. Для этого была разработана in vitro модель шейки матки двух типов (с цилиндрическим и щелевидным каналом), заполненная модельной цервикальной слизью с известным количеством бактериальной ДНК. После прохождения зондами через модельный цервикальный канал выполняли забор «эндометриальной» пробы (стерильный воздух) с последующим количественным ПЦР-анализом. Оба типа зондов продемонстрировали значительный перенос бактериальной ДНК из цервикальной слизи в эндометриальную пробу. Медианный перенос общей бактериальной ДНК составил 81,6% [54,4–107] для Пайпель-C1 и 29,8% [14,8–56,3] для Пайпель-C2 (p = 0,009). Ни один из зондов не обеспечивал защиты от контаминации на уровне, позволяющем достоверно интерпретировать состав микробиоты эндометрия. Эффективность зондов в предотвращении контаминации зависела от анатомической формы канала и конкретной группы микроорганизмов. Полученные результаты свидетельствуют, что ни один из исследованных зондов не обеспечивает надежной защиты от контаминации, что затрудняет интерпретацию данных о составе микробиоты эндометрия в трансцервикально полученных образцах и указывает на целесообразность изучения совокупной цервико-эндометриальной микробиоты.
Статья получена: 18.11.2025
Опубликовано online: 13.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.073
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 258
Оригинальное исследование Количество копий рибосомных генов в лейкоцитах периферической крови у женщин с физиологической и осложненной беременностью
Е. С. Ершова, Н. Н. Вейко, Э. В. Костюк, А. А. Полеткина, Т. М. Рожнова, Н. В. Низяева, Д. У. Музаффаров, П. А. Клименко, С. В. Костюк
Беременность требует от клеток организма женщины повышенного уровня биогенеза рибосом для увеличения интенсивности синтеза белка. Количество рибосом зависит от числа копий рибосомных генов в геноме (ЧК рДНК). Целью исследования было проверить гипотезу об ассоциации ЧК рДНК в геноме женщины с протеканием нормальной и осложненной беременности. Выборка 488 беременных (25–39 недель) включала группы: 1) беременность без патологии (контроль); 2) нарушение маточно-плацентарного кровотока и фетоплацентарная недостаточность; 3) врожденные пороки развития; 4) истмико-цервикальная недостаточность; 5) преждевременное созревание плаценты; 6) дихориальная диамниотическая двойня; 7) многоводие; 8) крупный плод. ЧК рДНК определяли методом количественной гибридизации в ДНК, выделенной из лейкоцитов периферической крови. ЧК рДНК варьировало от 226 до 800 (n = 488). В группах 3–8 отсутствовали образцы ДНК с ЧК рДНК менее 290. Группы 5–8 не содержали образцов с ЧК рДНК более 520 и суммарно отличались от группы 1 низкими значениями ЧК рДНК (средние значения 360–381 для групп 3–8  и 452 копии для группы 1; p < 10–7). Диапазон ЧК рДНК от 290 до 520 в геноме женщины (адаптивная норма, характерная для долгожителей) является оптимальным с точки зрения успешного завершения беременности при наличии осложнений. Низкое ЧК рДНК (200–290) в геноме ассоциировано с невозможностью реализации эмбриогенеза при наличии патологии/особенности плода. Большое содержание рДНК (более 600 копий) указывает на наличие в геноме женщины генетических вариантов, которые могут препятствовать протеканию осложненной беременности. Определение ЧК рДНК в геноме супружеских пар может быть полезным для планирования и прогнозирования течения беременности.
Статья получена: 23.10.2025
Опубликовано online: 12.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.075
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 240
Оригинальное исследование Реконсолидация ранних воспоминаний в переживаниях травматического опыта участия в боевых действиях
Е. А. Петраш, Н. Ю. Юнина-Пакулова, С. А. Курышина, А. С. Карпенко, А. А. Кузнецова
Память во всем многообразии видов и процессов, обеспечивающих ее функционирование, обладает психотерапевтическим ресурсом, который реализуется при работе с проявлениями посттравматического стрессового расстройства (ПТСР). Одним из них являются навязчивые повторяющиеся воспоминания с травматическим содержанием. Цель данного исследования — изучить реконсолидацию ранних воспоминаний в переживаниях травматического опыта участия в боевых действиях. Общий объем выборки составил 62 человека (мужчины в возрасте 21–46 лет). В экспериментальную группу вошли 31 респондент с опытом участия в боевых действиях в статусе ветерана боевых действий (средний срок участия составил 1 год 5 месяцев). Контрольная группа состояла из 31 респондента без опыта участия в боевых действиях. Использовали Краткую шкалу оценки психического статуса (MMSE), набор функциональных нейропсихологических проб («10 слов» А. Р. Лурия, методику «Пиктограммы» А. Р. Лурия, методику «Трудновербализуемые фигуры» Т. В. Ахутиной, «Тест на воспроизведение ритмов» А. Р. Лурия), анализ стенограмм аудиозаписей ранних воспоминаний. Достоверно установлено, что раннее воспоминание положительной, отрицательной или нейтральной модальности, обусловленное влиянием опыта участия в боевых действиях, изменяется через механизм реконсолидации, что проявляется в лингвистических и семантических параметрах. Лингвосемантическая структура ранних воспоминаний ветеранов боевых действий характеризуется событийно-действенной моделью, с преобладанием глаголов и наречий. Семантическое ядро ранних воспоминаний ветеранов боевых действий чаще окрашено негативно, несмотря на общую амбивалентную или положительную модальность.
Статья получена: 25.10.2025
Опубликовано online: 11.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.069
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 359
Мнение Почвенные черви как источник новых подходов в биомедицинских исследованиях
А. Н. Хохлова, М. В. Вавилов, Т. В. Чепурных, Н. С. Родионова, В. Н. Петушков, И. В. Ямпольский, М. А. Дубинный
Применение почвенных червей в традиционной медицине имеет многовековую историю и охватывает широкий спектр патологических состояний. Современные исследования сосредоточены в основном на выделении и изучении биологически активных соединений. Среди значимых примеров можно выделить гликопротеин G90 с тромболитическими и противоопухолевыми свойствами, комплекс ферментов люмброкиназу, а также внеклеточный кислородтранспортный белок эритрокруорин, рассматриваемый как основа для разработки заменителей крови. Важную роль играют и модельные организмы, такие как Caenorhabditis elegans, используемые для изучения механизмов старения, нейродегенеративных заболеваний и оценки эффективности лекарственных средств. Особый интерес представляют биолюминесцентные системы кольчатых червей, продемонстрировавшие разнообразие химических механизмов свечения и наличие уникальных кофакторов, перспективные для развития практических приложений биомедицины. Совокупность этих направлений подчеркивает значимость червей как источника ферментов, белков, метаболитов и модельных систем, способных решать как фундаментальные, так и прикладные задачи в биомедицине.
Статья получена: 21.10.2025
Опубликовано online: 10.12.2025
DOI: 10.24075/vrgmu.2025.067
Комментарии 0
ПРОСМОТРЫ 278