ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Влияние модуляции активности р53 на взаимодействие членов семейства р53 в процессе дифференцировки кератиноцитов линии НаСаТ

Информация об авторах

1 Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В. Н. Ореховича, Москва, Россия

2 ООО НПО «Перспектива», Новосибирск, Россия

Для корреспонденции: Александр Леонидович Русанов
ул. Погодинская, д. 10, стр. 8, г. Москва, 119121; moc.liamg@vonasur.l.rednaxela

Информация о статье

Финансирование: работа, включающая нокдаун гена р53, ИФА и ПЦР-исследования, выполнена в рамках Программы фундаментальных научных исследований государственных академий наук на 2013–2020 годы; эксперименты с применением Nutlin-3a были проведены на базе ООО НПО «Перспектива» при поддержке РФФИ, научно-исследовательский проект 18-44-540031/19.

Вклад авторов: Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов — концепция исследования; Д. Д. Ромашин, П. М. Кожин, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов — дизайн исследования и анализ литературы; Д. Д. Ромашин, П. М. Кожин, М. Н. Карагяур — планирование и проведение исследования; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов — анализ и интерпретация данных; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин — подготовка текста статьи; П. М. Кожин, Д. Д. Ромашин, М. Н. Карагяур, Н. Г. Лузгина, А. Л. Русанов — редактирование рукописи, подготовка финального варианта статьи.

Соблюдение этических стандартов: исследование проведено в соответствии с требованиями Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации.

Статья получена: 27.11.2020 Статья принята к печати: 14.12.2020 Опубликовано online: 26.12.2020
|
Рис. 1. Эффекты модуляции TP53 посредством нокдауна и воздействия Nutlin-3a. А. Полуколичественное определение концентрации р53 в клетках дикого типа (WT) и в клетках с нокдауном TP53 (sh). Б. Метаболическая активность клеток (МТТ-тест) после воздействия Nutlin-3a. * — значимые различия между группами WT и sh (p < 0,05)
Рис. 2. Экспрессия маркеров дифференцировки в клетках HaCaT. A. Экспрессия IVL, KRT10, KRT14, CASP14, TGM1. Б. Иммунофлуоресцентная конфокальная микроскопия: KRT5 (красный), KRT10 (зеленый), DAPI (синий, ядра), увеличение х400. В. Обобщенная диаграмма интенсивности относительной флуоресценции в клетках. * — значимые различия между экспериментальными группами (sh, Nutlin-3a) и интактными клетками (WT K), p < 0,05
Рис. 3. Изменения экспрессии изоформ p63. A. Иммунофлуоресцентная конфокальная микроскопия: dNp63, TAp63 (красный), DAPI (синий), увеличение х400. Б. Обобщенная диаграмма интенсивности флуоресценции в цитоплазме и ядре клеток. В. Экспрессия изоформ TP63 (dNp63, TAp63). * — значимые различия между экспериментальными группами (sh, Nutlin-3a) и интактными клетками (WT K), p < 0,05
Таблица 1. Используемые праймеры